Name: RepSox (E-616452)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7223
Rating: 5 (84 reviews)

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Controllo Qualità (Quality Control)

Lotto: Purezza: 99.92%

99.92

Target correlati	PKC ROCK Bcr-Abl
Altro TGF-beta/Smad Inibitori	SB431542 Vactosertib (TEW-7197) LDN-193189 A-83-01 LDN-193189 Dihydrochloride Galunisertib (LY2157299) SRI-011381 (C381) LY2109761 SIS3 Hydrochloride SB-525334

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Linee cellulari	Tipo di saggio	Concentrazione	Tempo di incubazione	Descrizione dell'attività	PMID
baculovirus/Sf9 cells	Function assay			Inhibition of recombinant Activin A receptor type II-like kinase (ALK5) expressed in baculovirus/Sf9 cells, IC50=4 nM	15317461
HepG2 cells	Function assay			Stimulation of Transforming growth factor beta receptor I kinase in HepG2 cells, IC50=10 nM	15317461
Sf9	Function assay			Inhibition of human ALK5 expressed in Sf9 insect cells using casein as substrate in presence of [gamma-33P]ATP, IC50 = 0.181 μM.	28135685
Sf9	Function assay			Inhibition of mouse ABL expressed in Sf9 insect cells using GGEAIYAAPFKK as substrate in presence of [gamma-33P]ATP, IC50 = 21 μM.	28135685
HeLa	Function assay	1 uM	30 mins	Inhibition of ALK5 in serum starved human HeLa cells assessed as reduction in TGF-beta-induced SMAD2/3 nuclear transaction at 1 uM pre-incubated for 30 mins before TGF-beta stimulation for 30 mins by immunofluorescence analysis	28135685
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecolare	287.32	Formula	C₁₇H₁₃N₅	Conservazione (Dalla data di ricezione)	3 anni-20°Cpolvere
N. CAS	446859-33-2	Scarica SDF		Conservazione delle soluzioni stock	1 anno-80°Cin solvente 1 mese-20°Cin solvente
Sinonimi	SJN 2511,ALK5 Inhibitor II			Smiles	CC1=NC(=CC=C1)C2=C(C=NN2)C3=NC4=C(C=C3)N=CC=C4

Solubilità (Solubility)

In vitro
Lotto:

DMSO : 57 mg/mL (198.38 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa	Concentrazione	Volume	Peso molecolare
=	×	×

Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo Lotto:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante l'esperimento)

Dosaggio: mg/kg Peso medio degli animali: g Volume di dosaggio per animale:μL Numero di animali:

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non c'è una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH₂O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nell'aggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere all'aggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno d'acqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo d'azione (Mechanism of Action)

Targets/IC₅₀/Ki	TGFβR1(ALK5) (Cell-free assay) 4 nM
In vitro	RepSox (E-616452) inibisce il legame dell'ATP a ALK5 e l'autofosforilazione di ALK5 con IC50 di 23 nM e 4 nM, rispettivamente. Inibisce anche l'attività della luciferasi PAI-1 cellulare indotta da TGF-β con un IC50 di 18 nM. Questo composto è in grado di sostituire con successo Sox2 nella riprogrammazione inibendo la segnalazione del fattore di crescita trasformante-β (Tgf-β), che a sua volta induce l'espressione di Nanog. L'effetto di RepSox che induce la riprogrammazione non richiede il rimodellamento della cromatina. Si è dimostrato efficiente nella generazione di iPSCs.
Saggio chinasico	Saggio di legame per polarizzazione di fluorescenza ALK5
Saggio chinasico	Il legame del composto con ALK5 viene testato su GST-ALK5 ricombinante purificata (residui 198-503). Lo spostamento dell'inibitore competitivo dell'ATP marcato fluorescentemente con rodamina verde da parte di diverse concentrazioni di composti di prova viene utilizzato per calcolare una pIC50 di legame. La GST-ALK5 viene aggiunta a un tampone contenente 62,5 mM di Hepes, pH 7,5, 1 mM di DTT, 12,5 mM di MgCl₂, 1,25 mM di CHAPS e 1 nM di ligando marcato con rodamina verde, in modo che la concentrazione finale di ALK5 sia di 10 nM, basata sulla titolazione del sito attivo dell'enzima. Quaranta microlitri del reagente enzima/ligando vengono aggiunti a piastre di saggio a 384 pozzetti contenenti 1 μL di diverse concentrazioni di RepSox (E-616452). Le piastre vengono lette immediatamente su un lettore di fluorescenza con filtri di eccitazione, emissione e dicroici di 485, 530 e 505 nm, rispettivamente. La polarizzazione della fluorescenza per ciascun pozzetto viene calcolata da Acquest e quindi importata in un software di adattamento delle curve per la costruzione delle curve concentrazione-risposta.
In vivo	Se iniettato in blastocisti, RepSox (E-616452) è in grado di contribuire alla formazione di embrioni chimerici in vivo. Un trattamento di un giorno con questo composto è sufficiente a sostituire la Sox2 transgenica.
Riferimenti	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15317461/ [2] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3335195/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36207615/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32066676/

Applicazioni (Applications)

Metodi	Biomarcatori	Immagini	PMID
Western blot	α-SMA / Calponin / Histone H3		30365043
Immunofluorescence	Smad2/3 / cytokeratin		28729719

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

RepSox (E-616452) TGF-beta/Smad inhibitor

Struttura chimica

Peso molecolare: 287.32

Controllo Qualità (Quality Control)

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Informazioni chimiche, conservazione e stabilità (Chemical Information, Storage & Stability)

Solubilità (Solubility)

Calcolatore di Molarità

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Meccanismo d'azione (Mechanism of Action)

Applicazioni (Applications)

RepSox (E-616452) TGF-beta/Smad inhibitor

Struttura chimica

Peso molecolare: 287.32

Controllo Qualità (Quality Control)

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro (Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Informazioni chimiche, conservazione e stabilità (Chemical Information, Storage & Stability)

Solubilità (Solubility)

Calcolatore di Molarità

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Meccanismo d'azione (Mechanism of Action)

Applicazioni (Applications)

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)