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solo per uso di ricerca

Dorsomorphin Dihydrochloride Inibitore della via AMPK/BMP

N. Cat.S7306

Dorsomorphin 2HCl è un potente, reversibile, selettivo inibitore di AMPK con Ki di 109 nM in saggi senza cellule, che non mostra una significativa inibizione di diverse chinasi strutturalmente correlate tra cui ZAPK, SYK, PKCθ, PKA e JAK3. Inibisce anche l'attività del recettore BMP di tipo I. La Dorsomorphin induce l'autophagy nelle linee cellulari tumorali.
Dorsomorphin Dihydrochloride AMPK inibitore Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 472.41

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Controllo Qualità

Lotto: Purezza: 99.98%
99.98

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro

Linee cellulari Tipo di saggio Concentrazione Tempo di incubazione Formulazione Descrizione dellattività PMID
C2C12 Function assay 4 uM Inhibition of BMPR1-mediated osteoblast differentiation in BMP4-stimulated mouse C2C12 cells assessed as decrease in alkaline phosphatase level at 4 uM by spectrophotometry 18026094
C2C12 Function assay 4 uM Inhibition of BMPR1-mediated osteoblast differentiation in BMP6-stimulated mouse C2C12 cells assessed as decrease in alkaline phosphatase level at 4 uM by spectrophotometry 18026094
HepG2 Function assay 10 uM 30 mins Inhibition of BMPR1-mediated hepcidin mRNA expression in BMP2-stimulated human HepG2 cells at 10 uM treated 30 mins before BMP2 challenge measured after 16 hrs by qRT-PCR analysis 18026094
Hep3B Function assay 10 uM 30 mins Inhibition of BMPR1-mediated hepcidin mRNA expression in IL6-stimulated human Hep3B cells at 10 uM treated 30 mins before IL6 challenge measured after 6 hrs by qRT-PCR analysis 18026094
Hep3B Function assay 10 uM 30 mins Inhibition of BMPR1-mediated Id1 mRNA expression in IL6-stimulated human Hep3B cells at 10 uM treated 30 mins before IL6 challenge measured after 6 hrs by qRT-PCR analysis 18026094
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
DAOY qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells 29435139
BT-37 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells 29435139
RD qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells 29435139
SK-N-SH qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells 29435139
BT-12 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells 29435139
MG 63 (6-TG R) qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells 29435139
NB1643 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
Rh41 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh41 cells 29435139
Rh30 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh30 cells 29435139
SJ-GBM2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
NB-EBc1 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
Rh18 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh18 cells 29435139
KB-3-1 qHTS assay P-glycoprotein substrates identified in KB-3-1 adenocarcinoma cell line, qHTS therapeutic library screen 31515284
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità

Peso molecolare 472.41 Formula

C24H25N5O.2HCl

 Conservazione (Dalla data di ricezione)
N. CAS 1219168-18-9 Scarica SDF Conservazione delle soluzioni stock

Sinonimi BML-275 2HCl,Compound C 2HCl Smiles C1CCN(CC1)CCOC2=CC=C(C=C2)C3=CN4C(=C(C=N4)C5=CC=NC=C5)N=C3.Cl.Cl

Solubilità

In vitro
Lotto:

Water : 47 mg/mL

DMSO : Insoluble
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Ethanol : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa Concentrazione Volume Peso molecolare
Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo
Lotto:

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante lesperimento)

mg/kg g μL

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non cè una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH2O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nellaggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere allaggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno dacqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo dazione

Targets/IC50/Ki
ALK2
ALK3
ALK6
AMPK
(Cell-free assay)
109 nM(Ki)
In vitro

La dorsomorfina inibisce l'inattivazione dell'ACC da parte dell'AICAR e attenua anche l'effetto dell'AICAR di aumentare l'ossidazione degli acidi grassi o sopprimere i geni lipogenici negli epatociti.

L'inibizione dell'attività di AMPK da parte della dorsomorfina inibisce quasi completamente la proteolisi autofagica nelle cellule HT-29.

Inoltre, la dorsomorfina inibisce selettivamente i recettori BMP di tipo I ALK2, ALK3 e ALK6, bloccando così la fosforilazione SMAD1/5/8 mediata da BMP, la trascrizione genica bersaglio e la differenziazione osteogenica.

Saggio chinasico
Purificazione parziale di AMPK e saggio chinasico in vitro.
L'AMPK epatica viene parzialmente purificata da ratti SD maschi fino al passaggio su blue-Sepharose. La miscela di reazione da 100 μl contiene 100 μM di AMP, 100 μM di ATP (0,5 μCi di 33P-ATP per reazione) e 50 μM di SAMS in un tampone (40 mM HEPES, pH 7,0, 80 mM NaCl, 0,8 mM EDTA, 5 mM MgCl2, 0,025% BSA e 0,8 mM DTT). La reazione viene avviata con l'aggiunta dell'enzima. Dopo 30 minuti di incubazione a 30°C, la reazione viene interrotta con l'aggiunta di 80 μl di H3PO4 all'1%. Aliquote (100 μl) vengono trasferite su piastre MultiScreen a 96 pozzetti. La piastra viene lavata tre volte con H3PO4 all'1% seguita dalla rilevazione in un Top-count. I dati di inibizione di AMPK in vitro ottenuti con il composto C — (6-[4-(2-piperidin-1-il-etossi)-fenil)]-3-piridin-4-il-pirazolo[1,5-a] pirimidina — sono adattati alla seguente equazione per l'inibizione competitiva mediante regressione non lineare utilizzando un algoritmo di Marquardt dei minimi quadrati in un programma informatico scritto da N. Thornberry dei Merck Research Laboratories: Vi/Vo = (Km + S)/[S + Km × (1 + I/Ki)], dove Vi è la velocità inibita, Vo è la velocità iniziale, S è la concentrazione del substrato (ATP), Km è la costante di Michaelis per l'ATP, I è la concentrazione dell'inibitore (composto C) e Ki è la costante di dissociazione per il composto C.
In vivo

La dorsomorfina (10 mg/kg) riduce i livelli basali di espressione dell'epcidina e aumenta le concentrazioni sieriche di ferro nei topi adulti.

La dorsomorfina (0,2 mg/kg, i.v.) riduce significativamente l'espressione di VCAM-1 e ICAM-1 nell'aorta toracica di ratti trattati con LPS.

Riferimenti
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21764059/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35241643/

Applicazioni

Metodi Biomarcatori Immagini PMID
Western blot p-SMAD / SMAD Id1 / Id2 / Id3 pAMPK / AMPK / pACC / ACC / pRaptor / HIF1α p-ERK / ERK / Bcl2 / BAX / Cleaved caspase-3 LC3B I/ LC3B II
S7306-WB1
30808965
Immunofluorescence MyHC Id1 / MyoD
S7306-IF1
20689554
Growth inhibition assay Cell viability (MM cells) Cell viability (glioma cell lines)
S7306-viability1
25010525

Supporto tecnico

Istruzioni per la manipolazione

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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Domande Frequenti

Domanda 1:
Is there any information you may provide as to WHICH AMPK SUBUNIT this compound is targeting in the AMPK complex?

Risposta:
According to the reference (see link below), it should target the AMPK alpha subunit through ALCAR or metformin. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20844250