solo per uso di ricerca

Mirin ATM/ATR inibitore

N. Cat.S8096

Mirin è un potente inibitore del complesso Mre11–Rad50–Nbs1 (MRN) e inibisce l'attività esonucleasica associata a Mre11. Questo composto inibisce l'attivazione di ATM dipendente da MRN.
Mirin ATM/ATR inibitore Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 220.25

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Controllo Qualità

Lotto: Purezza: 99.79%
99.79

Informazioni chimiche, conservazione e stabilità

Peso molecolare 220.25 Formula

C10H8N2O2S

Conservazione (Dalla data di ricezione)
N. CAS 1198097-97-0 Scarica SDF Conservazione delle soluzioni stock

Sinonimi N/A Smiles OC1=CC=C(C=C1)\C=C2/SC(=N)NC2=O

Solubilità

In vitro
Lotto:

DMSO : 44 mg/mL (199.77 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa Concentrazione Volume Peso molecolare
Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo
Lotto:

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante lesperimento)

mg/kg g μL

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non cè una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH2O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nellaggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere allaggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno dacqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo dazione

Targets/IC50/Ki
MRN
ATM
In vitro

Mirin inibisce l'attivazione di ATM indotta da DSB, la fosforilazione ATM-dipendente dei target a valle Nbs1 e Chk2 e l'autofosforilazione ATM-dipendente di ATM a Ser1981 in risposta ai DSB. Questo composto inibisce anche il checkpoint G2 nelle cellule TOSA4 e la riparazione del DNA dipendente dall'omologia nelle cellule HEK293.

Nelle cellule con HPV16 integrato (SiHa), sensibilizza gli episomi di HPV a PA25, con una riduzione di circa 5 volte dell'IC50 di PA25.

Il pretrattamento con questa sostanza chimica diminuisce anche la vitalità cellulare e inibisce l'espressione dell'antigene nucleare delle cellule proliferanti nelle cellule renali embrionali umane 293 trattate con cisplatino.

Saggio chinasico
Saggio di nucleasi
Le reazioni con substrati oligonucleotidici non a forcina contengono 25 mM di MOPS (pH 7.0), 60 mM di KCl, 0.2% di Tween 20, 2 mM di DTT, 1 mM o 5 di MnCl2 (o 5 mM di MgCl2, o 5 mM di CaCl2), 0.1 pmol di substrato di DNA e 0.3 pmol di Mre11 (o una quantità equivalente di Mre11 complessato con Rad50) in un volume di 10 μl, e vengono incubate a 37°C per 30 min. SDS, EDTA e proteinasi K vengono quindi aggiunti a concentrazioni finali di 0.2%, 5 mM e 0.1 mg/ml, rispettivamente, e incubati per altri 15 min. 4 μl di ciascuna reazione vengono miscelati con 4 μl di tampone di caricamento in formammide, e quindi caricati su un gel di sequenziamento contenente 10% di acrilammide e 7 M di urea. Dopo la corsa, ogni gel viene analizzato utilizzando un sistema di fosfoimmagini. Le reazioni contenenti substrati a forcina sono identiche a quelle con substrati non a forcina, tranne che 3 pmol di questo composto vengono aggiunti alle reazioni come indicato, e le reazioni vengono incubate a temperatura ambiente per tutta la notte. Le reazioni di giunzione di estremità non omologhe contengono 25 mM di MOPS (pH 7.0), 60 mM di KCl, 0.2% di Tween 20, 2 mM di DTT, 4 mM di MgCl2, 2 mM di MnCl2, 0.5 mM di ATP, 4 ng di DNA plasmidico, 10% di polietilenglicole, 0.01 pmol di DNA ligasi I umana e 0.06 pmol di questa sostanza chimica o 0.1 unità di esonucleasi III di E. coli (GIBCO-BRL), in un volume di 10 μl. Dopo l'incubazione a 37°C per 25 min, il Tween 20 viene aggiunto a una concentrazione finale dello 0.5%, e un'aliquota di 2.5 μl viene amplificata mediante PCR utilizzando i primer DAR5 e DAR147. I prodotti della PCR vengono clonati utilizzando il kit di clonazione TA e sequenziati utilizzando un analizzatore genetico capillare ABI automatizzato.
In vivo

Mirin in nanoparticelle ha comportato una forte compromissione della crescita tumorale, associata all'attivazione della DDR, all'accumulo di p53 e alla morte cellulare.

Riferimenti
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30166519/

Applicazioni

Metodi Biomarcatori Immagini PMID
Growth inhibition assay Cell viability
S8096-viability1
18176557

Supporto tecnico

Istruzioni per la manipolazione

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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