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GW5074 Raf inibitore

N. Cat.S2872

GW5074 è un inibitore potente e selettivo di c-Raf con un IC50 di 9 nM; non è stato osservato alcun effetto sulle attività di JNK1/2/3, MEK1, MKK6/7, CDK1/2, c-Src, p38 MAP, VEGFR2 o c-Fms. Questo composto inibisce l'apoptosi indotta da LK.
GW5074 Raf inibitore Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 520.94

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Controllo Qualità

Lotto: S287201 DMSO]104 mg/mL]false]Water]Insoluble]false]Ethanol]Insoluble]false Purezza: 99.8%
99.8

Informazioni chimiche, conservazione e stabilità

Peso molecolare 520.94 Formula

C15H8Br2INO2

 Conservazione (Dalla data di ricezione)
N. CAS 220904-83-6 Scarica SDF Conservazione delle soluzioni stock

Sinonimi N/A Smiles C1=CC2=C(C=C1I)C(=CC3=CC(=C(C(=C3)Br)O)Br)C(=O)N2

Solubilità

In vitro
Lotto:

DMSO : 104 mg/mL (199.63 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa Concentrazione Volume Peso molecolare
Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo
Lotto:

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante lesperimento)

mg/kg g μL

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non cè una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH2O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nellaggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere allaggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno dacqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo dazione

Targets/IC50/Ki
C-Raf
(Cell-free assay)
9 nM
In vitro

GW5074 è un inibitore potente e specifico di c-Raf con IC50 di 9 nM e non ha alcun effetto su MKK6, MKK7, p38 MAP chinasi e cdks in vitro. Tuttavia, il trattamento di colture neuronali con questo composto consente l'accumulo di modifiche attivanti su c-Raf e anche B-Raf. L'inibizione dell'apoptosi indotta da LK da parte di questo inibitore nei neuroni granulari cerebellari non è MEK-ERK-dipendente. Questa sostanza chimica ritarda la down-regulation dell'attività di Akt ma inibisce l'apoptosi attraverso un meccanismo Akt-indipendente. Influisce su Ras, sul fattore nucleare-kappa B e su c-jun. Questo composto inibisce la morte cellulare causata dalle neurotossine nelle cellule granulari e in altri tipi neuronali.

Saggio chinasico
Determinazione dell'affinità
In generale, i saggi chinasici in vitro vengono eseguiti utilizzando chinasi purificata e substrati sintetici in condizioni standard utilizzando il servizio di Kinase Profiling di Upstate Biotechnology. In breve, per ogni saggio vengono utilizzati 5–10 mU di chinasi purificata. Per GSK3β, cdk1, cdk2, cdk3, cdk5, la chinasi viene incubata con 1 μM di GW5074 in un tampone contenente 8 mM MOPS, pH 7,2, 0,2 mM EDTA, 10 mM magnesio acetato e [c- 33P-ATP] per 40 min a temperatura ambiente. L'attività chinasica viene quantificata misurando l'incorporazione di 33P, applicando un'aliquota su filtri P30, lavando in acido fosforico 50 mM e contando in scintillazione. La composizione del tampone per c-Raf, JNK1, JNK2, JNK3, MEK1, MKK6, MKK7 è 50 mM Tris pH 7,5, 0,1 mM EGTA, 10 mM magnesio acetato e [c- 33P-ATP]. I substrati peptidici utilizzati sono i seguenti: Per c-Raf, 0,66 mg/mL MBP; per cdks, 0,1 mg/mL istonico H1; per JNKs, 3 μM ATF2; per MEK1, 1 μM MAPK2; per MKK6, 1 μM di SAPK2a e per MKK7, 2 μM JNK1α.
In vivo

GW5074 è protettivo in un modello sperimentale in vivo della malattia di Huntington. Questo composto (5 mg/Kg) ha prevenuto completamente le estese lesioni striatali bilaterali indotte da 3-NP nei topi.  Sopprime l'iperreattività delle vie aeree indotta dal fumo di seconda mano nei topi.

Riferimenti

Applicazioni

Metodi Biomarcatori Immagini PMID
Western blot p-Raf-1 / Raf-1 / p-c-Jun / c-Junc / c-Fos / P-gp
S2872-WB1
28212576

Supporto tecnico

Istruzioni per la manipolazione

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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