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LY364947 TGF-beta/Smad Inibitore

N. Cat.: S2805

LY364947 (HTS 466284) è un potente inibitore ATP-competitivo di TGFβR-I con IC50 di 59 nM in un saggio senza cellule, mostrando una selettività 7 volte superiore rispetto a TGFβR-II.
LY364947 TGF-beta/Smad Inibitore Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 272.3

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Controllo Qualità (Quality Control)

Lotto: Purezza: 99.93%
99.93

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Linee cellulari Tipo di saggio Concentrazione Tempo di incubazione Formulazione Descrizione dell'attività PMID
mink Mv1Lu lung cells Function assay Inhibition of TGFbeta R1 induced transcriptional activation of p3TP-Lux in mink Mv1Lu lung cells, IC50=0.04 μM
Sf9 cells Function assay Inhibition of human Transforming growth factor (TGF) beta-1 receptor (T204D mutation) autophosphorylation in Sf9 cells, IC50=0.051 μM
Sf9 cells Function assay Inhibition of recombinant human TGFbeta R1 expressed in Sf9 cells, IC50=0.059 μM
HepG2 cells Function assay Inhibition of TGF-beta-induced expression of PAI-luciferase reporter in HepG2 cells, IC50=0.06 μM
NIH3T3 cells Function assay Inhibitory activity against TGF-beta-stimulated proliferation in NIH3T3 cells, IC50=0.081 μM
Sf9 cells Function assay Inhibition of recombinant human TGFbeta R2 expressed in Sf9 cells, IC50=0.4 μM
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecolare 272.3 Formula

C17H12N4

 Conservazione (Dalla data di ricezione)
N. CAS 396129-53-6 Scarica SDF Conservazione delle soluzioni stock

Sinonimi HTS 466284 Smiles C1=CC=C2C(=C1)C(=CC=N2)C3=C(NN=C3)C4=CC=CC=N4

Solubilità (Solubility)

In vitro
Lotto:

DMSO : 4 mg/mL (14.68 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa Concentrazione Volume Peso molecolare
Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo
Lotto:

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante l'esperimento)

mg/kg g μL

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non c'è una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH2O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nell'aggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere all'aggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno d'acqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo d'azione (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
TGFβRI
(Cell-free assay)
59 nM
RIPK2
(Cell-free assay)
0.11 μM
CK1δ
(Cell-free assay)
0.22 μM
TGFβRII
(Cell-free assay)
0.4 μM
MLK-7K
(Cell-free assay)
1.4 μM
In vitro
LY364947 is an ATP competitive and tight-binding inhibitor, inhibiting phosphorylation of P-Smad3 by TGFβR-I kinase with Ki of 28 nM. This compound inhibits in vivo Smad2 phosphorylation within the NMuMg cells with IC50 of 135 nM. It reverses TGF-β-mediated growth inhibition in NMuMg cells with IC50 of 0.218 μM. This chemical potentiates the xVent2-lux BMP4 response in NMuMg cells by 30% at concentrations as low as 0.25 μM. It (2 μM) prevents TGF-β-induced epithelial−mesenchymal transition in NMuMg cells. This compound (3 μM) induces expression of Prox1 and LYVE-1 in almost all HDLECs after 24 hours. It promotes nuclear export of Foxo3a, with low Smad2/3 and high Akt phosphorylation levels in leukaemia-initiating cells. This chemical (< 20 μM) suppresses leukaemia-initiating cells colony-forming ability after co-culture with OP-9 stromal cells.
Saggio chinasico
Saggio di legame al filtro
L'IC50 di LY364947 a diverse concentrazioni enzimatiche è determinata dal saggio di legame al filtro. Tipicamente, 40 μL di reazioni in 50 mM HEPES a pH 7,5, 1 mM NaF, 200 μM pKSmad3(-3) e 50 mM ATP contenenti una titolazione di ciascun inibitore con concentrazioni di 1600, 800, 400, 200, 100, 50, 25 e 0 nM vengono incubate a 30 °C per 30 min. L'IC50 viene calcolata utilizzando un metodo di regressione non lineare con il software GraphPad Prism. Il tipo di legame viene determinato tracciando la correlazione tra le concentrazioni enzimatiche e i valori di IC50.
In vivo
LY364947 (1 mg/kg i.p.) accelerates lymphangiogenesis, as evidence by significantly increased the LYVE-1-positive areas, in a mouse model of chronic peritonitis. This compound significantly increases the LYVE-1-positive areas in tumor tissues in tumor xenograft models using BxPC3 pancreatic adenocarcinoma cells. This chemical increases p-Akt and decreases nuclear Foxo3a in leukaemia-initiating cells in CML-affected mice.
Riferimenti
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18310502/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20130650/
  • [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20080567/

Applicazioni (Applications)

Metodi Biomarcatori Immagini PMID
Western blot FOXC2 / p-Smad / Smad / p-p38 / p38 / p-ATF2 / ATF2
S2805-WB1
26804168
Immunofluorescence TEEB
S2805-IF1
31387632