Home Cell Cycle Chk inibitore MK-8776 (SCH 900776)

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MK-8776 (SCH 900776) Chk inibitore

N. Cat.S2735

MK-8776 (SCH 900776) è un inibitore selettivo di Chk1 con IC50 di 3 nM in un saggio senza cellule, mostrando una selettività 500 volte superiore contro Chk2. È in Fase 2.
MK-8776 (SCH 900776) Chk inibitore Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 376.25

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Controllo Qualità

Lotto: Purezza: 99.98%
99.98

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro

Linee cellulari Tipo di saggio Concentrazione Tempo di incubazione Formulazione Descrizione dellattività PMID
SKOV3 Growth Inhibition Assay 0.3 µM 8 d sensitizes the cell lines to 23548269
BxPC-3 Growth Inhibition Assay 10-1000 nM 24-48h enhances the chemosensitization to 23804422
MiaPaCa-2 Growth Inhibition Assay 10-1000 nM 24-48h enhances the chemosensitization to 23804422
AsPC-1 Growth Inhibition Assay 10-1000 nM 24-48h enhances the chemosensitization to 23804422
H1299 Growth Inhibition Assay 500 nM 24 h DMSO enhances the chemosensitization to PMX 24113549
H1993 Growth Inhibition Assay 500 nM 24 h DMSO enhances the chemosensitization to PMX 24113549
H1437 Growth Inhibition Assay 500 nM 24 h DMSO enhances the chemosensitization to PMX 24113549
H23 Growth Inhibition Assay 500 nM 24 h DMSO enhances the chemosensitization to PMX 24113549
AsPC-1 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
TK10 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
A498 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
U20S Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
SNB19 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
MDA-MB-435 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
U87 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
HCC2998 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
MDA-MB-231 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
MiaPaCa-2 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
MCF10A Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
HCT116 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
IGROV-1 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
SW620 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
HCT115 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
U251 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
OVCAR-8 Growth Inhibition Assay 0.3 µM 8 d sensitizes the cell lines to 23548269
MV-4-11 Apoptosis Assay 100-700 nM 48 h induces apoptosis dose dependently 23536721
U937 Apoptosis Assay 100-700 nM 48 h induces apoptosis dose dependently 23536721
MOLM-13  Apoptosis Assay 100-700 nM 48 h induces apoptosis dose dependently 23536721
A2058  Cell Viability Assay 37.5-300 nM 72 h DMSO reduces the MK-1775 EC50 by 5-fold to an average of 45 nM 23148684
H2009 Cell Viability Assay 500 nM 72 h DMSO results in G1/S-phase accumulation combined with MK-1775 23148684
Su.86.86 Cell Viability Assay 500 nM 72 h DMSO results in G1/S-phase accumulation combined with MK-1775 23148684
HRE Cell Viability Assay 500 nM 72 h DMSO results in G1/S-phase accumulation combined with MK-1775 23148684
HMEC Cell Viability Assay 500 nM 72 h DMSO results in G1/S-phase accumulation combined with MK-1775 23148684
U2OS  Function Assay 2 µM 0-24 h induces phosphorylation of Chk1 at serine 345 at both concentrations as early as 2 h after administration 22937147
U2OS  Growth Inhibition Assay 0-10 µM 24/48 h inhibits cell growth dose dependently 22937147
U937 Function Assay 100-500 nM 4 h  decreases the cytarabine-induced Chk1 autophosphorylation at Ser296 and prevents Cdc25A downregulation 22869869
U937 Function Assay 100 nM 4 h  reverses the cytarabine-induced inhibition of 3H-thymidine incorporation into DNA 22869869
U937 Function Assay 100-500 nM 4 h  induces increased phosphorylation of H2AX 22869869
HL-60 Apoptosis Assay 30/100/300 nM 24 h DMSO enhances cytarabine-induced apoptosis 22869869
ML-1 Apoptosis Assay 25/50/100 nM 24 h DMSO enhances cytarabine-induced apoptosis 22869869
HCT116 Function Assay 1 µM 24 h abrogates of cell cycle arrest  22510560
U2OS Function Assay 1 µM 24 h abrogates of cell cycle arrest  22510560
Sf9 Function assay Inhibition of recombinant CDK2/Cyclin A expressed in insect Sf9 cells assessed as inhibition of [33P]-ATP incorporation into biotinylated histone H1 after 1 hr by liquid scintillation counting, IC50 = 0.16 μM. 21094607
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità

Peso molecolare 376.25 Formula

C15H18BrN7

 Conservazione (Dalla data di ricezione)
N. CAS 891494-63-6 Scarica SDF Conservazione delle soluzioni stock

Sinonimi N/A Smiles CN1C=C(C=N1)C2=C3N=C(C(=C(N3N=C2)N)Br)C4CCCNC4

Solubilità

In vitro
Lotto:

DMSO : 75 mg/mL (199.33 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa Concentrazione Volume Peso molecolare
Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo
Lotto:

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante lesperimento)

mg/kg g μL

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non cè una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH2O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nellaggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere allaggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno dacqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo dazione

Targets/IC50/Ki
Chk1
(Cell-free assay)
3 nM
CDK2
(Cell-free assay)
0.16 μM
In vitro

MK-8776 (SCH 900776) è un inibitore meno potente di Chk2 e CDK2 con IC50 di 1,5 μM e 0,16 μM, rispettivamente. Non mostra alcuna inibizione significativa delle isoforme microsomiali epatiche umane del citocromo P450 1A2, 2C9, 2C19, 2D6 e 3A4. In combinazione con un antimetabolita, questo composto induce l'accumulo di γ-H2AX entro 2 ore, indicativo di un collasso della forcella di replicazione e di rotture del DNA a doppio filamento. Inoltre, sopprime l'accumulo dell'autofosforilazione di Chk1 pS296 in modo dose-dipendente. L'esposizione delle cellule WS1 proliferanti a SCH 900776 è associata a un rapido accumulo dose-dipendente di Chk1 pS345, indicando che le popolazioni di cellule normali in ciclo inducono Chk1 pS345 dopo l'esposizione ad esso come parte di un ciclo futile, forse guidato dalle chinasi della famiglia AT e dalla DNA-PK.
Saggio chinasico
Saggio Chk1 SPA
Un saggio in vitro che utilizza His-Chk1 ricombinante espressa nel sistema di espressione del baculovirus come fonte enzimatica e peptide biotinilato basato su CDC25C come substrato. His-Chk1 viene diluito a 32 nM in tampone chinasi contenente 50 mM Tris pH 8,0, 10 mM MgCl2 e 1 mM DTT. Il peptide CDC25C (peptide biotinilato CDC25 Ser216 C-terminale) viene diluito a 1,93 μM in tampone chinasi. Per ogni reazione chinasi, 20 μL di soluzione enzimatica Chk1 a 32 nM e 20 μL di CDC25C a 1,926 μM vengono miscelati e combinati con 10 μL di MK-8776 (SCH 900776) diluito in 10% DMSO, ottenendo concentrazioni finali di reazione di 6,2 nM Chk1, 385 nM CDC25C e 1% DMSO dopo l'aggiunta della soluzione di avvio. La reazione viene avviata mediante l'aggiunta di 50 μL di soluzione di avvio composta da 2 μM ATP e 0,2 μCi di 33P-ATP, ottenendo una concentrazione finale di reazione di 1 μM ATP, con 0,2 μCi di 33P-ATP per reazione. Le reazioni chinasi vengono eseguite per 2 ore a temperatura ambiente e vengono arrestate mediante l'aggiunta di 100 μL di soluzione di arresto composta da 2 M NaCl, 1% H3PO4 e 5 mg/mL di perline SPA rivestite di streptavidina. Le perline SPA vengono catturate utilizzando una piastra filtrante GF/B a 96 pozzetti e un raccoglitore universale Filtermate. Le perline vengono lavate due volte con 2 M NaCl e due volte con 2 M NaCl con 1% di acido fosforico. Il segnale viene quindi analizzato utilizzando un contatore a scintillazione liquida TopCount a 96 pozzetti. Le curve dose-risposta vengono generate da diluizioni seriali doppie a 8 punti di questo composto. I valori di IC50 vengono derivati mediante analisi di regressione non lineare.
In vivo

L'escalation della dose di MK-8776 (SCH 900776) (16 mg/kg e 32 mg/kg) induce miglioramenti incrementali nella risposta tumorale. È importante sottolineare che le dosi di questo composto associate a una robusta attivazione dei biomarcatori e a una migliore risposta tumorale non sono associate a una maggiore tossicità sui parametri ematologici nei topi BALB/c.

Riferimenti
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34267371/

Applicazioni

Metodi Biomarcatori Immagini PMID
Western blot Cyclin E / pY15-CDK / γH2AX p-chk1(ser345) / CDC25A
S2735-WB2
26595527

Informazioni sullo studio clinico

(dati da https://clinicaltrials.gov, aggiornato il 2024-05-22)

Numero NCT Reclutamento Condizioni Sponsor/Collaboratori Data di inizio Fasi
NCT00779584 Completed
Hodgkin Disease|Lymphoma Non-Hodgkin|Neoplasms
Merck Sharp & Dohme LLC
 October 17 2008 Phase 1

Supporto tecnico

Istruzioni per la manipolazione

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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Domande Frequenti

Domanda 1:
I would like to know whether your product S2735 is the optically pure R enantiomer or whether it is a racemic mix.

Risposta:
It is the R enantiomer of our S2735.