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Purmorphamine Agonista del recettore Smoothened

Name: Purmorphamine
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S3042
Rating: 5 (61 reviews)

N. Cat.S3042

Purmorphamine (Shh Signaling Antagonist VI), che si lega direttamente e attiva Smoothened, blocca il legame di BODIPY-ciclopamina a Smo con una IC50 di ~ 1,5 μM nelle cellule HEK293T ed è anche un induttore della differenziazione osteoblastica con una EC50 di 1 μM. Purmorphamine può ridurre sia l'autophagy basale che quella indotta.

Purmorphamine Hedgehog/Smoothened Agonista Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 520.62

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Controllo Qualità (Quality Control)

Lotto: Purezza: 99.97%

99.97

Target correlati	JAK TGF-beta/Smad Wnt/beta-catenin ERK GSK-3 ROCK PKA Secretase STAT Casein Kinase
Altro Hedgehog/Smoothened Inibitori	SAG (Smoothened Agonist) Hydrochloride Cyclopamine (11-Deoxojervine) GANT 61 (NSC 136476) SAG (Smoothened Agonist) SANT-1 HPI-4 (Ciliobrevin A) BMS-833923 Taladegib (LY2940680) Ciliobrevin D PF-5274857

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Linee cellulari	Tipo di saggio	Concentrazione	Tempo di incubazione	Descrizione dell'attività	PMID
C3H10T1/2	Function assay		6 days	Activity at Smo in mouse C3H10T1/2 cells assessed as induction of cell differentiation into osteoblast incubated for 6 days by alkaline phosphatase assay, EC50 = 0.8 μM.	27429255
Shh Light2	Function assay		30 hrs	Activation of Shh in mouse Shh Light2 cells after 30 hrs by luciferase reporter gene assay, EC50 = 1 μM.	16408088
C3H10T1/2	Function assay			Induction of osteogenesis in mouse C3H10T1/2 cells assessed as induction of osteoblast specific marker alkaline phosphatase by immunofluorescence method, EC50 = 1 μM.	16408003
HEK293T	Function assay		1 hr	Inhibition of BODIPY-cyclopamine binding to Smo expressed in HEK293T cells after 1 hr by fluorescence microscopy, IC50 = 1.5 μM.	16408088
Shh Light2	Function assay		30 hrs	Activation of Shh in mouse Shh Light2 cells assessed as beta-galactosidase activity after 30 hrs by luciferase reporter gene assay in presence of 100 nM 3-keto-N-aminoethyl-N'-aminocaproyldihydrocinnamoyl cyclopamine	16408088
HEK293T	Function assay	5 uM	4 hrs	Inhibition of BODIPY-cyclopamine binding to Smo N-terminal cysteine domain expressed in HEK293T cells at 5 uM after 4 hrs by fluorescence microscopy	16408088
HEK293T	Function assay	5 uM	4 hrs	Inhibition of BODIPY-cyclopamine binding to Smo C-terminal cytoplasmic domain expressed in HEK293T cells at 5 uM after 4 hrs by fluorescence microscopy	16408088
SK-N-MC	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells	29435139
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecolare	520.62	Formula	C₃₁H₃₂N₆O₂	Conservazione (Dalla data di ricezione)	3 anni-20°Cpolvere
N. CAS	483367-10-8	Scarica SDF		Conservazione delle soluzioni stock	1 anno-80°Cin solvente 1 mese-20°Cin solvente
Sinonimi	Shh Signaling Antagonist VI			Smiles	C1CCC(CC1)N2C=NC3=C(N=C(N=C32)OC4=CC=CC5=CC=CC=C54)NC6=CC=C(C=C6)N7CCOCC7

Solubilità (Solubility)

In vitro
Lotto:

DMSO : 4 mg/mL (7.68 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa	Concentrazione	Volume	Peso molecolare
=	×	×

Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo Lotto:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	2%DMSO 1 30%PEG300 2 5%Tween80 3 63%ddH2O Validato dai laboratori Selleck. Se necessiti di modifiche a questa formulazione, contatta il nostro team di vendita per test personalizzati.	1.000mg/ml (1.92mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 20 μL of clarified DMSO stock solution of 50 mg/ml to 300 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 630 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante l'esperimento)

Dosaggio: mg/kg Peso medio degli animali: g Volume di dosaggio per animale:μL Numero di animali:

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non c'è una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH₂O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nell'aggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere all'aggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno d'acqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo d'azione (Mechanism of Action)

Targets/IC₅₀/Ki	Smoothened (HEK293T cells) ~1.5 μM
In vitro	Purmorphamine attiva la via Hedgehog legandosi direttamente e attivando Smoothened con IC50 di ~ 1,5 μM in competizione con la ciclopamina, un antagonista di Smo. Questo composto è un potente induttore dell'osteogenesi nelle cellule multipotenti C3H10T1/2. L'EC50 (basata sull'espressione di ALP) per questa sostanza chimica è di 1 μM nelle cellule C3H10T1/2. Essa (1 μM) e BMP-4 (100 ng/mL) insieme aumentano l'attività di ALP di oltre 90 volte nelle cellule 3T3-L1. In contrasto con BMP-4, questo composto induce l'osteogenesi attivando la segnalazione Hedgehog nelle cellule progenitrici mesenchimali multipotenti.
Saggio chinasico	Saggio di legame
Saggio chinasico	I saggi di legame di Smo vengono condotti con BODIPY-ciclopamina e cellule sovraesprimenti Smo come precedentemente descritto4,5, utilizzando costrutti di espressione basati sul promotore CMV e contenenti l'origine SV40 per Smo-Myc3, la mutante di delezione Smo∆CRD (delezione degli amminoacidi da 68 a 182) e Smo∆CT (delezione degli amminoacidi da 556 a 793). Le cellule HEK 293T vengono coltivate su vetrini trattati con poli-D-lisina in piastre a 12 pozzetti fino al 70% di confluenza e quindi trasfettate con il costrutto di espressione appropriato (0,5 μg/pozzetto) utilizzando FuGene 6 secondo il produttore
In vivo	Purmorphamine regola positivamente l'espressione di ALP in costrutti basati su Stem Cells mesenchimali umane sui ratti.
Riferimenti	[1] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=16408088 [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12465946/ [3] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=15380183 [4] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=23228449 [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32194421/

Applicazioni (Applications)

Metodi	Biomarcatori	PMID
Western blot	Patch1 / Gli1 / LC3 / p62	26609469
Immunofluorescence	SOX18	26588701
Growth inhibition assay	Cell viability	26588701

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):