KY02111 Wnt/beta-catenin inibitore

May act downstream of APC and GSK3β in the canonical WNT signaling pathway.

KY02111 (10 μM) aumenta il rapporto di colonie cardiache battenti fino al 70%-94% in aggregati cellulari di due linee hESC (KhES-1 e KhES-3), quattro linee hiPSC (253G1, IMR90-1, IMR90-4 e RCHIPC0003) e una linea ESC di topo (R1). Questo composto determina il 73%-85% di hiPSC IMR90-1 positive che esprimono i marcatori cardiaci, troponina T cardiaca (cTnT), αActinina o NKX2.5, mentre solo poche cellule trattate con DMSO sono positive per i marcatori. Determina il 16% di hiPSC IMR90-1 positive che esprimono il marcatore del pacemaker cardiaco, HCN4, mentre il rapporto delle cellule positive alla Vimentina (fibroblasti) diminuisce di 3,3 volte. I cardiomiociti indotti da KY02111 (KY-CMs) esprimono i marcatori cardiaci, αMHC, NKH2.5 e HCN4, e tutti i geni dei canali ionici esaminati sono espressi a livelli simili a quelli del tessuto cardiaco adulto. Questa sostanza chimica downregola l'espressione del 72,7% dei geni bersaglio della segnalazione WNT canonica nelle hiPSC IMR90-1, suggerendo che inibisce la segnalazione WNT canonica nelle hPSC. Riduce chiaramente le attività della luciferasi sia nelle hiPSC IMR90-1 che nelle cellule HEK293 in modo dose-dipendente nel saggio TOPflash. Questo composto (10 μM-25 μM) aumenta la differenziazione cardiaca di circa 80 volte nelle ESC di scimmia transgeniche rispetto al controllo e non mostra tossicità per le cellule anche ad alta concentrazione. Riduce significativamente l'attività della luciferasi nel saggio TOPflash nelle cellule SW480, mentre XAV939 e IWP-2 non lo fanno. Riduce drasticamente l'attività della luciferasi indotta dall'inibitore di GSK3β BIO nelle cellule SW480, rispetto a quella di XAV939 e IWP-2. Questa sostanza chimica da sola produce circa l'80% di cellule positive alla cTnT e, in combinazione con altri inibitori WNT, non aumenta significativamente l'efficienza di differenziazione, il che dimostra che produce efficacemente un'alta percentuale di cardiomiociti funzionali dalle hPSC. [1]