Name: EPZ004777
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7353
Rating: 5 (32 reviews)

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Controllo Qualità

Lotto: Purezza: 99.09%

99.09

Target correlati	HDAC JAK BET PKC PARP HIF PRMT EZH2 AMPK Histone Acetyltransferase
Altro Histone Methyltransferase Inibitori	Pinometostat (EPZ5676) 3-Deazaneplanocin A (DZNep) Hydrochloride BIX-01294 trihydrochloride UNC1999 EPZ015666 (GSK3235025) MM-102 (HMTase Inhibitor IX) Chaetocin SGC 0946 EPZ005687 UNC0638

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro

Linee cellulari	Tipo di saggio	Tempo di incubazione	Descrizione dellattività	PMID
MOLM13	Antiproliferative assay		Antiproliferative activity against human MOLM13 cells containing MLL-AF9, EC50=0.004μM.	23879463
MV4-11	Antiproliferative assay		Antiproliferative activity against human MV4-11 cells containing MLL-AF4, EC50=0.004μM.	23879463
THP1	Antiproliferative assay		Antiproliferative activity against human THP1 cells containing MLL-AF9, EC50=0.004μM.	23879463
MCF10A	Function assay		Inhibition of DOT1L in human MCF10A cells assessed as reduction of H3K79 level, IC50=0.084μM.	25406853
MLL	Function assay		Inhibition of Meis1 gene expression in human MLL cells, EC50=0.7μM.	23879463
MLL	Function assay		Inhibition of Hoxa9 gene expression in human MLL cells, EC50=0.7μM.	23879463
Sf9	Function assay		Inhibition of human full length PRMT7 expressed in Sf9 cells, IC50=7.5μM.	25893041
BHK	Antiviral assay	8 days	Antiviral activity against Zika virus SMGC infected in BHK cells assessed as inhibition of virus induced cytopathic effect after 8 days by CellTiter-Glo luminescent cell viability assay, IC50=35.19μM.	30170321
MV4-11	Function assay	6 days	Inhibition of DOT1L in human MV4-11 cells assessed as downregulation of HOXA9/MEIS1 mRNA expression after 6 days by real-time PCR analysis, IC50=0.7μM.	ChEMBL
MOLM13	Function assay	6 days	Inhibition of DOT1L in human MOLM13 cells assessed as downregulation of HOXA9/MEIS1 mRNA expression after 6 days by real-time PCR analysis, IC50=0.7μM.	ChEMBL
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità

Peso molecolare	539.67	Formula	C₂₈H₄₁N₇O₄	Conservazione (Dalla data di ricezione)	3 anni-20°Cpolvere
N. CAS	1338466-77-5	Scarica SDF		Conservazione delle soluzioni stock	1 anno-80°Cin solvente 1 mese-20°Cin solvente
Sinonimi	N/A			Smiles	CC(C)N(CCCNC(=O)NC1=CC=C(C=C1)C(C)(C)C)CC2C(C(C(O2)N3C=CC4=C(N=CN=C43)N)O)O

Solubilità

In vitro
Lotto:

DMSO : 100 mg/mL (185.29 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Ethanol : 100 mg/mL

Water : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa	Concentrazione	Volume	Peso molecolare
=	×	×

Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo Lotto:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 Corn oil Validato dai laboratori Selleck. Se necessiti di modifiche a questa formulazione, contatta il nostro team di vendita per test personalizzati.	5.000mg/ml (9.26mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validato dai laboratori Selleck. Se necessiti di modifiche a questa formulazione, contatta il nostro team di vendita per test personalizzati.	5.000mg/ml (9.26mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to make it clear; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante lesperimento)

Dosaggio: mg/kg Peso medio degli animali: g Volume di dosaggio per animale:μL Numero di animali:

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non cè una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH₂O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nellaggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere allaggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno dacqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo dazione

Targets/IC₅₀/Ki	DOT1L (Cell-free assay) 0.4 nM
In vitro	EPZ004777 inibisce selettivamente la metilazione cellulare H3K79 e l'espressione dei geni bersaglio chiave di fusione MLL. A seguito dell'inibizione di DOT1L, questo composto inibisce selettivamente la proliferazione di linee cellulari MLL-Rearranged e cellule ematopoietiche murine trasformate con MLL-AF9. Inoltre, induce anche la differenziazione e l'apoptosis nelle cellule MLL-rearranged. Questa sostanza chimica inibisce selettivamente la proliferazione delle cellule del midollo osseo murino trasformate con MLL–AF10 e CALM–AF10. L'inibizione di DOT1L da parte di questo agente porta a una proliferazione significativamente ridotta, a una ridotta espressione dei geni bersaglio di MLL-AF6 e all'arresto del ciclo cellulare delle cellule trasformate con MLL-AF6.
Saggio chinasico	Determinazione dei valori di IC50 dell'inibitore
Saggio chinasico	EPZ004777 viene diluito in serie 3 volte in DMSO per un totale di dieci concentrazioni, a partire da 1 mM. Un'aliquota di 1 μL di ciascuna diluzione dell'inibitore viene piastrata in una piastra di microtitolazione a 384 pozzetti. Il controllo di inibizione al 100% consisteva in una concentrazione finale di 2,5 mM dell'inibitore del prodotto S-adenosil-L-omocisteina (SAH). Questo composto viene incubato per 30 minuti con 40 ml per pozzetto di 0,25 nM DOT1L(1-416) in tampone di saggio (20 mM TRIS [pH 8.0] 10 mM NaCl, 0.002% Tween 20, 0.005% gelatina di pelle bovina, 100 mM KCl e 0.5 mM DTT). Vengono aggiunti 10 ml per pozzetto di miscela di substrato comprendente tampone di saggio con 200 nM di ³H-SAM (American Radiolabeled Chemicals: 80 Ci/mmol), 600 nM di SAM non marcato e 20 nM di nucleosomi per avviare la reazione (entrambi i substrati sono presenti nella miscela di reazione finale ai loro rispettivi valori di KM). Le reazioni vengono incubate per 120 minuti e bloccate con 10 ml per pozzetto di 800 mM SAM. L'incorporazione di radioattività nel substrato di nucleosomi viene misurata in una flashplate. I valori di IC50 per gli enzimi nel pannello Histone Methyltransferase vengono determinati in condizioni di saggio equilibrate simili con SAM e il substrato proteico/peptidico presenti a concentrazioni pari ai loro rispettivi valori di KM.
In vivo	EPZ004777 produce una potente efficacia antitumorale e aumenta significativamente la sopravvivenza mediana in un modello di xenotrapianto murino di leucemia MLL.
Riferimenti	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21741596/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23138183/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23361907/

Applicazioni

Metodi	Biomarcatori	Immagini	PMID
Western blot	H3K79me2 H3K79me1 / H3K4me3 / H3K9me3 / H3R17me2a / H3K27me2 / H3K27me3 / H3K36me2 / H4R3me2s / H4K20me2		23138183
Growth inhibition assay	Cell viability		25596271