Name: TAK-632
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7291
Rating: 5 (34 reviews)

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Controllo Qualità

Lotto: Purezza: 99.59%

99.59

Target correlati	ERK p38 MAPK JNK MEK Ras KRas S6 Kinase MAP4K TAK1 Mixed Lineage Kinase
Altro Raf Inibitori	LY3009120 Exarafenib (KIN-2787) GDC-0879 Avutometinib (Ro5126766, CH5126766) PLX-4720 AZ 628 SB590885 GW5074 RAF265 (CHIR-265) PLX8394 (Plixorafenib, FORE8394)

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro

Linee cellulari	Tipo di saggio	Tempo di incubazione	Descrizione dellattività
human A375 cells	Function assay	2 h	Inhibition of BRAF V600E mutant in human A375 cells assessed as phosphorylation of MEK after 2 hrs by Western blotting analysis, IC50=12 nM
human HMVII cells	Function assay	2 h	Inhibition of NRASQ61k/BRAFG469V-mutant in human HMVII cells assessed as phosphorylation of MEK after 2 hrs by Western blotting analysis, IC50=49 nM
human HT-29 cells	Function assay		Inhibition of BRAF V600E mutant in human HT-29 cells assessed as phosphorylation of MEK, IC50=75 nM
human HMVII cells	Proliferation assay	72 h	Antiproliferative activity against human HMVII cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by chemi-luminescence cell viability assay, GI50=0.2 μM
293 cells	Function assay	20 mins	Inhibition of N-terminal GST-tagged MEK1 (unknown origin) expressed in 293 cells using GST-ERK1(K71A) as substrate after 20 mins, IC50=3.7 μM
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità

Peso molecolare	554.52	Formula	C₂₇H₁₈F₄N₄O₃S	Conservazione (Dalla data di ricezione)	3 anni-20°Cpolvere
N. CAS	1228591-30-7	Scarica SDF		Conservazione delle soluzioni stock	1 anno-80°Cin solvente 1 mese-20°Cin solvente
Sinonimi	N/A			Smiles	C1CC1C(=O)NC2=NC3=C(S2)C(=C(C=C3)OC4=CC(=C(C=C4)F)NC(=O)CC5=CC(=CC=C5)C(F)(F)F)C#N

Solubilità

In vitro
Lotto:

DMSO : 100 mg/mL (180.33 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Ethanol : 2 mg/mL

Water : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa	Concentrazione	Volume	Peso molecolare
=	×	×

Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo Lotto:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 Corn oil Validato dai laboratori Selleck. Se necessiti di modifiche a questa formulazione, contatta il nostro team di vendita per test personalizzati.	5.000mg/ml (9.02mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante lesperimento)

Dosaggio: mg/kg Peso medio degli animali: g Volume di dosaggio per animale:μL Numero di animali:

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non cè una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH₂O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nellaggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere allaggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno dacqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo dazione

Caratteristiche	Orally bioavailable, pan-raf inhibitor that targets both wild-type and mutant forms.
Targets/IC₅₀/Ki	C-Raf (Cell-free assay) 1.4 nM B-Raf (Cell-free assay) 8.3 nM Aurora B (Cell-free assay) 66 nM PDGFRβ (Cell-free assay) 120 nM FGFR3 (Cell-free assay) 280 nM GSK-3β (Cell-free assay) 500 nM CDK2 (Cell-free assay) 580 nM p38α (Cell-free assay) 600 nM PDGFRα (Cell-free assay) 610 nM
In vitro	TAK-632 inibisce la fosforilazione di MEK ed ERK nelle cellule di melanoma A375 (BRAFV600E) con IC50 di 12 nM e 16 nM, rispettivamente. Nelle cellule di melanoma umano HMVII (NRASQ61K/BRAFG469V), questo composto mostra anche una forte inibizione di pMEK e pERK con IC50 di 49 nM e 50 nM, rispettivamente. Inoltre, mostra anche attività antiproliferativa in entrambe le cellule A375 e HMVII con GI50 di 66 nM e 200 nM, rispettivamente. Questa sostanza chimica induce la dimerizzazione di RAF ma inibisce l'attività chinasica del dimero RAF a causa della sua lenta dissociazione da RAF. La combinazione di questo composto e TAK-733 mostra effetti antiproliferativi sinergici nelle cellule di melanoma mutate BRAF e NRAS.
Saggio chinasico	Saggio del profilo chinasico
Saggio chinasico	I saggi per le chinasi serina/treonina che utilizzano ATP radiomarcato [γ-³³P] vengono eseguiti in piastre a 96 pozzetti. BRAF e c-RAF sono espressi come proteina con tag FLAG N-terminale utilizzando un sistema di espressione a baculovirus. Le condizioni di reazione sono ottimizzate per ciascuna chinasi: BRAF (25 ng/pozzetto di enzima, 1 μg/pozzetto di GST-MEK1(K96R), 0,1 μCi/pozzetto di ATP [γ-³²P], temperatura ambiente, 20 min di reazione); c-RAF (25 ng/pozzetto di enzima, 1 μg/pozzetto di GST-MEK1 (K96R), 0,1 μCi/pozzetto di ATP [γ-³²P], temperatura ambiente, 20 min di reazione). Le reazioni enzimatiche vengono eseguite in 25 mM HEPES, pH 7,5, 10 mM acetato di magnesio, 1 mM ditiotreitolo e 0,5 μM ATP contenente una concentrazione ottimizzata di enzima, substrato e ATP radiomarcato come descritto sopra in un volume totale di 50 μL. Prima della reazione chinasica, questo composto e l'enzima vengono incubati per 5 min alla temperatura di reazione descritta sopra. Le reazioni chinasiche vengono avviate aggiungendo ATP. Dopo il periodo di reazione descritto sopra, le reazioni vengono terminate con l'aggiunta di acido tricloroacetico al 10% (concentrazione finale). Le proteine fosforilate [γ-³³P] o [γ-³²P] vengono filtrate in piastre filtranti GFC con un Cell Harvester e quindi le piastre vengono lavate con acido fosforico al 3%. Le piastre vengono asciugate, seguite dall'aggiunta di 40 μL di MicroScint0. La radioattività viene conteggiata da un contatore a scintillazione TopCount.
In vivo	TAK-632 mostra una biodisponibilità orale superiore sia nei ratti che nei cani. Questo composto (3,9–24,1 mg/kg, p.o.) esibisce un'efficacia antitumorale dose-dipendente senza una grave riduzione del peso corporeo in un modello di xenotrapianto di melanoma A375 (BRAFV600E) e in un xenotrapianto di melanoma umano HMVII (NRASQ61K/BRAFG469V) nei ratti. Nel modello di xenotrapianto di melanoma SK-MEL-2 mutato NRAS, questa sostanza chimica (60 o 120 mg/kg, p.o.) esibisce anche una potente efficacia antitumorale senza grave tossicità.
Riferimenti	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23906342/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24121489/

Supporto tecnico

Istruzioni per la manipolazione

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Per qualsiasi altra domanda, si prega di lasciare un messaggio.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

TAK-632 Raf inibitore

Struttura chimica

Peso molecolare: 554.52