Crizotinib hydrochloride c-Met inibitore

Il PF-2341066 mostra una potenza simile contro la fosforilazione di c-Met in cellule epiteliali di topo mIMCD3 o canine MDCK con IC50 di 5 nM e 20 nM, rispettivamente. Il PF-2341066 mostra un'attività migliorata o simile contro le cellule NIH3T3 ingegnerizzate per esprimere i mutanti del sito di legame dell'ATP di c-Met V1092I o H1094R o il mutante del P-loop M1250T con IC50 di 19 nM, 2 nM e 15 nM, rispettivamente, rispetto alle cellule NIH3T3 che esprimono il recettore wild-type con IC50 di 13 nM. Al contrario, si osserva un notevole spostamento della potenza del PF-2341066 contro le cellule ingegnerizzate per esprimere i mutanti del loop di attivazione di c-Met Y1230C e Y1235D con IC50 di 127 nM e 92 nM, rispettivamente, rispetto al recettore wild-type. Il PF-2341066 previene anche potentemente la fosforilazione di c-Met nelle cellule NCI-H69 e HOP92, con IC50 di 13 nM e 16 nM, rispettivamente, che esprimono le varianti endogene di c-Met R988C e T1010I, rispettivamente. Il PF-2341066 è >1.000 volte selettivo per i RTK VEGFR2 e PDGFRβ, >250 volte selettivo per IRK e Lck, e ~40-60 volte selettivo per Tie2, TrkA e TrkB, tutti rispetto a c-Met. Il PF-2341066 è 20-30 volte selettivo per i RTK RON e Axl. Al contrario, il PF-2341066 mostra un IC50 quasi equivalente di 24 nM contro la variante di fusione oncogenica di ALK RTK, nucleofosmina (NPM)-anaplastic lymphoma kinase (ALK), espressa dalla linea cellulare di linfoma anaplastico a grandi cellule (ALCL) umano KARPAS299. Il PF-2341066 inibisce i fenotipi neoplastici c-Met-dipendenti delle cellule tumorali e i fenotipi angiogenici delle cellule endoteliali. Il PF-2341066 sopprime la crescita delle cellule di carcinoma gastrico umano GTL-16 con IC50 di 9,7 nM. Il PF-2341066 induce l'apoptosi nelle cellule GTL-16 con IC50 di 8,4 nM. Il PF-2341066 inibisce la migrazione e l'invasione delle cellule di carcinoma polmonare umano NCI-H441 stimolate dall'HGF con IC50 di 11 nM e 6,1 nM, rispettivamente. Il PF-2341066 inibisce lo scattering delle cellule MDCK con IC50 di 16 nM. Il PF-2341066 previene la fosforilazione di c-Met stimolata dall'HGF, la sopravvivenza cellulare e l'invasione di Matrigel con IC50 di 11 nM, 14 nM e 35 nM, rispettivamente. Inoltre, il PF-2341066 previene la tubulogenesi ramificata delle HMVEC stimolata dal siero (formazione di tubi vascolari) in gel di fibrina.[4]

Nel modello GTL-16, PF-2341066 rivela la capacità di causare una marcata regressione di grandi tumori stabiliti (>600 mm3) in entrambe le coorti di trattamento da 50 mg/kg/die e 75 mg/kg/die, con una diminuzione del 60% del volume tumorale medio nel corso del programma di somministrazione di 43 giorni. In un altro studio, PF-2341066 mostra la capacità di inibire completamente la crescita tumorale di GTL-16 per >3 mesi, con solo 1 topo su 12 che mostra un aumento significativo della crescita tumorale nel corso del programma di trattamento di 3 mesi a 50 mg/kg/die. Nel modello NSCLC NCI-H441, si osserva una diminuzione del 43% del volume tumorale medio a 50 mg/kg/die durante il ciclo di somministrazione di PF-2341066 di 38 giorni. Nel modello RCC Caki-1, si osserva una diminuzione del 53% del volume tumorale medio associata a una diminuzione del volume di ciascun tumore di almeno il 30% a 50 mg/kg/die durante il ciclo di somministrazione di PF-2341066 di 33 giorni. PF-2341066 rivela anche una prevenzione quasi completa della crescita di tumori stabiliti a 50 mg/kg/die nei modelli di xenotrapianto di glioblastoma U87MG o carcinoma prostatico PC-3, con il 97% o l'84% di inibizione nell'ultimo giorno dello studio, rispettivamente. Al contrario, PF-2341066 p.o. somministrato a 50 mg/kg/die non inibisce significativamente la crescita tumorale nel modello di carcinoma mammario MDA-MB-231 o nel modello di carcinoma del colon DLD-1. Si osserva una significativa riduzione dose-dipendente delle cellule endoteliali CD31-positive a 12,5 mg/kg/die, 25 mg/kg/die e 50 mg/kg/die nei tumori GTL-16, indicando che l'inibizione della MVD mostra una correlazione dose-dipendente con l'efficacia antitumorale. PF-2341066 mostra una significativa riduzione dose-dipendente dei livelli plasmatici umani di VEGFA e IL-8 in entrambi i modelli GTL-16 e U87MG. Si osserva una marcata inibizione dei livelli fosforilati di c-Met, Akt, Erk, PLCλ1 e STAT5 nei tumori GTL-16 in seguito a somministrazione p.o. di PF-2341066.[4]