MK-5108

N. catalogoS2770 Lotto:S277001

Stampa

Dati tecnici

Formula

C22H21ClFN3O3S
Peso molecolare 461.94 Numero CAS 1010085-13-8
Solubilità (25°C)* In vitro DMSO 92 mg/mL (199.16 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione MK-5108 (VX-689) è un inibitore altamente selettivo dell'Aurora A con IC50 di 0,064 nM in un saggio acellulare ed è 220 e 190 volte più selettivo per Aurora A rispetto ad Aurora B/C, mentre inibisce TrkA con meno di 100 volte la selettività. Questo composto induce l'Autophagy. Fase 1.
Target
Aurora A
(Cell-free assay)
0.064 nM
In vitro

MK-5108 inibisce l'attività di Aurora-A in modo ATP-competitivo. Questo composto mostra una robusta selettività contro le altre chinasi della famiglia Aurora-B (220 volte) e Aurora-C (190 volte) nel saggio biochimico. Rivela anche un'elevata selettività per Aurora-A rispetto ad altre protein chinasi. Il composto inibisce solo una chinasi (TrkA) con una selettività <100 volte. Potrebbe essere più selettivo per Aurora-A rispetto a MLN8054. Coerentemente con l'induzione di cellule pHH3-positive, questa sostanza chimica induce l'accumulo di cellule nella fase G2-M. Inibisce la proliferazione delle cellule tumorali, incluse HCC1143, AU565, MCF-7, HCC1806 e CAL85-1 con un IC50 di 0,42 μM, 0,45 μM, 0,52 μM, 0,56μM e 0,74 μM, rispettivamente. Questo composto diminuisce la vitalità cellulare in modo dose-dipendente in tutte e tre le linee cellulari, comprese le cellule LEIO285, LEIO505 e SK-LSM1, con un IC50 di circa 100 nM. L'incubazione con esso in LEIO285 aumenta la proporzione di cellule in G2/M a 48 e 72 ore post-trattamento. Il composto aumenta significativamente l'attività di Caspasi 3/7 rispetto alle colture di controllo trattate con DMSO in entrambi i momenti. Nelle cellule LEIO505, porta a un maggiore accumulo di cellule nelle fasi G2/M a 24 ore, ma non a 48 o 72 ore.  
In vivo

MK-5108 induce cellule pHH3-positive a dosi di 16 mg/kg e 32 mg/kg. La concentrazione plasmatica di questo composto a 8 mg/kg e 16 mg/kg è rispettivamente di 1,7 μM e 4,4 μM. Il trattamento con questo composto provoca l'induzione di pHH3 nei tessuti tumorali e cutanei, che inizia a 2 ore e raggiunge un massimo a 4 ore. I trattamenti chimici a 15 mg/kg e 30 mg/kg comportano una significativa inibizione della crescita tumorale con la variazione del volume tumorale medio per il gruppo di trattamento in percentuale della variazione media nel gruppo di controllo (%T/C) del 10% e −6% al giorno 11, e del 17% e 5% al giorno 18, rispettivamente. È ben tollerato a entrambe le dosi, con una minima riduzione del peso corporeo. Questo composto mostra anche una significativa attività antitumorale attraverso dosaggi intermittenti in ratti nudi portatori di tumori SW48; a 15 mg/kg e 45 mg/kg causa un'inibizione della crescita tumorale dose-dipendente con un %T/C del 35% e 7% al giorno 10, e del 58% e 32% al giorno 27, rispettivamente.

Protocollo (da riferimento)

Saggio della chinasi:

[1]
  • Saggi biochimici delle chinasi

    La proteina ricombinante Aurora-A umana con tag His è espressa in Escherichia coli e purificata con colonna HisTrap HP. Le proteine ricombinanti Aurora-B e Aurora-C umane purificate sono acquistate. Gli esperimenti sono eseguiti in quintuplice in piastre a 96 pozzetti. La reazione del saggio di Aurora-A viene condotta in presenza di 20 μM ATP, 25 μM Tetra-Kemptide [RRR(GLRRASLG)4R-NH2], 1,0 μCi per pozzetto [γ-33P]-ATP, 0,1 ng per pozzetto Aurora-A in 50 mM Tris-HCl (pH 7,4), 15 mM Mg(OAc)2 e 0,2 mM EDTA a 30°C per 40 minuti. Per investigare il modo di inibizione di MK-5108 per Aurora-A, i valori di IC50 di questo composto sono determinati in presenza di diverse concentrazioni di ATP. Quindi, il valore di IC50 è plottato in funzione della concentrazione di ATP per analizzare l'effetto della concentrazione di ATP sul valore di IC50 di questa sostanza chimica. La reazione del saggio di Aurora-B viene condotta in presenza di 15 μM ATP, 100 μM Kemptide (GLRRASLG-NH2), 1,0 μCi per pozzetto [γ-33P]-ATP, 5,0 ng per pozzetto Aurora-B in 50 mM Tris-HCl (pH 7,4), 15 mM Mg(OAc)2 e 0,2 mM EDTA a 30 °C per 20 minuti. La reazione del saggio di Aurora-C viene condotta in presenza di 40 μM ATP, 100 μM Kemptide, 1,0 μCi per pozzetto [γ-33P]-ATP, 15 ng per pozzetto Aurora-C in 10 mM MOPS-NaOH (pH 7,4), 5 mM Mg(OAc)2, 1 mM (±) DTT e 1 mM EGTA a 30°C per 20 minuti. Dopo che le reazioni della chinasi sono terminate aggiungendo il 2,0% di acido fosforico, Tetra-Kemptide o Kemptide viene intrappolato sulla piastra MultiScreen-PH. I pozzetti vengono lavati cinque volte con 0,64% di acido fosforico e quindi monitorati per la radioattività in un contatore a scintillazione liquida.
Saggio cellulare:

[1]
  • Linee cellulari

    HeLa-S3 cells

  • Concentrazioni

    0 μM -1 μM

  • Tempo di incubazione

    12 hours

  • Metodo

    HeLa-S3 cells are synchronized at the G1-S phase boundary by double thymidine block with 2 mM thymidine. Cells are washed and seeded to 96-well cell culture plates. After 4 hours, an equal volume of medium containing MK-5108 is added to each well. Nocodazole (300 nM) is used as a 100% control. The cells are fixed overnight with cold methanol 12 hours after seeding. Then, the cells are stained with rabbit anti-phospho-histone H3 Ser28 antibody and then with anti-rabbit IgG-Cy5. Total nuclei are stained with 10 mg/mL 4′,6-diamidino-2-phenylindole. Immunostained images are acquired using the IN Cell Analyzer1000 with ×10 objective lens. After acquisition of images, data are analyzed. The %pHH3-positive index is determined by measuring the %pHH3-positive cell counts per total nuclei counts for each sample, then by normalizing with respect to nocodazole-treated cells.
Studio sugli animali:

[1]
  • Modelli animali

    SCID mice bearing HCT116 tumors

  • Dosaggi

    30 mg/kg

  • Somministrazione

    Oral administration

Riferimenti

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20053775/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22535157/

Convalida del prodotto da parte del cliente

<p>MK-5108 specifically inhibits AURKA and delays mitotic exit. (a) MK-5108 inhibits AURKA but not AURKB. Mitotic HeLa cells were obtained by exposure to nocodazole for 16 h followed by mechanical shake off. The cells were incubated with the indicated concentrations of MK-5108 for 2 h. Nocodazole and MG132 were included to prevent mitotic exit. Lysates were then prepared and activated phospho-AURKAThr288 and AURKBThr232 were detected with immunoblotting. Uniform loading was confirmed by immunoblotting for actin. (b) MK-5108 prevents activation of AURKA but not AURKB. HeLa cells were incubated with the indicated concentrations of MK-5108 for 8 h. Nocodazole was then added for another 6 h to trap any cells that entered mitosis. Mitotic cells were isolated by mechanical shake off. Lysates were prepared and analyzed with immunoblotting. Actin analysis was included to assess loading and transfer. (c) MK-5108 induces a G 2 /M delay. HeLa cells were treated with the indicated concentrations of MK-5108 for 24 h. DNA contents were analyzed with flow cytometry.</p>

Dati da [ Oncogene , 2014 , 33, 3550-60 ]

Effect of a selective small molecule inhibitor of AURKA on MYCN protein levels and cell viability. Western blot for MYCN protein in KNS42 cells after exposure to 0.1, 0.5 and 2.5 uM VX-689 (triangle). GAPDH is used as a loading control.

Dati da [ Cancer Discov , 2013 , 10.1158/2159-8290.CD-12-0426 ]

P53 expression in the 14G2a mAb-treated IMR-32 cell line and after combinatorial treatment with MK-5108 inhibitor. P53 protein content was measured in whole cell-WCE (A), cytoplasmic-CE (C) and nuclear-NE (E) extracts at 2, 6, 24 and 48 h after 14G2a addition (40 ug/ml) into culture media of IMR-32 cells, and normalized to GAPDH levels (for WCE and CE), or TBP (for NE). Mean values of three separate experiments (盨EM) obtained for the 14G2a mAb-treated cells are shown as empty bars, and calculated versus control value, set as 1 (black baseline). ANOVA shows no statistically significant changes of P53 level in time in IMR-32 WCE [F(3, 9) = 1.35, p = 0.3181]. Statistically significant changes of P53 level in time were found in CE [F(3, 6) = 53.76, p = 0.0001], and in NE [F(3, 6) = 63.17, p = 0.0001], as compared to 2 h time point. P53 expression level was measured in whole cell-WCE (B), cytoplasmic-CE (D) and nuclear-NE (F) extracts at 2 and 24 h after the 14G2a mAb treatment alone (white bars with black stripes) or in combination with MK-5108 inhibitor (black bars with white stripes), and normalized to GAPDH levels (for WCE and CE), or TBP (for NE). Below each chart representative immunoblottings are presented; C-control cells; mAb-the 14G2a mAb-treated cells; I + mAb-MK-5108 inhibitor and the mAb-treated cells. P-values for t-test were as follow: p < 0.05 (*), p < 0.01 (**), p < 0.001 (***).

Dati da [ Cancer Lett , 2013 , 341(2), 248-64 ]

<p>HeLa cells were first synchronized to G1/S boundary with double thymidine<br />procedure.  After the release of the secondary thymidine, the indicated<br />concentrations of VX-689 were added to the cells for 8 hrs.  The cells were<br />then treated with nocodazole to trap the mitotic cells for 4 hrs and subse-<br />quently harvested by the mechanical shake off.  Cell free extracts were<br />prepared and further analyzed by SDS-PAGE and western blotting with the<br />indicated antibodies.  The disappearance of phospho-aurora A but not<br />phospho-aurora B strongly suggested that VX-689 is a highly selective<br />aurora A kinase inhibitor.</p>

, , Ken Ma Hong Kong University of Science & Technology

Sellecks MK-5108 È stato citato da 41 Pubblicazioni

Establishment, characterization, and biobanking of 36 pancreatic cancer organoids: prediction of metastasis in resectable pancreatic cancer [ Cell Oncol (Dordr), 2024, 10.1007/s13402-024-00939-5] PubMed: 38619751
Inhibition of epigenetic and cell cycle-related targets in glioblastoma cell lines reveals that onametostat reduces proliferation and viability in both normoxic and hypoxic conditions [ Sci Rep, 2024, 14(1):4303] PubMed: 38383756
Exploiting ulnerabilities induced b recurrent mutations in chondrosarcoma and giant cell tumour of bone: therapeutic targeting of the altered epigenome and be [ Leiden University The Netherlands, 2023, ] PubMed: None
Spatially distinct inputs modulate the amount of active Mitotic-phase GAP to locally restrict RhoA signaling for successful cell division [ bioRxiv, 2023, 10.1101/2023.08.08.552464] PubMed: None
Revisiting the Resazurin-Based Sensing of Cellular Viability: Widening the Application Horizon [ Biosensors (Basel), 2022, 12(4)196] PubMed: 35448256
Culture and multiomic analysis of lung cancer patient-derived pleural effusions revealed distinct druggable molecular types [ Sci Rep, 2022, 12(1):6345] PubMed: 35428753
選択的オーロラキナーゼ A 阻害剤 TAS-119 を用いたオーロラキナーゼ A 阻害剤の薬剤感受性マーカーの探索 [ , 2022, ] PubMed: none
Targeting Aurora B kinase prevents and overcomes resistance to EGFR inhibitors in lung cancer by enhancing BIM- and PUMA-mediated apoptosis [ Cancer Cell, 2021, S1535-6108(21)00383-4] PubMed: 34388376
Multifocal Organoid Capturing of Colon Cancer Reveals Pervasive Intratumoral Heterogenous Drug Responses [ Adv Sci (Weinh), 2021, e2103360] PubMed: 34918496
Size-Selective VAILase Proteolysis Provides Dynamic Insights into Protein Structures [ Anal Chem, 2021, 93(30):10653-10660] PubMed: 34291915

POLITICA DI RESO
La politica di reso incondizionato di Selleck Chemical garantisce ai nostri clienti unesperienza di acquisto online senza problemi. Se non sei in alcun modo soddisfatto del tuo acquisto, puoi restituire qualsiasi articolo entro 7 giorni dalla ricezione. In caso di problemi di qualità del prodotto, sia relativi al protocollo che al prodotto, puoi restituire qualsiasi articolo entro 365 giorni dalla data di acquisto originale. Si prega di seguire le istruzioni seguenti per la restituzione dei prodotti.

SPEDIZIONE E CONSERVAZIONE
I prodotti Selleck vengono trasportati a temperatura ambiente. Se ricevi il prodotto a temperatura ambiente, ti assicuriamo che il Dipartimento di Ispezione Qualità di Selleck ha condotto esperimenti per verificare che la conservazione a temperatura normale per un mese non influirà sullattività biologica dei prodotti in polvere. Dopo la raccolta, conservare il prodotto secondo le indicazioni descritte nella scheda tecnica. La maggior parte dei prodotti Selleck è stabile nelle condizioni raccomandate.

NON PER USO UMANO, DIAGNOSTICO VETERINARIO O TERAPEUTICO.