Name: Gedatolisib (PKI-587)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S2628
Rating: 5 (30 reviews)

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Controllo Qualità

Lotto: Purezza: 99.09%

99.09

Target correlati	Akt mTOR GSK-3 ATM/ATR DNA-PK AMPK PDPK1 PTEN PP2A PDK
Altro PI3K Inibitori	GDC-0077 (Inavolisib) SAR405 Quercetin (Sophoretin) LY294002 XL147 analogue Tersolisib (STX-478) Buparlisib (BKM120) 740 Y-P (PDGFR 740Y-P) GO-203 TFA Eganelisib (IPI-549)

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro

Linee cellulari	Tipo di saggio	Tempo di incubazione	Descrizione dellattività
MDA-MB-361 cells	Cytotoxicity assay		Cytotoxicity against human MDA-MB-361 cells, IC50=0.004 μM
PC3MM2 cells	Cytotoxicity assay		Cytotoxicity against human PC3MM2 cells, IC50=0.0131 μM
MDA-MB-361 cells	Function assay		Inhibition of Akt T308 phosphorylation in human MDA-MB-361 cells by Western blotting, IC50=0.008 μM
MDA-MB-361 cells	Function assay		Inhibition of Akt S473 phosphorylation in human MDA-MB-361 cells by Western blotting, IC50=0.01 μM
MDA-MB-361 cells	Function assay		Inhibition of eNOS phosphorylation in human MDA-MB-361 cells by Western blotting
MDA-MB-361 cells	Function assay		Inhibition of PARS40 phosphorylation in human MDA-MB-361 cells by Western blotting
MDA-MB-361 cells	Function assay		Inhibition of GSK3 kinase phosphorylation in human MDA-MB-361 cells by Western blotting
MDA-MB-361 cells	Function assay		Inhibition of mTOR TORC1 kinase activity in human MDA-MB-361 cells assessed as suppression of p70S6K phosphorylation at < 30 nM
MDA-MB-361 cells	Function assay		Inhibition of mTOR TORC1 kinase activity in human MDA-MB-361 cells assessed as suppression of 4EBP1 phosphorylation at < 30 nM
MDA-MB-361 cells	Function assay		Inhibition of Akt T308 phosphorylation in human MDA-MB-361 cells xenografted mouse model upto 36 hrs
MDA-MB-361 cells	Function assay		Inhibition of Akt S473 phosphorylation in human MDA-MB-361 cells xenografted mouse model upto 36 hrs
MDA-MB-361 cells	Function assay		Induction of PARP cleavage in human MDA-MB-361 cells xenografted mouse model upto 18 hrs
MDA-MB-361 cells	Function assay		Antitumor activity against human MDA-MB-361 cells xenografted mouse model assessed as reduction in tumor volume at 20 mg/kg, iv on day 1, 5, 9
SF9 insect cells	Function assay	2 h	Inhibition of human PI3Kalpha expressed in SF9 insect cells after 2 hrs by fluorescence polarization assay, IC50=0.0004 μM
SF9 insect cells	Function assay	2 h	Inhibition of human PI3Kgamma expressed in SF9 insect cells after 2 hrs by fluorescence polarization assay, IC50=0.011μM
MDA-MB-361 cells	Growth inhibition assay	72 h	Growth inhibition of human MDA-MB-361 cells after 72 hrs, IC50=0.003 μM
human PC3 cells	Growth inhibition assay	72 h	Growth inhibition of human PC3 cells after 72 hrs, IC50=0.011 μM
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità

Peso molecolare	615.73	Formula	C₃₂H₄₁N₉O₄	Conservazione (Dalla data di ricezione)	3 anni-20°Cpolvere
N. CAS	1197160-78-3	Scarica SDF		Conservazione delle soluzioni stock	1 anno-80°Cin solvente 1 mese-20°Cin solvente
Sinonimi	PF-05212384			Smiles	CN(C)C1CCN(CC1)C(=O)C2=CC=C(C=C2)NC(=O)NC3=CC=C(C=C3)C4=NC(=NC(=N4)N5CCOCC5)N6CCOCC6

Solubilità

In vitro
Lotto:

DMSO : 3 mg/mL (4.87 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Ethanol : 1 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 10 mg/mL (16.24 mM) Riscaldato con bagno dacqua a 50°C; Sonicato;
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa	Concentrazione	Volume	Peso molecolare
=	×	×

Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo Lotto:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validato dai laboratori Selleck. Se necessiti di modifiche a questa formulazione, contatta il nostro team di vendita per test personalizzati.	2.500mg/ml (4.06mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 50 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante lesperimento)

Dosaggio: mg/kg Peso medio degli animali: g Volume di dosaggio per animale:μL Numero di animali:

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non cè una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH₂O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nellaggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere allaggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno dacqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo dazione

Targets/IC₅₀/Ki	PI3Kα (Cell-free assay) 0.4 nM mTOR (Cell-free assay) 1.6 nM PI3Kγ (Cell-free assay) 5.4 nM
In vitro	Gedatolisib (PKI-587) mostra una potente attività inibitoria contro PI3K-α, PI3K-γ e mTOR con IC50 di 0,4 nM, 5,4 nM e 1,6 nM, rispettivamente. Inoltre, esibisce anche la sua potenza contro le forme mutanti più frequentemente riscontrate di PI3Kα, in particolare H1047R ed E545K con IC50 di 0,6 nM e 0,6 nM, rispettivamente. Correlato con la soppressione della fosforilazione delle proteine della via di segnalazione PI3K/mTOR, questo composto causa l'inibizione della crescita delle cellule tumorali nelle linee cellulari MDA-361 e PC3-MM2 con IC50 di 4 nM e 13,1 nM, rispettivamente.
Saggio chinasico	Saggio della chinasi PI3K e mTOR
Saggio chinasico	I saggi enzimatici vengono eseguiti in formato a polarizzazione di fluorescenza (FP), adattato dal protocollo del kit di saggio PI3K FP Echelon K-1100. Le PI3K di classe I umane e i mutanti PI3K-α (E545K e H1047R) vengono prodotti in Sf9 o acquistati da Upstate Biotech. GST-GRP1 (murina) viene prodotto in Escherichia coli e isolato mediante GST-Sepharose. I tamponi di saggio sono il tampone di reazione [20 mM HEPES (pH 7,1), 2 mM MgCl₂, 0,05% CHAPS e 0,01% β-mercaptoetanolo] e il tampone di arresto/rilevamento [100 mM HEPES (pH 7,5), 4 mM EDTA, 0,05% CHAPS]. La reazione FP viene eseguita per 30 minuti a temperatura ambiente in 20 μL di tampone di reazione contenente 20 μM di fosfatidilinositolo 4,5-bisfosfato (PIP2), 25 μM di ATP e <4% di DMSO. La reazione FP viene interrotta con 20 μL di tampone di arresto/rilevamento (10 nM di sonda e 40 nM di GST-GRP) e, dopo 2 ore, i dati vengono raccolti utilizzando un lettore di piastre Envision. I saggi di routine con FLAG-TOR purificato (FL e 3.5) vengono eseguiti in piastre a 96 pozzetti come segue: gli enzimi vengono prima diluiti in tampone di saggio della chinasi (10 mM Hepes (pH 7,4), 50 mM NaCl, 50 mM β-glicerofosfato, 10 mM MnCl₂, 0,5 mM DTT, 0,25 μM microcistina LR e 100 μg/mL BSA). A ciascun pozzetto, 12 μL dell'enzima diluito vengono miscelati brevemente con 0,5 μL di inibitore di prova o veicolo di controllo dimetilsolfossido (DMSO), dove l'inibitore di prova è Gedatolisib (PKI-587). La reazione della chinasi viene avviata aggiungendo 12,5 μL di tampone di saggio della chinasi contenente ATP e His6-S6K per ottenere un volume di reazione finale di 25 μL contenente 800 ng/mL di FLAG-TOR, 100 μM di ATP e 1,25 μM di His6-S6K. La piastra di reazione viene incubata per 2 ore (lineare a 1–6 ore) a temperatura ambiente con delicata agitazione e quindi terminata aggiungendo 25 μL di tampone di arresto (20 mM Hepes (pH 7,4), 20 mM EDTA e 20 mM EGTA).
In vivo	Il trattamento con Gedatolisib (PKI-587) a 25 mg/kg e.v. in topi nudi porta a una bassa clearance plasmatica (7 (mL/min)/kg), un alto volume di distribuzione (7,2 L/kg) e una lunga emivita (14,4 ore). Nel modello di xenotrapianto MDA-361, produce una potente efficacia antitumorale con la dose efficace minima (MED) di 3 mg/kg contro i tumori MDA-361 e la dose singola massima tollerata (MTD) di 30 mg/kg. Nel modello di xenotrapianto H1975 (carcinoma polmonare non a piccole cellule, EGFR mutato [L858R, T790M]), questo composto a 25 mg/kg per 7 settimane determina una sopravvivenza del 90% del gruppo trattato.
Riferimenti	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20166697/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22261591/

Applicazioni

Metodi	Biomarcatori	Immagini	PMID
Growth inhibition assay	Cell viability		29978469
Western blot	p-AKT / p-mTOR / p-p70S6K / p-S6K / p-4E-BP1 / AKT / mTOR / p70S6K / S6K / 4EBP1 TSC1 / TSC2 / Raptor		29978469

Informazioni sullo studio clinico

(dati da https://clinicaltrials.gov, aggiornato il 2024-05-22)

Numero NCT	Reclutamento	Condizioni	Sponsor/Collaboratori	Data di inizio	Fasi
NCT02438761	Terminated	Therapy-related Acute Myeloid Leukemia and Myelodysplastic Syndrome\|Acute Myeloid Leukemia in Relapse\|de Novo Acute Myeloid Leukemia at Diagnostic	Institut Curie\|Fondation ARC\|National Cancer Institute France	August 31 2015	Phase 2
NCT02069158	Completed	Breast Cancer\|NSCLC\|Ovary Cancer\|Endometrial Cancer\|Small Cell Lung Cancer (SCLC)\|Head and Neck (HNSCC)	Cristiana Sessa\|Oncology Institute of Southern Switzerland	April 2014	Phase 1
NCT01420081	Terminated	Endometrial Neoplasms	Pfizer	January 19 2012	Phase 2

Supporto tecnico

Istruzioni per la manipolazione

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Per qualsiasi altra domanda, si prega di lasciare un messaggio.

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C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
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C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
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Gedatolisib (PKI-587) PI3K inibitore

Struttura chimica

Peso molecolare: 615.73