Name: MK-5108
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S2770
Rating: 5 (40 reviews)

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Controllo Qualità

Lotto: Purezza: 99.17%

99.17

Target correlati	CDK HSP PD-1/PD-L1 ROCK Wee1 DNA/RNA Synthesis Microtubule Associated Ras KRas Casein Kinase
Altro Aurora Kinase Inibitori	Hesperadin Barasertib-HQPA (AZD2811) Alisertib (MLN8237) Tozasertib (VX-680) ZM 447439 MLN8054 Danusertib (PHA-739358) TCS7010 (Aurora A Inhibitor I) AMG-900 PHA-680632

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro

Linee cellulari	Tipo di saggio	Concentrazione	Tempo di incubazione	Descrizione dellattività	PMID
BL21 (DE3) Rosetta	Function assay		30 mins	Inhibition of His-tagged human Aurora A kinase (122 to 40 residues) expressed in Escherichia coli BL21 (DE3) Rosetta cells using biotinylated STK2 substrate incubated for 30 mins by HTRF assay, IC50 = 0.000064 μM.	27391133
HeLa Kyoto	Function assay		20 hrs	Inhibition of Aurora A kinase autophosphorylation at Thr288 in human HeLa Kyoto cells incubated for 20 hrs, IC50 = 0.3 μM.	27391133
HCC1143	Antiproliferation assay			Antiproliferation activity against human HCC1143 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.42 μM.	28918096
AU565	Antiproliferation assay			Antiproliferation activity against human AU565 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.45 μM.	28918096
MCF7	Antiproliferation assay			Antiproliferation activity against human MCF7 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.52 μM.	28918096
HCC1806	Antiproliferation assay			Antiproliferation activity against human HCC1806 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.56 μM.	28918096
CAL851	Antiproliferation assay			Antiproliferation activity against human CAL851 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.74 μM.	28918096
HeLa	Function assay	16 mg/kg	2 days	Plasma concentration in F344/N Jcl-rnu rat xenografted with luciferase expressing human HeLa cells at 16 mg/kg, po BID for 2 days, Cp = 1.7 μM.	28918096
HeLa	Function assay	32 mg/kg	2 days	Plasma concentration in F344/N Jcl-rnu rat xenografted with luciferase expressing human HeLa cells at 32 mg/kg, po BID for 2 days, Cp = 4.4 μM.	28918096
Saos-2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells	29435139
MG 63 (6-TG R)	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells	29435139
OHS-50	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells	29435139
SK-N-MC	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells	29435139
BL21-Codon-Plus(DE3)-RIL	Function assay		120 mins	Inhibition of human N-terminal His-tagged Aurora A expressed in Escherichia coli BL21-Codon-Plus(DE3)-RIL cells using 5-carboxy-fluorescein-y-aminobutyric acid-Ala-Leu-Arg-Arg-Ala-Ser-Leu-Gly-NH2 as substrate after 120 mins by fluorescence polarization as, IC50 = 0.00054 μM.	ChEMBL
HeLaS3	Cytotoxicity assay		3 days	Cytotoxicity against human HeLaS3 cells assessed as cell growth inhibition after 3 days by WST-8 assay, IC50 = 1.26 μM.	ChEMBL
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità

Peso molecolare	461.94	Formula	C₂₂H₂₁ClFN₃O₃S	Conservazione (Dalla data di ricezione)	3 anni-20°Cpolvere
N. CAS	1010085-13-8	Scarica SDF		Conservazione delle soluzioni stock	1 anno-80°Cin solvente 1 mese-20°Cin solvente
Sinonimi	VX-689			Smiles	C1CC(CCC1OC2=C(C(=CC=C2)Cl)F)(CC3=NC(=CC=C3)NC4=NC=CS4)C(=O)O

Solubilità

In vitro
Lotto:

DMSO : 92 mg/mL (199.16 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa	Concentrazione	Volume	Peso molecolare
=	×	×

Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo Lotto:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	0.5% methylcellulose 1 0.2% Tween 80 Validato dai laboratori Selleck. Se necessiti di modifiche a questa formulazione, contatta il nostro team di vendita per test personalizzati.	10.000mg/ml (21.65mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, take 10 mg of this product, add it to 1 ml of 0.5% methylcellulose+0.2% Tween 80 clear solution, and mix evenly to make it a uniform suspension. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante lesperimento)

Dosaggio: mg/kg Peso medio degli animali: g Volume di dosaggio per animale:μL Numero di animali:

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non cè una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH₂O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nellaggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere allaggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno dacqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo dazione

Targets/IC₅₀/Ki	Aurora A (Cell-free assay) 0.064 nM
In vitro	MK-5108 inibisce l'attività di Aurora-A in modo ATP-competitivo. Questo composto mostra una robusta selettività contro le altre chinasi della famiglia Aurora-B (220 volte) e Aurora-C (190 volte) nel saggio biochimico. Rivela anche un'elevata selettività per Aurora-A rispetto ad altre protein chinasi. Il composto inibisce solo una chinasi (TrkA) con una selettività <100 volte. Potrebbe essere più selettivo per Aurora-A rispetto a MLN8054. Coerentemente con l'induzione di cellule pHH3-positive, questa sostanza chimica induce l'accumulo di cellule nella fase G2-M. Inibisce la proliferazione delle cellule tumorali, incluse HCC1143, AU565, MCF-7, HCC1806 e CAL85-1 con un IC50 di 0,42 μM, 0,45 μM, 0,52 μM, 0,56μM e 0,74 μM, rispettivamente. Questo composto diminuisce la vitalità cellulare in modo dose-dipendente in tutte e tre le linee cellulari, comprese le cellule LEIO285, LEIO505 e SK-LSM1, con un IC50 di circa 100 nM. L'incubazione con esso in LEIO285 aumenta la proporzione di cellule in G2/M a 48 e 72 ore post-trattamento. Il composto aumenta significativamente l'attività di Caspasi 3/7 rispetto alle colture di controllo trattate con DMSO in entrambi i momenti. Nelle cellule LEIO505, porta a un maggiore accumulo di cellule nelle fasi G2/M a 24 ore, ma non a 48 o 72 ore.
Saggio chinasico	Saggi biochimici delle chinasi
Saggio chinasico	La proteina ricombinante Aurora-A umana con tag His è espressa in Escherichia coli e purificata con colonna HisTrap HP. Le proteine ricombinanti Aurora-B e Aurora-C umane purificate sono acquistate. Gli esperimenti sono eseguiti in quintuplice in piastre a 96 pozzetti. La reazione del saggio di Aurora-A viene condotta in presenza di 20 μM ATP, 25 μM Tetra-Kemptide [RRR(GLRRASLG)₄R-NH₂], 1,0 μCi per pozzetto [γ-³³P]-ATP, 0,1 ng per pozzetto Aurora-A in 50 mM Tris-HCl (pH 7,4), 15 mM Mg(OAc)₂ e 0,2 mM EDTA a 30°C per 40 minuti. Per investigare il modo di inibizione di MK-5108 per Aurora-A, i valori di IC50 di questo composto sono determinati in presenza di diverse concentrazioni di ATP. Quindi, il valore di IC50 è plottato in funzione della concentrazione di ATP per analizzare l'effetto della concentrazione di ATP sul valore di IC50 di questa sostanza chimica. La reazione del saggio di Aurora-B viene condotta in presenza di 15 μM ATP, 100 μM Kemptide (GLRRASLG-NH₂), 1,0 μCi per pozzetto [γ-³³P]-ATP, 5,0 ng per pozzetto Aurora-B in 50 mM Tris-HCl (pH 7,4), 15 mM Mg(OAc)₂ e 0,2 mM EDTA a 30 °C per 20 minuti. La reazione del saggio di Aurora-C viene condotta in presenza di 40 μM ATP, 100 μM Kemptide, 1,0 μCi per pozzetto [γ-³³P]-ATP, 15 ng per pozzetto Aurora-C in 10 mM MOPS-NaOH (pH 7,4), 5 mM Mg(OAc)₂, 1 mM (±) DTT e 1 mM EGTA a 30°C per 20 minuti. Dopo che le reazioni della chinasi sono terminate aggiungendo il 2,0% di acido fosforico, Tetra-Kemptide o Kemptide viene intrappolato sulla piastra MultiScreen-PH. I pozzetti vengono lavati cinque volte con 0,64% di acido fosforico e quindi monitorati per la radioattività in un contatore a scintillazione liquida.
In vivo	MK-5108 induce cellule pHH3-positive a dosi di 16 mg/kg e 32 mg/kg. La concentrazione plasmatica di questo composto a 8 mg/kg e 16 mg/kg è rispettivamente di 1,7 μM e 4,4 μM. Il trattamento con questo composto provoca l'induzione di pHH3 nei tessuti tumorali e cutanei, che inizia a 2 ore e raggiunge un massimo a 4 ore. I trattamenti chimici a 15 mg/kg e 30 mg/kg comportano una significativa inibizione della crescita tumorale con la variazione del volume tumorale medio per il gruppo di trattamento in percentuale della variazione media nel gruppo di controllo (%T/C) del 10% e −6% al giorno 11, e del 17% e 5% al giorno 18, rispettivamente. È ben tollerato a entrambe le dosi, con una minima riduzione del peso corporeo. Questo composto mostra anche una significativa attività antitumorale attraverso dosaggi intermittenti in ratti nudi portatori di tumori SW48; a 15 mg/kg e 45 mg/kg causa un'inibizione della crescita tumorale dose-dipendente con un %T/C del 35% e 7% al giorno 10, e del 58% e 32% al giorno 27, rispettivamente.
Riferimenti	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20053775/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22535157/

Applicazioni

Metodi	Biomarcatori	Immagini	PMID
Western blot	p-Aurora A / Aurora-A / N-MYC		29262328
Growth inhibition assay	Cell viability		24756365

Supporto tecnico

Istruzioni per la manipolazione

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Per qualsiasi altra domanda, si prega di lasciare un messaggio.

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MK-5108 Aurora Kinase inibitore

Struttura chimica

Peso molecolare: 461.94