Gedatolisib (PKI-587)

N. catalogoS2628 Lotto:S262803

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Dati tecnici

Formula

C32H41N9O4
Peso molecolare 615.73 Numero CAS 1197160-78-3
Solubilità (25°C)* In vitro DMSO 3 mg/mL (4.87 mM)
Ethanol 1 mg/mL (1.62 mM)
Water Insoluble
In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione Gedatolisib (PKI-587) è un inibitore duale altamente potente di PI3Kα, PI3Kγ e mTOR con IC50 di 0,4 nM, 5,4 nM e 1,6 nM in saggi acellulari, rispettivamente. Questo composto è attualmente in Fase 2.
Target
PI3Kα
(Cell-free assay)		 mTOR
(Cell-free assay)		 PI3Kγ
(Cell-free assay)
0.4 nM 1.6 nM 5.4 nM
In vitro Gedatolisib (PKI-587) mostra una potente attività inibitoria contro PI3K-α, PI3K-γ e mTOR con IC50 di 0,4 nM, 5,4 nM e 1,6 nM, rispettivamente. Inoltre, esibisce anche la sua potenza contro le forme mutanti più frequentemente riscontrate di PI3Kα, in particolare H1047R ed E545K con IC50 di 0,6 nM e 0,6 nM, rispettivamente. Correlato con la soppressione della fosforilazione delle proteine della via di segnalazione PI3K/mTOR, questo composto causa l'inibizione della crescita delle cellule tumorali nelle linee cellulari MDA-361 e PC3-MM2 con IC50 di 4 nM e 13,1 nM, rispettivamente.
In vivo Il trattamento con Gedatolisib (PKI-587) a 25 mg/kg e.v. in topi nudi porta a una bassa clearance plasmatica (7 (mL/min)/kg), un alto volume di distribuzione (7,2 L/kg) e una lunga emivita (14,4 ore). Nel modello di xenotrapianto MDA-361, produce una potente efficacia antitumorale con la dose efficace minima (MED) di 3 mg/kg contro i tumori MDA-361 e la dose singola massima tollerata (MTD) di 30 mg/kg. Nel modello di xenotrapianto H1975 (carcinoma polmonare non a piccole cellule, EGFR mutato [L858R, T790M]), questo composto a 25 mg/kg per 7 settimane determina una sopravvivenza del 90% del gruppo trattato.

Protocollo (da riferimento)

Saggio della chinasi:[1]
  • Saggio della chinasi PI3K e mTOR

    I saggi enzimatici vengono eseguiti in formato a polarizzazione di fluorescenza (FP), adattato dal protocollo del kit di saggio PI3K FP Echelon K-1100. Le PI3K di classe I umane e i mutanti PI3K-α (E545K e H1047R) vengono prodotti in Sf9 o acquistati da Upstate Biotech. GST-GRP1 (murina) viene prodotto in Escherichia coli e isolato mediante GST-Sepharose. I tamponi di saggio sono il tampone di reazione [20 mM HEPES (pH 7,1), 2 mM MgCl2, 0,05% CHAPS e 0,01% β-mercaptoetanolo] e il tampone di arresto/rilevamento [100 mM HEPES (pH 7,5), 4 mM EDTA, 0,05% CHAPS]. La reazione FP viene eseguita per 30 minuti a temperatura ambiente in 20 μL di tampone di reazione contenente 20 μM di fosfatidilinositolo 4,5-bisfosfato (PIP2), 25 μM di ATP e <4% di DMSO. La reazione FP viene interrotta con 20 μL di tampone di arresto/rilevamento (10 nM di sonda e 40 nM di GST-GRP) e, dopo 2 ore, i dati vengono raccolti utilizzando un lettore di piastre Envision. I saggi di routine con FLAG-TOR purificato (FL e 3.5) vengono eseguiti in piastre a 96 pozzetti come segue: gli enzimi vengono prima diluiti in tampone di saggio della chinasi (10 mM Hepes (pH 7,4), 50 mM NaCl, 50 mM β-glicerofosfato, 10 mM MnCl2, 0,5 mM DTT, 0,25 μM microcistina LR e 100 μg/mL BSA). A ciascun pozzetto, 12 μL dell'enzima diluito vengono miscelati brevemente con 0,5 μL di inibitore di prova o veicolo di controllo dimetilsolfossido (DMSO), dove l'inibitore di prova è Gedatolisib (PKI-587). La reazione della chinasi viene avviata aggiungendo 12,5 μL di tampone di saggio della chinasi contenente ATP e His6-S6K per ottenere un volume di reazione finale di 25 μL contenente 800 ng/mL di FLAG-TOR, 100 μM di ATP e 1,25 μM di His6-S6K. La piastra di reazione viene incubata per 2 ore (lineare a 1–6 ore) a temperatura ambiente con delicata agitazione e quindi terminata aggiungendo 25 μL di tampone di arresto (20 mM Hepes (pH 7,4), 20 mM EDTA e 20 mM EGTA).
Saggio cellulare:[1]
  • Linee cellulari

    MDA-361 and PC3-MM2

  • Concentrazioni

    0-10 μM

  • Tempo di incubazione

    72 hours

  • Metodo

    Cells are plated in 96-well culture plates at about 3000 cells per well. One day following plating, Gedatolisib (PKI-587) is added to cells. Three days after treatment with this compound, viable cell densities are determined by measuring metabolic conversion (by viable cells) of the dye MTS, a previously established cell proliferation assay. For each assay, MTS and PMS stocks are freshly thawed and mixed (MTS/PMS, 20:1). The MTS/PMS mixture is then added to 96-well cell plates at 20 μL/well, and plates are incubated for 1 hour–2 hours in cell culture incubator. MTS assay results are read in a 96-well format plate reader by measuring absorbance at 490 nm. The effect of each treatment is calculated as a percentage of control cell growth obtained from vehicle-treated cells grown in the same culture plate.
Studio sugli animali:[1]
  • Modelli animali

    MDA-361 and H1975 cells are injected subcutaneously into the nude mice.

  • Dosaggi

    ≤30 mg/kg

  • Somministrazione

    Administered via i.v.

Riferimenti

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20166697/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22261591/

Convalida del prodotto da parte del cliente

PI3K inhibitors promote apoptosis in checkpoint-defective cell lines. Two checkpoint-functional (A2058, D28) and three defective (HT144, D20, SKMel13) melanoma cell lines growth as tumour spheres as in Figure 4B were either untreated or treated with 5 uM PF-05212384 for 72 h, harvested and immunoblotted for pAkt Ser473.

Dati da [ Pigment Cell Melanoma Res , 2014 , 27(5), 813-21 ]

<p>After starved in serum-free medium for 24h,A549 cells incubated with the indicated concentrations of PKI-587 for 3h,followed by 20-minute stimolation of 100ng/ml EGF.</p>

, , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

Sellecks Gedatolisib (PKI-587) È stato citato da 31 Pubblicazioni

Efficacy of NAMPT inhibition in T-cell acute lymphoblastic leukemia [ PLoS One, 2025, 20(6):e0324443] PubMed: 40526635
Bypassing cisplatin resistance in Nrf2 hyperactivated head and neck cancer through effective PI3Kinase targeting [ bioRxiv, 2025, 2025.01.10.632413] PubMed: 39868226
AKT1 phosphorylation of cytoplasmic ME2 induces a metabolic switch to glycolysis for tumorigenesis [ Nat Commun, 2024, 15(1):686] PubMed: 38263319
A multiplex single-cell RNA-Seq pharmacotranscriptomics pipeline for drug discovery [ Nat Chem Biol, 2024, ] PubMed: 39482470
Assessments of prostate cancer cell functions highlight differences between a pan-PI3K/mTOR inhibitor, gedatolisib, and single-node inhibitors of the PI3K/AKT/mTOR pathway [ Mol Oncol, 2024, 10.1002/1878-0261.13703] PubMed: 39092562
Functional Assessments of Gynecologic Cancer Models Highlight Differences Between Single-Node Inhibitors of the PI3K/AKT/mTOR Pathway and a Pan-PI3K/mTOR Inhibitor, Gedatolisib [ Cancers (Basel), 2024, 16(20)3520] PubMed: 39456616
Selective Eradication of Colon Cancer Cells Harboring PI3K and/or MAPK Pathway Mutations in 3D Culture by Combined PI3K/AKT/mTOR Pathway and MEK Inhibition [ Int J Mol Sci, 2023, 24(2)1668] PubMed: 36675180
RECOVER identifies synergistic drug combinations in vitro through sequential model optimization [ Cell Rep Methods, 2023, 3(10):100599] PubMed: 37797618
In Vitro Angiogenesis Inhibition and Endothelial Cell Growth and Morphology [ Int J Mol Sci, 2022, 23(8)4277] PubMed: 35457095
Fibroblast-Induced Paradoxical PI3K Pathway Activation in PTEN-Competent Colorectal Cancer: Implications for Therapeutic PI3K/mTOR Inhibition [ Front Oncol, 2022, 12:862806] PubMed: 35719951

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