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CHIR-124 Chk Inibitore

N. Cat.: S2683

CHIR-124 è un nuovo e potente inibitore di Chk1 con un IC50 di 0,3 nM in un saggio senza cellule. Mostra una selettività 2.000 volte superiore contro Chk2 e un'attività da 500 a 5.000 volte inferiore contro CDK2/4 e Cdc2.
CHIR-124 Chk Inibitore Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 419.91

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Controllo Qualità (Quality Control)

Lotto: Purezza: 99.48%
99.48

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Linee cellulari Tipo di saggio Concentrazione Tempo di incubazione Formulazione Descrizione dell'attività PMID
human MDA-MB-435 cells Cytotoxic assay Cytotoxicity against human MDA-MB-435 cells, EC50=0.08 μM
human MDA-MB-435 cells Cytotoxic assay Cytotoxicity against human MDA-MB-435 cells in presence of camptothecin
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecolare 419.91 Formula

C23H22ClN5O

 Conservazione (Dalla data di ricezione)
N. CAS 405168-58-3 Scarica SDF Conservazione delle soluzioni stock

Sinonimi N/A Smiles C1CN2CCC1C(C2)NC3=C(C(=O)NC4=C3C=C(C=C4)Cl)C5=NC6=CC=CC=C6N5

Solubilità (Solubility)

In vitro
Lotto:

DMSO : Insoluble
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa Concentrazione Volume Peso molecolare
Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo
Lotto:

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante l'esperimento)

mg/kg g μL

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non c'è una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH2O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nell'aggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere all'aggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno d'acqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo d'azione (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
Chk1
(Cell-free assay)
0.3 nM
FLT3
(Cell-free assay)
5.8 nM
PDGFR
(Cell-free assay)
6.6 nM
GSK-3
(Cell-free assay)
23.3 nM
In vitro

CHIR-124 is a quinolone-based small molecule that is structurally unrelated to other known inhibitors of Chk1. This compound interacts synergistically with topoisomerase poisons (e.g., Camptothecin or SN-38) in causing growth inhibition in a variety of cancer cell lines, including breast carcinoma (MDA-MB-231 and MDA-MB-435) and colon carcinoma (SW-620 and Colo205), all of which contains the mutant p53 gene. It abrogates the SN-38-induced S and G2-M checkpoints and potentiates apoptosis in MDA-MD-435 breast cancer cells. The abrogation of the G2-Mcheckpoint and induction of apoptosis by this chemical are enhanced by the loss of p53. This compound also potently targets other kinases such as PDGFR and Flt3 with IC50 of 6.6 nM and 5.8 nM, respectively.

Saggio chinasico
Chk1 Assay
Per il saggio Chk1, il dominio chinasico è espresso in cellule di insetto Sf9 e un peptide cdc25c biotinilato contenente il sito di fosforilazione consenso Chk1/Chk2 (*) (biotin-[AHX]SGSGS*GLYRSPSMP-ENLNRPR[CONH2]) è usato come substrato. Una serie di diluizioni di CHIR-124 viene miscelata con un tampone di reazione chinasica contenente una concentrazione finale di 30 mM Tris-HCl (pH 7,5), 10 mM MgCl2, 2 mM DTT, 4 mM EDTA, 25 mM β-glicerofosfato, 5 mM MnCl2, 0,01% di albumina sierica bovina, 1,35 nM di dominio chinasico CHK1, 0,5 μM di substrato peptidico e 1 AM di ATP non marcato, più 5 nM di ATP marcato con 33Pγ (attività specifica = 2.000 Ci/mmol). Le reazioni e la rilevazione del trasferimento di fosfato sono eseguite con un metodo radioattivo. Le reazioni sono incubate a temperatura ambiente per 1-4 ore e il peptide fosforilato è catturato su piastre a micropozetti rivestite di streptavidina contenenti tampone di arresto della reazione (25 mM EDTA [acido etilendiamminotetraacetico], 50 mM HEPES, pH 7,5). Il peptide fosforilato viene misurato con il sistema DELFIA TRF utilizzando un anticorpo anti-fosfotirosina PT66 marcato con Europio. La concentrazione di questo composto per l'IC50 viene calcolata utilizzando la regressione non lineare con il software di analisi dei dati XL-Fit.
In vivo

CHIR-124 potentiates the growth inhibitory effects by abrogating the G2-M checkpoint and increasing tumor apoptosis in an orthotopic breast cancer xenograft model.
Riferimenti