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EPZ005687 Histone Methyltransferase inibitore

N. Cat.S7004

EPZ005687 è un inibitore potente e selettivo di EZH2 con un Ki di 24 nM in un saggio senza cellule, una selettività di 50 volte contro EZH1 e una selettività di 500 volte contro altre 15 proteine metiltransferasi.
EPZ005687 Histone Methyltransferase inibitore Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 539.67

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Controllo Qualità

Lotto: Purezza: 99.84%
99.84

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro

Linee cellulari Tipo di saggio Concentrazione Tempo di incubazione Formulazione Descrizione dellattività PMID
human OCI-LY19 cells Function assay 96 h Inhibition of wild-type EZH2 in human OCI-LY19 cells assessed as reduction of H3K27me3 level after 96 hrs by ELISA assay, IC50=0.08 μM
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità

Peso molecolare 539.67 Formula

C32H37N5O3

 Conservazione (Dalla data di ricezione)
N. CAS 1396772-26-1 Scarica SDF Conservazione delle soluzioni stock

Sinonimi N/A Smiles CC1=CC(=C(C(=O)N1)CNC(=O)C2=C3C=NN(C3=CC(=C2)C4=CC=C(C=C4)CN5CCOCC5)C6CCCC6)C

Solubilità

In vitro
Lotto:

DMSO : 27 mg/mL (50.03 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa Concentrazione Volume Peso molecolare
Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo
Lotto:

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante lesperimento)

mg/kg g μL

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non cè una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH2O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nellaggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere allaggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno dacqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo dazione

Targets/IC50/Ki
EZH2
(Cell-free assay)
24 nM(Ki)
In vitro

EPZ005687 mostra un'inibizione dell'attività enzimatica di PRC2 dipendente dalla concentrazione con un valore di IC50 di 54 nM. È un inibitore diretto dell'attività enzimatica di PRC2 e non agisce interrompendo le interazioni proteina-proteina tra le subunità di PRC2. Questo composto si lega nella tasca SAM del dominio SET di EZH2 ed è un inibitore SAM-competitivo dell'attività enzimatica di EZH2. L'affinità di questa sostanza chimica è simile (entro un intervallo di due volte) per i complessi PRC2 contenenti EZH2 di tipo selvaggio e mutante Tyr641, ma un'affinità significativamente maggiore per l'enzima mutante A677G (5,4 volte). Riduce la metilazione di H3K27 in varie cellule di linfoma. Mostra una robusta uccisione cellulare in cellule mutanti eterozigoti Tyr641 o Ala677, con effetti minimi sulla proliferazione delle cellule di tipo selvaggio. Questo composto aumenta la fase G1 del ciclo cellulare con diminuzioni correlative nelle fasi S e G2/M. In una linea cellulare di linfoma mutante Tyr641, può portare alla derepressione di geni bersaglio noti di EZH2 e influenzare i geni specificamente repressi dal mutante EZH2 Tyr641.

Saggio chinasico
Saggi enzimatici biochimici
Il composto viene incubato per 30 min con 40 μL per pozzetto di 5 nM di PRC2 (la concentrazione finale del saggio in 50 μL è di 4 nM) in tampone di saggio 1X (20 mM Bicine [pH 7.6], 0.002% Tween-20, 0.005% gelatina di pelle bovina e 0.5 mM DTT). Vengono aggiunti 10 μL per pozzetto di miscela di substrato comprendente tampone di saggio 3 H-SAM, SAM non marcato e un peptide che rappresenta i residui 21-44 dell'istone H3 contenente biotina C-terminale (aggiunta a una lisina con terminazione ammidica C-terminale) per avviare la reazione (entrambi i substrati sono presenti nella miscela di reazione finale ai rispettivi valori di Km, un formato di saggio denominato «condizioni equilibrate»). Le concentrazioni finali dei substrati e lo stato di metilazione del peptide substrato sono indicati per ciascun enzima. Le reazioni vengono incubate per 90 min a temperatura ambiente e bloccate con 10 μL per pozzetto di 600 μM di SAM non marcato, quindi trasferite su una flashplate a 384 pozzetti e lavate dopo 30 min.
In vivo

EPZ005687, un inibitore selettivo della metiltransferasi EZH2, inibisce significativamente lo sviluppo della PAH indotta da TAC in modo dipendente da EZH2-SOD1-ROS.
Riferimenti

Supporto tecnico

Istruzioni per la manipolazione

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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