Name: PF-5274857
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S2777
Rating: 5 (3 reviews)

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Controllo Qualità

Lotto: Purezza: 99.86%

99.86

Target correlati	JAK TGF-beta/Smad Wnt/beta-catenin ERK GSK-3 ROCK PKA Secretase STAT Casein Kinase
Altro Hedgehog/Smoothened Inibitori	SAG (Smoothened Agonist) Hydrochloride Purmorphamine Cyclopamine (11-Deoxojervine) GANT61 SAG (Smoothened Agonist) SANT-1 HPI-4 (Ciliobrevin A) BMS-833923 Taladegib (LY2940680) Ciliobrevin D

Informazioni chimiche, conservazione e stabilità

Peso molecolare	436.96	Formula	C₂₀H₂₅ClN₄O₃S	Conservazione (Dalla data di ricezione)	3 anni-20°Cpolvere
N. CAS	1373615-35-0	Scarica SDF		Conservazione delle soluzioni stock	1 anno-80°Cin solvente 1 mese-20°Cin solvente
Sinonimi	N/A			Smiles	CC1=CC(=C(N=C1)C2=CC(=NC=C2Cl)N3CCN(CC3)C(=O)CCS(=O)(=O)C)C

Solubilità

In vitro
Lotto:

DMSO : 93 mg/mL (212.83 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Water : 93 mg/mL

Ethanol : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa	Concentrazione	Volume	Peso molecolare
=	×	×

Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo Lotto:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	Saline Validato dai laboratori Selleck. Se necessiti di modifiche a questa formulazione, contatta il nostro team di vendita per test personalizzati.	30.000mg/ml (68.66mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 30 mg of this product to 1 ml of physiological saline (0.9% NaCL solution), mix evenly to make it clear, The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante lesperimento)

Dosaggio: mg/kg Peso medio degli animali: g Volume di dosaggio per animale:μL Numero di animali:

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non cè una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH₂O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nellaggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere allaggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno dacqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo dazione

Targets/IC₅₀/Ki	Smoothened 4.6 nM(Ki) Smoothened 5.8 nM
In vitro	PF-5274857 inibisce completamente l'attività della via Hh indotta da Shh con un IC50 di 2,7 nM, misurato dall'attività trascrizionale del gene Gli1 a valle di Smo nelle cellule MEF. Il recettore μ-oppioide è debolmente inibito da questo composto con una costante di dissociazione di 36 μM determinata successivamente in un saggio funzionale.
Saggio chinasico	Saggi biochimici
Saggio chinasico	Le cellule HEK293 che sovraesprimono Smo umana (aminoacidi 181-787) vengono coltivate in Dulbecco's Modified Eagle's Media (DMEM) supplementato con 10% di FBS, Pen-Strep e 0,1 mg/mL di igromicina fino al 90% di confluenza. Dopo il lavaggio con PBS freddo di Dulbecco, il pellet cellulare viene risospeso in tampone di preparazione della membrana (50 mM Tris-HCl, pH 7,5, 250 mM saccarosio con cocktail completo di proteasi Roche) e omogeneizzato. L'omogenato viene centrifugato e il pellet cellulare viene risospeso in tampone di saggio (50 mM Tris-HCl, pH 7,5, 100 mM NaCl, 25 mM MgCl₂, 1 mM EDTA e 0,1% di albumina sierica bovina priva di proteasi) e omogeneizzato in un omogeneizzatore di vetro. La proteina totale nella preparazione di membrana contenente Smo viene determinata utilizzando il saggio proteico Pierce BCA. Per il saggio di legame competitivo, 100 μL di tampone di saggio vengono aggiunti a una piastra filtrante GF/B a 96 pozzetti per 10 minuti per pre-inumidire il filtro e quindi rimossi. Vengono quindi aggiunti i seguenti reagenti: 20 μL di tampone di saggio, 10 μL di diluizioni seriali di questo composto, 20 μL di antagonista ³H-Smo (concentrazione finale di 3 nM) e 50 μL di preparazione di membrana (40 μg di proteina totale). Le piastre vengono incubate a temperatura ambiente per 2 ore, quindi lavate e asciugate sotto vuoto. Le piastre vengono quindi asciugate per 1 ora in un forno a 60°C prima dell'aggiunta di 45 μL di Microscint 20 e incubate a temperatura ambiente per 30 minuti a 1 ora, quindi contate in un contatore a scintillazione TopCount. I dati vengono analizzati utilizzando il software GraphPad Prism.
In vivo	PF-5274857 mostra una significativa inibizione dose-dipendente della crescita tumorale (TGI) e induce la regressione tumorale a dosi elevate (>10 mg/kg). Questo composto downregola i livelli di espressione genica di Gli1, Gli2, Ptch1 e Ptch2 a vari gradi, con effetti massimi raggiunti tra 6 e 12 ore post-dose (Gli1 è il gene più sensibile), mentre ha scarso effetto sui livelli di Smo. Nel tessuto cutaneo, la downregolazione di Gli1 e Gli2 è anche osservata con un simile andamento temporale da questa sostanza chimica. La concentrazione del farmaco derivata dal modello per l'inibizione semimassimale del tasso di produzione di mRNA di Gli1 tumorale (IC50) da parte di questo composto è determinata essere di 8,9 nM nei topi allograft di medulloblastoma Ptch^+/−p53^+/−, il che corrisponde matematicamente a una regressione tumorale del 119% di TGI dopo 6 giorni di esposizione plasmatica a questa concentrazione. Nei topi allograft di medulloblastoma Ptch^+/−p53^−/−, il valore di IC50 è stimato essere di 3,5 nM, coerente con i risultati di Ptch^+/−p53^+/−. È anche in grado di attraversare la barriera emato-encefalica nei ratti entro 4 ore post-dose.
Riferimenti	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22084163/

Supporto tecnico

Istruzioni per la manipolazione

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Per qualsiasi altra domanda, si prega di lasciare un messaggio.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

PF-5274857 Hedgehog/Smoothened antagonista

Struttura chimica

Peso molecolare: 436.96