Name: GSK-J4 Hydrochloride
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7070
Rating: 5 (64 reviews)

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Controllo Qualità

Lotto: Purezza: 99.48%

99.48

Target correlati	HDAC JAK BET Histone Methyltransferase PKC PARP HIF PRMT EZH2 AMPK
Altro Histone Demethylase Inibitori	SP2509 GSK-LSD1 2HCl Ladademstat (ORY-1001) Dihydrochloride JIB-04 CPI-455 HCl OG-L002 IOX1 GSK J1 ML324 CPI-455

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro

Linee cellulari	Tipo di saggio	Concentrazione	Tempo di incubazione	Formulazione	Descrizione dellattività	PMID
CUTLL1	Growth inhibitory assay	2 μM		DMSO	affects cell growth	25132549
CUTLL1	Apoptosis assay	2 μM		DMSO	induces apoptosis	25132549
CUTLL1	Function assay	2 μM		DMSO	induces cell cycle arrest	25132549
CUTLL1	Kinase assay	6 μM		DMSO	leads to increased H3K27me3	25132549
SF7761	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K27 methylation	25401693
SF8628	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K28 methylation	25401693
H3.3	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K29 methylation	25401693
SF9012	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K30 methylation	25401693
SF9402	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K31 methylation	25401693
SF9427	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K32 methylation	25401693
human astrocytes	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K33 methylation	25401693
SF7761	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K27M glioma cell growth	25401693
SF8628	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K28M glioma cell growth	25401693
H3.3	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K29M glioma cell growth	25401693
SF9012	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K30M glioma cell growth	25401693
SF9402	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K31M glioma cell growth	25401693
SF9427	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K32M glioma cell growth	25401693
human astrocytes	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K33M glioma cell growth	25401693
TG neurons	Function assay	50 μM		DMSO	inhibits HSV-1 reactivation from sensory neurons	25552720
Th17	Function assay	80 nM		DMSO	inhibits cell differentiation	25840993
β-cells	Function assay	20 μM		DMSO	blunts IFNγ, Il-1β, and TNFα-induced chemokine gene expression	26505193
β-cells	Function assay	20 μM		DMSO	induces β-cell dysfunction	26505193
ESCs	Function assay	1.8 µM		DMSO	induces DNA damage along with activation of the DNA damage response	26759175
Raw 264.7	Function assay	0.8192 µM		DMSO	inhibits TNF-α production	26776360
MCF7	Function assay	1 to 10 uM	30 hrs		Inhibition of KDM5A in human MCF7 cells assessed as effect on H3K4me3 methylation levels at 1 to 10 uM after 30 hrs by Western blot analysis	30392349
MCF7	Function assay	1 to 10 uM	30 hrs		Inhibition of KDM5A in human MCF7 cells assessed as effect on H3K27me3 methylation levels at 1 to 10 uM after 30 hrs by Western blot analysis	30392349
RAW264.7		0.82 uM	24 hrs		Inhibition of LPS-induced TNFalpha production in mouse RAW264.7 cells 0.82 uM after 24 hrs by ELISA	26776360
RAW264.7			24 hrs		Inhibition of LPS-induced TNFalpha production in mouse RAW264.7 cells after 24 hrs by ELISA	26776360
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità

Peso molecolare	453.96	Formula	C₂₄H₂₇N₅O₂.HCl	Conservazione (Dalla data di ricezione)	3 anni-20°Cpolvere
N. CAS	1797983-09-5	Scarica SDF		Conservazione delle soluzioni stock	1 anno-80°Cin solvente 1 mese-20°Cin solvente

Solubilità

In vitro
Lotto:

DMSO : 91 mg/mL (200.45 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Ethanol : 91 mg/mL

Water : 10 mg/mL

Calcolatore di Molarità

Massa	Concentrazione	Volume	Peso molecolare
=	×	×

Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo Lotto:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validato dai laboratori Selleck. Se necessiti di modifiche a questa formulazione, contatta il nostro team di vendita per test personalizzati.	5.000mg/ml (11.01mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 20%PEG300 2 5%Tween80 3 70%ddH2O Validato dai laboratori Selleck. Se necessiti di modifiche a questa formulazione, contatta il nostro team di vendita per test personalizzati.	1.000mg/ml (2.20mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL 20 mg/ml clarified DMSO stock solution to 200 μL PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL Tween80 to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 700 μL ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante lesperimento)

Dosaggio: mg/kg Peso medio degli animali: g Volume di dosaggio per animale:μL Numero di animali:

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non cè una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH₂O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nellaggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere allaggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno dacqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo dazione

Targets/IC₅₀/Ki	JMJD3 (Cell-free assay) 60 nM
In vitro	GSK J4 HCl è un derivato estere etilico dell'inibitore selettivo della istona demetilasi JMJD3 GSK-J1 con un valore di IC50 superiore a 50 μM in vitro. Questo composto viene utilizzato per indagare le conseguenze della demetilazione di H3K27me3. Nei macrofagi primari umani, questa sostanza chimica inibisce la produzione di citochine indotta da lipopolisaccaridi, incluso il fattore di necrosi tumorale (TNF) pro-infiammatorio. Inoltre, previene la perdita di H3K27me3 indotta da lipopolisaccaridi associata ai siti di inizio della trascrizione del TNF e blocca il reclutamento dell'RNA polimerasi II.
Saggio chinasico	AlphaScreen della Histone Demethylase
Saggio chinasico	L'inibizione delle istona demetilasi viene valutata utilizzando il saggio AlphaScreen dell'istone demetilasi (Amplified Luminescence Proximity Homogenous Assay). Questo saggio utilizza un substrato peptidico biotinilato e si basa sulla rilevazione del marcatore metilico del prodotto utilizzando un anticorpo specifico accoppiato a sfere accettrici di proteina A e una sfera donatrice di Streptavidina per catturare il peptide. In breve, gli enzimi demetilasi ricombinanti vengono incubati in presenza di Fe2+ sotto forma di solfato di ammonio ferroso (FAS), α-chetoglutarato (KG) e substrato peptidico biotinilato. L'acido L-ascorbico è incluso per fornire un ambiente riducente e prevenire l'ossidazione del Fe2+. Dopo l'incubazione con il substrato peptidico, la presenza del prodotto viene rilevata utilizzando la tecnologia AlphaScreen. I saggi AlphaScreen della demetilasi vengono eseguiti in formato di piastra a 384 pozzetti utilizzando proxiplate bianche. Tutti i passaggi vengono eseguiti in tampone di saggio (50 mM HEPES pH 7,5, 0,1% (p/v) BSA e 0,01 % (v/v) Tween-20). Il FAS viene sciolto fresco ogni giorno in 20 mM HCl a una concentrazione di 400 mM e diluito a 1,0 mM in acqua deionizzata. Tutti gli altri componenti vengono sciolti freschi ogni giorno in acqua deionizzata. Per le determinazioni di IC50, 5 μL di tampone di saggio contenente l'enzima demetilasi vengono trasferiti nei pozzetti di una proxiplate a 384 pozzetti. Titolazioni di questo composto (0,1 μL) vengono trasferite in ogni pozzetto e gli enzimi vengono lasciati pre-incubare per 15 minuti con questa sostanza chimica (la concentrazione finale di DMSO è dell'1%). La reazione enzimatica viene avviata con l'aggiunta di 5 μL di una miscela di substrato composta da α-KG, FAS, acido L-ascorbico e substrato peptidico biotinilato e la reazione viene incubata per il tempo indicato a temperatura ambiente. La reazione enzimatica viene arrestata dopo il tempo indicato con l'aggiunta di 5 μL di EDTA (concentrazione finale di 7,5 mM in tampone di saggio). Le sfere donatrici di Streptavidina (0,08 mg/ml) e le sfere accettrici coniugate con Proteina A (0,08 mg/ml) vengono pre-incubate per 1 ora con un anticorpo contro il marcatore metilico del prodotto e la presenza di biotina-H3-prodotto viene rilevata con l'aggiunta di 5 μL delle sfere AlphaScreen pre-incubate (concentrazioni finali di 0,02 mg/ml rispetto alle sfere accettrici e donatrici). La rilevazione viene lasciata procedere per 1 ora a temperatura ambiente e le piastre di saggio vengono lette in un lettore di piastre BMG Labtech Pherastar FS. I dati vengono normalizzati al controllo senza enzima e l'IC50 viene determinata dalla curva di regressione non lineare utilizzando GraphPad Prism 5.
In vivo	GSK-J4 hydrochloride è un potente doppio inibitore delle demetilasi H3K27me3/me2 JMJD3/KDM6B e UTX/KDM6A. Inibisce la produzione di TNF-α indotta da LPS nei macrofagi primari umani. Questo composto è un profarmaco cellulare permeabile di GSK-J1.
Riferimenti	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22842901/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29227285/

Supporto tecnico

Istruzioni per la manipolazione

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Per qualsiasi altra domanda, si prega di lasciare un messaggio.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

GSK-J4 Hydrochloride Inibitore della Histone Demethylase H3K27

Struttura chimica

Peso molecolare: 453.96