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D 4476 Casein Kinase inibitore

Name: D 4476
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7642
Rating: 5 (21 reviews)

N. Cat.S7642

D 4476 è un potente, selettivo e permeabile alle cellule inibitore di CK1 (casein kinase 1) con IC50 di 200 nM e 300 nM in un saggio senza cellule per CK1 da Schizosaccharomyces pombe e CK1δ, rispettivamente. Agisce anche come inibitore di ALK5 con IC50 di 500 nM.

D 4476 Casein Kinase inibitore Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 398.41

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Controllo Qualità

Lotto: Purezza: 99.73%

99.73

Target correlati	Dehydrogenase HSP Transferase P450 (e.g. CYP17) PDE phosphatase PPAR Vitamin Carbohydrate Metabolism Mitochondrial Metabolism
Altro Casein Kinase Inibitori	Silmitasertib (CX-4945) Silmitasertib (CX-4945) sodium salt TBB IC261 PF-670462 Ellagic Acid hydrate TTP 22 Longdaysin PF 4800567 (E/Z)-GO289

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro

Linee cellulari	Tipo di saggio	Concentrazione	Tempo di incubazione	Formulazione	Descrizione dellattività	PMID
A375 cells	Function assay	10-80 μM	48 h		Inhibition of CK1-MDM2 complex in human A375 cells assessed as increase in p21 protein level at 10 to 80 uM after 48 hrs by immunoblotting analysis
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità

Peso molecolare	398.41	Formula	C₂₃H₁₈N₄O₃	Conservazione (Dalla data di ricezione)	3 anni-20°Cpolvere
N. CAS	301836-43-1	Scarica SDF		Conservazione delle soluzioni stock	1 anno-80°Cin solvente 1 mese-20°Cin solvente
Sinonimi	N/A			Smiles	C1COC2=C(O1)C=CC(=C2)C3=C(NC(=N3)C4=CC=C(C=C4)C(=O)N)C5=CC=CC=N5

Solubilità

In vitro
Lotto:

DMSO : 79 mg/mL (198.28 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa	Concentrazione	Volume	Peso molecolare
=	×	×

Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo Lotto:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 Corn oil Validato dai laboratori Selleck. Se necessiti di modifiche a questa formulazione, contatta il nostro team di vendita per test personalizzati.	3.950mg/ml (9.91mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 79 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante lesperimento)

Dosaggio: mg/kg Peso medio degli animali: g Volume di dosaggio per animale:μL Numero di animali:

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non cè una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH₂O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nellaggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere allaggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno dacqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo dazione

Targets/IC₅₀/Ki	CK1 from Schizosaccharomyces pombe 200 nM CK1δ 300 nM ALK5 500 nM
In vitro	D4476 (10 μM) inibisce efficacemente CK1 e ALK5 con attività di circa il 7% e il 22% rispetto al gruppo di controllo, rispettivamente. Nelle cellule di epatoma H4IIE, D4476 inibisce specificamente la fosforilazione del fattore di trascrizione endogeno forkhead box O1a (FOXO1a) su Ser322 e Ser325, senza influenzare la fosforilazione di altri siti. D4476 induce citotossicità nelle linee ANBL6, INA6 e RPMI8226; le linee MM1S e U266 sono meno sensibili; e la linea OPM1 è totalmente resistente. Alte concentrazioni (50 μM) di D4476 hanno indotto tossicità in tutte le linee di mieloma multiplo (MM). Nelle cellule MM, D4476 aumenta i livelli proteici di TP53, P27 e FADD, così come la progressione del ciclo cellulare e l'induzione dell'apoptosi. Il trattamento delle cellule staminali leucemiche (LSC) con D4476 mostra un'uccisione altamente selettiva delle LSC rispetto alle normali HSPC.
Saggio chinasico	CK1 kinase assay
Saggio chinasico	Tutti i saggi di proteina chinasi (25 μL) vengono eseguiti a temperatura ambiente (21℃). I saggi vengono eseguiti per 40 minuti utilizzando una Workstation di automazione di laboratorio Biomek 2000 in un formato a 96 pozzetti. Le concentrazioni di acetato di magnesio e [γ-^33P]ATP (800 cpm/pmol) nei saggi sono rispettivamente 10 mM e 0,1 mM. I saggi vengono iniziati con MgATP e interrotti con l'aggiunta di 5 μL di acido ortofosforico 0,5 M. Aliquote vengono quindi macchiate su filtri P30, lavate quattro volte in acido fosforico 75 mM per rimuovere l'ATP, una volta in metanolo, quindi essiccate e contate per la radioattività. CK1 δ (5-20 m-unità), diluito in 20 mM Hepes, pH 7,5, 0,15 M NaCl, 0,1 mM EGTA, 0,1% (v/v) Triton X-100, 5 mM ditiotreitolo, 50% (v/v) glicerolo, viene saggiato contro il peptide RRKDLHDDEEDEAMSITA in un'incubazione contenente 20 mM Hepes, pH 7,5, 0,15 M NaCl, 0,1 mM EDTA, 5 mM DTT, 0,1% (v/v) Triton X-100 e 0,5 mM di peptide substrato.
Riferimenti	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14710188/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24962017/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24616378/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12534346/

Applicazioni

Metodi	Biomarcatori	Immagini	PMID
Western blot	MDM2 / p53 / p21 / E2F-1 / pRB		19759023

Supporto tecnico

Istruzioni per la manipolazione

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Per qualsiasi altra domanda, si prega di lasciare un messaggio.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):