Name: Dacomitinib
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S2727
Rating: 5 (95 reviews)

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Controllo Qualità

Lotto: Purezza: 99.84%

99.84

Target correlati	VEGFR PDGFR FGFR c-Met Src MEK CSF-1R FLT3 HER2 c-Kit
Altro EGFR Inibitori	Lazertinib (YH25448) Icotinib Hydrochloride Sunvozertinib AG-490 AG-1478 Canertinib (CI-1033) WZ4002 Rociletinib (CO-1686) Poziotinib (NOV120101, HM781-36B) Genistein

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro

Linee cellulari	Tipo di saggio	Concentrazione	Tempo di incubazione	Descrizione dellattività	PMID
PC9 cells	Function assay		2 h	Inhibition of EGFR exon 19 deletion activating mutant phosphorylation in human PC9 cells after 2 hrs by fluorescence assay, IC50=0.63 nM	23930994
human LoVo cells	Function assay		2 h	Inhibition of wild type EGFR phosphorylation in human LoVo cells after 2 hrs by fluorescence assay, IC50=0.011 μM	23930994
human NCI-H1975 cells	Function assay		2 h	Inhibition of EGFR L858R/T970M double mutant phosphorylation in human NCI-H1975 cells after 2 hrs by fluorescence assay, IC50=0.042 μM	23930994
human NCI-H1975 cells	Proliferation assay			Antiproliferative activity against human NCI-H1975 cells assessed as growth inhibition, GI50=0.1233 μM	26310890
Sf9	Function assay		6 mins	Irreversible inhibition of GST-tagged ERBB1 (unknown origin) (Met-668 to Ala-1211 residues) expressed in baculovirus infected Sf9 insect cells assessed as reduction in Glu/Tyr copolymer phosphorylation after 6 mins by ELISA, IC50 = 0.006 μM.	27491023
NIH/3T3	Function assay		2 hrs	Irreversible inhibition of full length human ERBB1 autophosphorylation transfected in EGF-stimulated mouse NIH/3T3 cells incubated for 2 hrs followed by stimulation with EGF for 10 mins, IC50 = 0.006 μM.	27491023
Sf9	Function assay		6 mins	Irreversible inhibition of GST-tagged ERBB2 (unknown origin) (Ile-675 to Val-1256 residues) expressed in baculovirus infected Sf9 insect cells assessed as reduction in Glu/Tyr copolymer phosphorylation after 6 mins by ELISA, IC50 = 0.046 μM.	27491023
Sf9	Function assay		6 mins	Irreversible inhibition of GST-tagged ERBB4 (unknown origin) (Gly-259 to Gly-690 residues) expressed in baculovirus infected Sf9 insect cells assessed as reduction in Glu/Tyr copolymer phosphorylation after 6 mins by ELISA, IC50 = 0.074 μM.	27491023
Sf9	Function assay		30 mins	Irreversible inhibition of human recombinant GST-tagged JAK3 expressed in baculovirus infected Sf9 insect cells assessed as reduction in polyglutamic acid-tyrosine phosphorylation after 30 mins by ELISA, IC50 = 3.57 μM.	27491023
NIH/3T3	Function assay	30 mg/kg	2 days	In vivo inhibition of full length human ERBB1 autophosphorylation transfected in NIH/3T3 cells implanted in mouse at 30 mg/kg, po qd for 2 days measured 24 hrs post last dose by Western blot analysis	27491023
insect cells	Function assay			Inhibition of GST-tagged human EGFR catalytic domain expressed in insect cells, IC50 = 0.006 μM.	28754471
NCI-H1819	Antiproliferative assay		72 hrs	Antiproliferative activity against human NCI-H1819 cells expressing wild type HER2 incubated for 72 hrs by MTS assay, IC50 = 0.029 μM.	28754471
insect cells	Function assay			Inhibition of GST-tagged human HER2 catalytic domain expressed in insect cells, IC50 = 0.0457 μM.	28754471
NCI-H1975	Antiproliferative assay		72 hrs	Antiproliferative activity against human NCI-H1975 cells expressing EGFR T790M/L858R mutant incubated for 72 hrs by MTS assay, IC50 = 0.44 μM.	28754471
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità

Peso molecolare	469.94	Formula	C₂₄H₂₅ClFN₅O₂	Conservazione (Dalla data di ricezione)	3 anni-20°Cpolvere
N. CAS	1110813-31-4	Scarica SDF		Conservazione delle soluzioni stock	1 anno-80°Cin solvente 1 mese-20°Cin solvente
Sinonimi	PF299804,PF299			Smiles	COC1=C(C=C2C(=C1)N=CN=C2NC3=CC(=C(C=C3)F)Cl)NC(=O)C=CCN4CCCCC4

Solubilità

In vitro
Lotto:

DMSO : 49 mg/mL (104.26 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Ethanol : 15 mg/mL

Water : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa	Concentrazione	Volume	Peso molecolare
=	×	×

Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo Lotto:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante lesperimento)

Dosaggio: mg/kg Peso medio degli animali: g Volume di dosaggio per animale:μL Numero di animali:

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non cè una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH₂O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nellaggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere allaggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno dacqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo dazione

Targets/IC₅₀/Ki	EGFR (Cell-free assay) 6.0 nM ErbB2 (Cell-free assay) 45.7 nM ErbB4 (Cell-free assay) 73.7 nM
In vitro	PF299804 è un inibitore specifico della famiglia di chinasi ERBB. Questo composto inibisce la segnalazione di EGFR e induce l'apoptosi nella linea cellulare H3255 GR contenente EGFR T790M. È efficace nelle linee cellulari di NSCLC sensibili e non. Questa sostanza chimica inibisce la crescita delle cellule H3255 e HCC827 ingegnerizzate per esprimere EGFR T790M. Inibisce la fosforilazione di EGFR in presenza della mutazione T790M. Si ritiene che questo agente inibisca irreversibilmente l'attività della tirosina chinasi ERBB legandosi al sito ATP e modificando covalentemente i residui di cisteina nucleofili nei domini catalitici dei membri della famiglia ERBB. Mostra effetti significativi di inibizione della crescita nelle cellule di cancro gastrico amplificate per HER2 (SNU216, N87) e ha valori di concentrazione inibitoria del 50% inferiori rispetto ad altri inibitori della tirosina chinasi di EGFR, inclusi BIBW-2992 e CI-1033. Questo inibitore induce l'apoptosi e l'arresto in G1 e inibisce la fosforilazione dei recettori della famiglia HER e delle vie di segnalazione a valle, inclusi STAT3, AKT e le chinasi regolate da segnali extracellulari (ERK) nelle cellule di cancro gastrico amplificate per HER2. Blocca anche la formazione di eterodimeri EGFR/HER2, HER2/HER3 e HER3/HER4, nonché l'associazione di HER3 con p85 α nelle cellule SNU216. Una ricerca recente utilizza quarantasette linee cellulari di cancro al seno umano e di cellule epiteliali mammarie immortalizzate per valutare gli effetti di inibizione di questo composto; i risultati indicano che inibisce preferenzialmente la crescita delle linee cellulari di cancro al seno amplificate per HER-2 rispetto alle linee non amplificate (RR = 3,39, p < 0,0001). Questa sostanza chimica riduce la fosforilazione di HER2, EGFR, HER4, AKT ed ERK nella maggior parte delle linee sensibili. Esercita il suo effetto antiproliferativo attraverso un arresto combinato in G0/G1 e un'induzione dell'apoptosi.
Saggio chinasico	Saggio di chinasi ERBB basato su ELISA
Saggio chinasico	Le proteine di fusione citoplasmatiche ERBB1, ERBB2 ed ERBB4 sono prodotte clonando la sequenza ERBB1 (Met-668 a Ala-1211), ERBB2 (Ile-675 a Val-1256) ed ERBB4 (Gly-259 a Gly-690) nel vettore baculovirale pFastBac usando la PCR. Le proteine sono espresse in cellule di insetto Sf9 infettate da baculovirus come proteine di fusione GST. Le proteine sono purificate mediante cromatografia di affinità usando sfere di sefarosio al glutatione. L'inibizione dell'attività della tirosina chinasi ERBB viene valutata utilizzando un saggio di tirosina chinasi recettoriale basato su ELISA. Le reazioni chinasiche (50 mM HEPES, pH 7,4, 125 mM NaCl, 10 mM MgCl₂, 100 μM ortovanadato di sodio, 2 mM ditiotreitolo, 20 μM ATP, questo composto o controllo veicolo, e 1-5 nM GST-erbB per 50 μL di miscela di reazione) vengono eseguite in piastre a 96 pozzetti rivestite con 0,25 mg/mL di poli-Glu-Tyr. Le reazioni vengono incubate per 6 minuti a temperatura ambiente sotto agitazione. Le reazioni chinasiche vengono interrotte rimuovendo la miscela di reazione, quindi i pozzetti vengono lavati con tampone di lavaggio (0,1% Tween 20 in PBS). I residui di tirosina fosforilati vengono rilevati aggiungendo 0,2 μg/mL di anticorpo anti-fosfotirosina (Oncogene Ab-4; 50 μL/pozzetto) accoppiato a perossidasi di rafano (HRP) diluito in PBS contenente 3% BSA e 0,05% Tween 20 per 25 minuti sotto agitazione a temperatura ambiente. L'anticorpo viene rimosso e le piastre vengono lavate in tampone di lavaggio. Il substrato HRP (SureBlue3,3 ,5,5-tetrametil benzidina o TMB) viene aggiunto (50 μL per pozzetto) e incubato per 10-20 minuti sotto agitazione a temperatura ambiente. La reazione TMB viene interrotta con l'aggiunta di 50 μL di soluzione di arresto (0,09 N H₂SO₄). Il segnale viene quantificato misurando l'assorbanza a 450 nm. I valori di IC50 vengono determinati per questo composto utilizzando il metodo dell'effetto mediano.
In vivo	Il PF299804 somministrato per via orale inibisce efficacemente la crescita degli xenotrapianti HCC827 Del/T790M. Una bassa somministrazione orale di questo composto (15 mg/kg) provoca una significativa attività antitumorale, incluse marcate regressioni tumorali in una varietà di modelli di xenotrapianto tumorali umani che esprimono e/o sovraesprimono i membri della famiglia ERBB o contengono la doppia mutazione (L858R/T790M) in ERBB1 (EGFR).
Riferimenti	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18089823/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18606718/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22135232/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22761403/

Applicazioni

Metodi	Biomarcatori	PMID
Western blot	pEGFR / EGFR / pERK / ERK / pAKT / AKT / p-mTOR / mTOR / pSTAT3 / STAT3	24853121
Immunofluorescence	LC3	28366635
Growth inhibition assay	Cell viability	28363995

Informazioni sullo studio clinico

(dati da https://clinicaltrials.gov, aggiornato il 2024-05-22)

Numero NCT	Reclutamento	Condizioni	Sponsor/Collaboratori	Data di inizio	Fasi
NCT06075615	Not yet recruiting	Carcinoma Non-Small-Cell Lung	Pfizer	September 1 2024	--
NCT06321510	Not yet recruiting	Lung Cancer	Pfizer	April 1 2024	--
NCT04609319	Active not recruiting	Lung Cancer	Pfizer	January 23 2021	--
NCT03865446	Completed	Severe Hepatic Impairment	Pfizer	April 5 2019	Phase 1
NCT02382796	Completed	NSCLC	Pfizer	July 10 2015	Phase 2
NCT02268747	Unknown status	Skin Squamous Cell Cancer	Fondazione IRCCS Istituto Nazionale dei Tumori Milano	November 2014	Phase 2

Supporto tecnico

Istruzioni per la manipolazione

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Per qualsiasi altra domanda, si prega di lasciare un messaggio.

Domande Frequenti

Domanda 1:
I would like to know whether the in vivo formulation you recommend for it is suitable for oral administration?

Risposta:
S2727 in 1% DMSO+30% polyethylene glycol+1% Tween 80 at 10mg/ml is a homogeneous suspension, and it was fine for oral gavage. When preparing the solution, please dissolve it in DMSO clearly first. If it dissolves not readily, please sonicate and warm it at about 45-50℃ for a while to help dissolving. Then add PEG 300 and Tween 80. After they mixed well, dilute with water. Then it will become a homogeneous suspension.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

Dacomitinib EGFR inibitore

Struttura chimica

Peso molecolare: 469.94