solo per uso di ricerca

RAF709 Raf inibitore

Name: RAF709
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S8690
Rating: 5 (5 reviews)

N. Cat.S8690

RAF709 è un potente inibitore della chinasi B/C RAF con valori di IC50 quasi equivalenti di 0,4 nM per B-RAF e C-RAF, mostrando un alto livello di selettività, dimostrando una legame on-target superiore al 99% a BRAF, BRAFV600E e CRAF a 1 M e pochissimi off-target con DDR1 (>99%), DDR2 (86%), FRK (92%) e PDGFRb (96%), le uniche chinasi con legame >80% a 1 M.

Struttura chimica

Peso molecolare: 542.55

Vai a

Controllo Qualità

Lotto: S869001 DMSO]100 mg/mL]false]Ethanol]100 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Purezza: 99.86%

Citato in Nature Medicine per la sua qualità superiore
COA
NMR
HPLC
SDS
Scheda tecnica

99.86

Target correlati	ERK p38 MAPK JNK MEK Ras KRas S6 Kinase MAP4K TAK1 Mixed Lineage Kinase
Altro Raf Inibitori	LY3009120 Exarafenib (KIN-2787) GDC-0879 Avutometinib (Ro5126766, CH5126766) PLX-4720 AZ 628 SB590885 TAK-632 GW5074 RAF265 (CHIR-265)

Informazioni chimiche, conservazione e stabilità

Peso molecolare	542.55	Formula	C₂₈H₂₉F₃N₄O₄	Conservazione (Dalla data di ricezione)	3 anni-20°Cpolvere
N. CAS	1628838-42-5	--		Conservazione delle soluzioni stock	1 anno-80°Cin solvente 1 mese-20°Cin solvente
Sinonimi	N/A			Smiles	CC1=C(C=C(C=N1)NC(=O)C2=CC(=CC=C2)C(F)(F)F)C3=CC(=C(N=C3)OC4CCOCC4)N5CCOCC5

Solubilità

In vitro
Lotto:

DMSO : 100 mg/mL (184.31 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Ethanol : 100 mg/mL

Water : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa	Concentrazione	Volume	Peso molecolare
=	×	×

Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo Lotto:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validato dai laboratori Selleck. Se necessiti di modifiche a questa formulazione, contatta il nostro team di vendita per test personalizzati.	5.000mg/ml (9.22mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Validato dai laboratori Selleck. Se necessiti di modifiche a questa formulazione, contatta il nostro team di vendita per test personalizzati.	0.800mg/ml (1.47mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 16 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante lesperimento)

Dosaggio: mg/kg Peso medio degli animali: g Volume di dosaggio per animale:μL Numero di animali:

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non cè una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH₂O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nellaggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere allaggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno dacqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo dazione

Targets/IC₅₀/Ki	C-Raf (Cell-free assay) 0.4 nM BRAF(V600E) (Cell-free assay) 1 nM B-Raf (Cell-free assay) 1.5 nM
In vitro	RAF709 sembra avere una cinetica di dissociazione molto lenta (T_1/2 > 6,5 h) utilizzando il metodo di diluizione rapida per misurare la sua costante di velocità di dissociazione. Negli esperimenti cellulari, la dose-risposta di pMEK e pERK è misurata in cellule Calu-6 con EC50 di 0,02 e 0,1 M con minima attivazione paradossale e inibizione della proliferazione con EC50 di 0,95 M. Questo composto stabilizza i dimeri BRAF-CRAF con una EC50 di 0,8 M. Delle 456 chinasi testate, questa sostanza chimica mostra un alto livello di selettività, dimostrando un legame on-target superiore al 99% a BRAF, BRAFV600E e CRAF a 1 M e pochissimi off-target con DDR1 (>99%), DDR2 (86%), FRK (92%) e PDGFRb (96%), le uniche chinasi con legame >80% a 1 M. Mostra uguale attività contro entrambi i monomeri e i dimeri RAF. Nei saggi biochimici in vitro, questo composto esibisce una potente attività inibitoria mirata a BRAF, BRAFV600E e CRAF con valori di IC50 compresi tra 0,3 e 1,5 nmol/L. Questo trattamento chimico porta a un'induzione dose-dipendente dell'eterodimerizzazione B/CRAF in HCT116, ma inibisce la fosforilazione di MEK e ERK, in linea con la capacità di questo composto di inibire efficacemente i dimeri RAF. Inibisce selettivamente la segnalazione oncogenica e la proliferazione nelle cellule tumorali con mutazioni BRAF, NRAS o KRAS con minima attivazione paradossale.
Saggio chinasico	Saggio della chinasi CRAF
Saggio chinasico	Il saggio della chinasi CRAF è stato condotto utilizzando 10 nM di substrato proteico MEK1 inattivo dalla chinasi (portante una mutazione K97R), 3 M di ATP e 10 pM di CRAF Y340E/Y341E. Il tampone di reazione conteneva 50 mM Tris pH 7,5, 10 mM MgCl2, 0,05% BSA, 50 mM NaCl, 0,01% Tween-20 e 1 mM DTT. Le reazioni sono state condotte a temperatura ambiente in un volume di 10 L in piastre a 384 pozzetti a fondo poco profondo per 40 min e interrotte aggiungendo 5 L/pozzetto di soluzione di quenching (50 mM Tris pH 7,5, 50 mM EDTA). Le reazioni terminate hanno ricevuto 5 L/pozzetto di reagenti di rilevamento costituiti da 50 mM Tris pH 7,5, 0,01% Tween-20, anticorpo anti-fosfo MEK1/2 S217/S221 diluito 1:1000, 0,01 mg/mL ciascuno di sfere accettrici rivestite di proteina A AlphaScreen e sfere donatrici rivestite di streptavidina. Le piastre sono state lette in un lettore di piastre EnVision dopo incubazione notturna a temperatura ambiente. Negli studi di inibizione di composti, questo composto è stato testato su un intervallo di concentrazione da 25 M a 1,74 × 10⁻⁶ M in un formato a 16 punti, 3 volte. Il DMSO era a una concentrazione finale dello 0,5%. Questa sostanza chimica è stata preincubata con CRAF per 30 min prima di aggiungere i substrati per avviare la reazione. I dati di inibizione sono stati adattati a un'equazione logistica a quattro parametri per calcolare l'IC50 dei composti.
In vivo	RAF709 è ben tollerato ed efficace nei modelli di xenotrapianto con mutazione KRAS. È ragionevolmente stabile nel plasma dopo un'incubazione di 3 ore a 37 in tutte le specie [stabilità plasmatica (% rimanente): ratto 85%, topo 82%, cane 95%, umano 101%], e il legame alle proteine plasmatiche è misurato al 98% in tutte le specie. Negli esperimenti farmacocinetici, questo composto ha una clearance moderata nel topo (35 mL/min/kg) e nel cane (14 mL/min/kg) e una clearance elevata nel ratto (50 mL/min/kg). I valori di Cmax nel topo (1 M), nel cane (0,5 M) e nel ratto (0,5 M) raggiungono concentrazioni farmacologicamente attive, e una accettabile disponibilità orale è osservata nel topo (68%), nel ratto (24%) e nel cane (48%). Nel modello murino nudo di xenotrapianto Calu-6, il trattamento con questa sostanza chimica porta a un'attività antitumorale dose-dipendente con 10 mg/kg subefficaci (%T/C = 92%), 30 mg/kg hanno portato a un'attività antitumorale misurabile (% T/C = 46%), e 200 mg/kg hanno portato a una regressione tumorale media del 92%, mentre la stessa dose elevata non è efficace nel modello PC3, KRAS WT.
Riferimenti	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28557458/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29343524/

Supporto tecnico

Istruzioni per la manipolazione

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Per qualsiasi altra domanda, si prega di lasciare un messaggio.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):