Tolbutamide (HLS 831) Potassium Channel inibitore

Tolbutamide appartiene a una classe di farmaci chiamati sulfoniluree. Tolbutamide abbassa la glicemia inducendo il pancreas a produrre insulina (una sostanza naturale necessaria per scomporre lo zucchero nel corpo) e aiutando il corpo a utilizzare l'insulina in modo efficiente. Questo farmaco aiuterà a ridurre la glicemia solo nelle persone i cui corpi producono insulina naturalmente. Tolbutamide non è usato per trattare il diabete di tipo 1 (condizione in cui il corpo non produce insulina e, quindi, non può controllare la quantità di zucchero nel sangue) o la chetoacidosi diabetica (una condizione grave che può verificarsi se l'iperglicemia non viene trattata). Tolbutamide inibisce sia le attività della proteina chinasi basale che quelle stimolate dal cAMP ciclico e l'IC50 di Tolbutamide è di 4 mM. Concentrazioni simili di Tolbutamide sono richieste per l'inibizione semimassimale della lipolisi in vitro indotta da ormoni (norepinefrina e ACTH) o da dibutil-cAMP ciclico più teofillina. Tolbutamide inibisce anche la proteina chinasi solubile e legata alla membrana dal cuore canino. L'inibizione da parte di Tolbutamide della proteina chinasi dipendente dal cAMP ciclico del tessuto adiposo è una possibile spiegazione degli effetti antilipolitici di questo farmaco. [1] Tolbutamide inibisce la proliferazione delle cellule di glioma C6 aumentando Cx43, che correla con una riduzione della fosforilazione di pRb dovuta alla sovraregolazione degli inibitori di Cdk p21 e p27. [2] I nucleotidi citosolici aumentano la sensibilità al Tolbutamide del canale K+ ATP-dipendente nelle cellule B pancreatiche di topo mediante le loro azioni combinate sui recettori inibitori e stimolatori. [3] Tolbutamide inibisce la fosforilazione indotta dal glucagone della proteina enzimatica bifunzionale in modo dose-dipendente. Aggiungendo 2 mM di Tolbutamide, la riduzione dell'attività di 6PF-2-K e l'aumento dell'attività di Fru-2,6-P2ase in presenza di 10(-9) M di glucagone vengono parzialmente ripristinate. I presenti risultati suggeriscono la possibilità che Tolbutamide moduli l'attività della 6PF-2-K/Fru-2,6-P2ase epatica inibendo una fosforilazione della proteina enzimatica. [4]

Saggio della chinasi cAMP

Tamponi di grasso epididimale tagliati da ratti Wistar alimentati (175-225 g) vengono ottenuti dopo decapitazione e incubati a 37 °C per due ore in tampone di Krebs-bicarbonato contenente 1,27 mM di CaCl₂. Quando aggiunto, Tolbutamide è presente solo durante l'incubazione. Dopo l'incubazione, i tamponi di grasso vengono risciacquati e sonicati in tampone di Krebs-bicarbonato freddo. I surnatanti acquosi dalla centrifugazione a 50.000 × g per 30 minuti a 4 °C contenevano 0,75-1,25 mg di proteine per mL e vengono saggiati per l'attività della proteina chinasi stimolata dal cAMP ciclico. Il saggio viene eseguito in 0,2 mL con queste aggiunte: 10 μmoli di glicerofosfato di sodio pH 7,0, 2 μmoli di fluoruro di sodio, 0,4 μmoli di teofillina, 0,1 μmoli di etilenglicole bis (β-aminoetil etere)-N,N'-tetraacetico, 3 μmoli di cloruro di magnesio, 0,3 mg di istone misto, 2 nmoli di (γ-³²P) ATP, 1 nmole di cAMP ciclico quando indicato, e 0,05 ml di surnatante.

450 mg di Tolbutamide/kg/giorno somministrati per 7 giorni aumentano significativamente il legame dell'insulina agli adipociti isolati. Le curve di legame riflettono un aumento del numero di siti recettoriali piuttosto che dell'affinità. L'effetto è associato a una maggiore risposta all'insulina del tessuto adiposo, poiché le cellule adipose ottenute da animali trattati con Tolbutamide convertono significativamente più glucosio in lipidi in presenza di insulina rispetto a quelle ottenute dal gruppo di controllo. Tuttavia, l'aumento dei siti di legame dell'insulina è osservato solo a un dosaggio elevato di tolbutamide, che riduce il contenuto di insulina pancreatica, la risposta secretoria del pancreas isolato e i livelli di insulina sierica. Dosi minori, sufficienti a produrre effetti metabolici tramite una stimolazione della secrezione di insulina, non forniscono siti di legame dell'insulina aggiuntivi. [5]