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GANT61 Hedgehog/Smoothened inibitore

N. Cat.S8075

GANT61 (NSC 136476) è un inibitore della trascrizione indotta da GLI1 e GLI2, inibisce hedgehog con un IC50 di 5 μM nelle cellule HEK293T che esprimono GLI1, mostra selettività rispetto ad altre vie, come la transattivazione genica del recettore TNF e dei glucocorticoidi. Questo composto induce apoptosis e attiva l'autophagy protettiva nelle cellule LX-2.
GANT61 Hedgehog/Smoothened inibitore Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 429.6

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Controllo Qualità

Lotto: Purezza: 99.91%
99.91

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro

Linee cellulari Tipo di saggio Concentrazione Tempo di incubazione Formulazione Descrizione dellattività PMID
Shh Light2 Function assay Inhibition of SHH in mouse Shh Light2 cells by GLI-responsive firefly luciferase reporter gene assay, IC50 = 5 μM. 19309080
Shh-L2 Function assay Inhibition of Hedgehog signaling in human Shh-L2 cells, IC50 = 5 μM. 17494766
NIH 3T3 Function assay Inhibition of Hh signaling pathway in Shh-LIGHT2 incorporated mouse NIH 3T3 cells assessed as downregulation of Gli1 gene expression by luciferase reporter gene assay, EC50 = 5 μM. 26976215
HeLa Function assay 4.5 hrs Inhibition of Ebolavirus glycoprotein/matrix protein VP40 entry in human HeLa cells after 4.5 hrs beta-lactamase reporter assay, IC50 = 6.83 μM. 29624387
TM3 Function assay 48 hrs Inhibition of Hh signaling pathway in mouse TM3 cells assessed as downregulation of Gli1 gene expression after 48 hrs by luciferase reporter gene assay, EC50 = 9.27 μM. 26976215
Rh30 Function assay 24 hrs Inhibition of human Gli1-mediated transcriptional activity in human Rh30 cells after 24 hrs by luciferase reporter gene assay, IC50 = 40 μM. 20605720
HEK293 Function assay Reduction of GLI2 mediated transcription in HEK293 cells by luciferase reporter assay 17494766
NIH3T3 Function assay Inhibition of GLI1 induced hedgehog signaling in mouse NIH3T3 cells 17494766
HEK293 Function assay Inhibition of beta galactosidase in HEK293 cells 17494766
MEF Function assay Reduction in expression of Hedgehog target gene Hip1 in Sufu deficient mouse MEF cells 17494766
NIH3T3 Function assay 10 uM Inhibition of Hedgehog/Gli1 mediated transformation in mouse NIH3T3 cells at 10 uM 17494766
PANC1 Function assay 5 uM Reduction in GLI1 expression in human PANC1 cells at 5 uM 17494766
PANC1 Function assay 5 uM Reduction in PTCH expression in human PANC1 cells at 5 uM 17494766
22Rv Function assay 5 uM Reduction in GlI1 expression in human 22Rv cells at 5 uM 17494766
22Rv Function assay 5 uM Reduction in PTCH expression in human 22Rv cells at 5 uM 17494766
22Rv Function assay Reduction of expression of PTCH mRNA in human 22Rv cells 17494766
HEK293 Function assay Inhibition of nuclear accumulation of GLI mutant in HEK293 cells 17494766
HEK293 Function assay Inhibition of nuclear accumulation of wild type GLI in HEK293 cells 17494766
HEK293 Function assay Reduction of GLI1 mediated transcription in HEK293 cells by luciferase reporter assay 17494766
22Rv Antitumor assay 50 mg/kg 18 days Antitumor activity in GLI1 positive human 22Rv cells xenografted mouse model at 50 mg/kg, sc after 18 days 17494766
HEK293 Function assay 30 uM Inhibition of GLI (unknown origin) expressed in HEK293 cells assessed as reduction in GLI-mediated transcription at 30 uM 25581017
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
NB-EBc1 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
RD qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells 29435139
SK-N-DZ Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human SK-N-DZ cells after 72 hrs by fluorometric microculture cytotoxicity assay, GI50 = 5.82 μM. ChEMBL
SK-N-SH Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human SK-N-SH cells after 72 hrs by fluorometric microculture cytotoxicity assay, GI50 = 5.82 μM. ChEMBL
SK-N-FI Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human SK-N-FI cells after 72 hrs by fluorometric microculture cytotoxicity assay, GI50 = 5.82 μM. ChEMBL
SK-N-AS Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human SK-N-AS cells after 72 hrs by fluorometric microculture cytotoxicity assay, GI50 = 5.82 μM. ChEMBL
IMR32 Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human IMR32 cells after 72 hrs by fluorometric microculture cytotoxicity assay, GI50 = 5.82 μM. ChEMBL
SK-N-BE(2) Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human SK-N-BE(2) cells after 72 hrs by fluorometric microculture cytotoxicity assay, GI50 = 5.82 μM. ChEMBL
SH-SY5Y Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human SH-SY5Y cells after 72 hrs by fluorometric microculture cytotoxicity assay, GI50 = 5.82 μM. ChEMBL
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità

Peso molecolare 429.6 Formula

C27H35N5

 Conservazione (Dalla data di ricezione)
N. CAS 500579-04-4 Scarica SDF Conservazione delle soluzioni stock

Sinonimi NSC 136476 Smiles CN(C)C1=CC=CC=C1CN2CCCN(C2C3=CC=NC=C3)CC4=CC=CC=C4N(C)C

Solubilità

In vitro
Lotto:

Ethanol : 85 mg/mL

DMSO : Insoluble
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Water : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa Concentrazione Volume Peso molecolare
Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo
Lotto:

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante lesperimento)

mg/kg g μL

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non cè una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH2O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nellaggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere allaggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno dacqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo dazione

Targets/IC50/Ki
GLI1
(HEK293T cells expressing GLI1)
5 μM
In vitro
GANT61 è un inibitore della trascrizione indotta da GLI1 e GLI2. Questo composto inibisce la capacità di legame al DNA di GLI1. Inibisce la segnalazione hedgehog con un IC50 di 5 μM, mostrando selettività rispetto ad altre vie, come la segnalazione TNF/attivazione di NFκB, la transattivazione genica del recettore dei glucocorticoidi e la cascata Ras–Raf–Mek–Mapk. Questa sostanza chimica ha inibito efficacemente la proliferazione delle cellule tumorali in vitro in modo GLI-dipendente. Induce apoptosi nelle cellule di leucemia linfocitica cronica (LLC), ma non nei linfociti B normali. Questo composto induce una robusta citotossicità e abolisce la clonogenicità nelle linee cellulari di carcinoma del colon umano. Induce l'inibizione della replicazione del DNA nella fase S precoce nelle linee cellulari di carcinoma del colon umano, portando a una segnalazione di danno al DNA che coinvolge un asse ATM–Chk2 e l'induzione della morte cellulare. Questa sostanza chimica (30 μM) provoca arresto della crescita e apoptosi nelle cellule di leucemia mieloide acuta (LMA).
Saggio chinasico
Saggio Dual Luciferase
Le cellule HEK293 vengono trasfettate con il plasmide di espressione di GLI1, insieme ai plasmidi reporter 12×GliBSLuc e R-Luc su piastre da 10 cm (giorno 0). Ventiquattro ore dopo, le cellule vengono seminate in piastre bianche a 96 pozzetti con fondo trasparente a una densità di 15.000 cellule per pozzetto. Le cellule vengono lasciate aderire e questo composto viene aggiunto a una concentrazione finale di 10 μM in DMSO (0,5% di concentrazione finale di DMSO) (giorno 1,5). Le cellule vengono coltivate per altre 24 ore, successivamente lisate e quindi analizzate utilizzando il kit Dual Luciferase.
In vivo
In topi nudi iniettati con cellule di cancro alla prostata 22Rv1 positive per GLI1, GANT61 induce una regressione della crescita fino a quando nessun tumore è palpabile. In topi nudi portatori di xenotrapianti di neuroblastoma SK-N-AS, il trattamento con questo composto (gavaggio orale, 50 mg/kg) inibisce significativamente la crescita tumorale al Giorno 12, poiché il volume del tumore si riduce al 63% rispetto ai controlli.
Riferimenti
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21747117/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22398221/
  • [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22949014/

Applicazioni

Metodi Biomarcatori Immagini PMID
Western blot GLI2 / Bcl-2 GLI1 / p-STAT3 / STAT3 / SOCS3
S8075-WB2
25544756
Immunofluorescence Gli2
S8075-IF1
24533083
Growth inhibition assay Cell viability
S8075-viability1
27275540

Supporto tecnico

Istruzioni per la manipolazione

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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