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AT9283 JAK inibitore

N. Cat.S1134

AT9283 è un potente inibitore di JAK2/3 con IC50 di 1,2 nM/1,1 nM in saggi senza cellule; è anche potente contro Aurora A/B, Abl1(T315I).
AT9283 JAK inibitore Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 381.43

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Controllo Qualità

Lotto: Purezza: 99.82%
99.82

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro

Linee cellulari Tipo di saggio Concentrazione Tempo di incubazione Formulazione Descrizione dellattività PMID
HCT116 Cytotoxicity assay 10 to 14 days Cytotoxicity against human HCT116 cells assessed as number of colonies after 10 to 14 days by colony forming assay, IC50=0.012μM 19143567
HCT116 Function assay 10 mg/kg Cmax in BALB/c mouse bearing human HCT116 cells at 10 mg/kg, po, Cmax=0.45μM 19143567
HCT116 Function assay 5 mg/kg Cmax in BALB/c mouse bearing human HCT116 cells at 5 mg/kg, iv, Cmax=4.9μM 19143567
HCT116 Function assay 20 mg/kg Cmax in BALB/c mouse bearing human HCT116 cells at 20 mg/kg, ip, Cmax=8.4μM 19143567
HT-29 Antitumor assay 72 hrs Antitumor activity against human HT-29 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50=0.383μM 23664099
A549 Antitumor assay 72 hrs Antitumor activity against human A549 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50=0.512μM 23664099
LoVo Antitumor assay 72 hrs Antitumor activity against human LoVo cells after 72 hrs by MTT assay, IC50=0.553μM 23664099
K562 Antitumor assay 72 hrs Antitumor activity against human K562 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50=1.6μM 23664099
U937 Antitumor assay 72 hrs Antitumor activity against human U937 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50=6.7μM 23664099
BL21 (DE3) Function assay 30 mins Inhibition of His6-tagged MELK catalytic domain (1 to 340 residues) (unknown origin) expressed in Escherichia coli BL21 (DE3) cells using Bcl-GL as substrate measured after 30 mins in presence of [gamma32P]ATP by liquid scintillation counting method, IC50=0.685μM 28351607
Sf9 Function assay Binding affinity to N-terminal TEV-cleavable hexa-histidine tagged human JAK2 JH1 domain (840 to 1132 residues) expressed in baculovirus-infected Sf9 cells by ITC assay, Kd=0.011μM 28626521
Sf9 Function assay Binding affinity to C-terminal thrombin-cleavable hexa-histidine tagged human JAK2 JH2 pseudokinase domain (536 to 812 residues) W659A/W777A/F794H mutant expressed in baculovirus-infected Sf9 cells by ITC assay, Kd=1.323μM 28626521
Sf9 Function assay 10 uM 60 mins Displacement of BODIPY-ATP from C-terminal thrombin-cleavable hexa-histidine tagged human JAK2 JH2 pseudokinase domain (536 to 812 residues) W659A/W777A/F794H mutant expressed in baculovirus-infected Sf9 cells at 10 uM after 60 mins by high-throughput flu 28626521
HCT116 Function assay Inhibition of Aurora B kinase in human HCT116 cells assessed as reduction in polyploid phenotype, IC50=0.03μM 28918096
DAOY qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells 29435139
SJ-GBM2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells 29435139
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
BT-37 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells 29435139
NB-EBc1 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells 29435139
U-2 OS qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for U-2 OS cells 29435139
Saos-2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells 29435139
SK-N-SH qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells 29435139
NB1643 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
BT-12 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells 29435139
Rh18 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh18 cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
RD qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells 29435139
MG 63 (6-TG R) qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells 29435139
fibroblast cells qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for control Hh wild type fibroblast cells 29435139
Rh41 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh41 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for SK-N-MC cells 29435139
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità

Peso molecolare 381.43 Formula

C19H23N7O2

 Conservazione (Dalla data di ricezione)
N. CAS 896466-04-9 Scarica SDF Conservazione delle soluzioni stock

Sinonimi N/A Smiles C1CC1NC(=O)NC2=C(NN=C2)C3=NC4=C(N3)C=C(C=C4)CN5CCOCC5

Solubilità

In vitro
Lotto:

DMSO : 76 mg/mL (199.25 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Ethanol : 25 mg/mL

Water : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa Concentrazione Volume Peso molecolare
Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo
Lotto:

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante lesperimento)

mg/kg g μL

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non cè una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH2O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nellaggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere allaggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno dacqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo dazione

Targets/IC50/Ki
JAK3
(Cell-free assay)
1.1 nM
JAK2
(Cell-free assay)
1.2 nM
Aurora A
(Cell-free assay)
~3.0 nM
Aurora B
(Cell-free assay)
~3.0 nM
Abl1 (T315I)
(Cell-free assay)
4 nM
GSK-3β
(Cell-free assay)
1 nM-10 nM
FGFR2
(Cell-free assay)
1-10 nM
VEGFR3/FLT4
(Cell-free assay)
1 nM-10 nM
Mer
(Cell-free assay)
1 nM-10 nM
RET
(Cell-free assay)
1 nM-10 nM
RSK2
(Cell-free assay)
1 nM-10 nM
RSK3
(Cell-free assay)
1 nM-10 nM
TYK2
(Cell-free assay)
1 nM-10 nM
YES
(Cell-free assay)
1 nM-10 nM
Abl (Q252H)
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
DRAK1
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
FGFR1
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
FGFR1 (V561M)
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
FGFR2 (N549H)
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
FGFR3
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
VEGFR1/FLT1
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
FLT3
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
PDGFRα (D842V)
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
PDK-1
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
PKCμ
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
RSK4
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
Src (T341M)
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
VEGFR2
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
In vitro

AT9283 porta a un chiaro fenotipo poliploide inibendo l'attività della Aurora B chinasi nelle cellule HCT116 con una IC50 di 30 nM. Inoltre, questo composto produce anche una potente inibizione sulla formazione di colonie di HCT116.

Saggio chinasico
Saggi di Aurora A e Aurora B Kinasi
I saggi per Aurora A e B vengono eseguiti in formato DELFIA. L'enzima Aurora A viene incubato con AT9283 e 3 μM di substrato cross-tide (biotina-CGPKGPGRRGRRRTSSFAEG) in 10 mM MOPS, pH 7, 0,1 mg/mL BSA, 0,001% Brij-35, 0,5% glicerolo, 0,2 mM EDTA, 10 mM MgCl2, 0,01% β-mercaptoetanolo, 15 μM ATP e 2,5% DMSO. L'enzima Aurora B viene incubato con questo composto, 3 μM del substrato sopra menzionato in 25 mM Tris, pH 8,5, 5 mM MgCl2, 0,1 mg/mL BSA, 0,025% Tween-20, 1 mM DTT, 15 μM ATP e 2,5% DMSO. Le reazioni vengono lasciate procedere per 60 minuti e 45-90 minuti per Aurora A e Aurora B, rispettivamente, prima di essere interrotte con EDTA. Le miscele di reazione vengono quindi trasferite su una piastra rivestita di neutravidina e il peptide fosforilato viene quantificato mediante un anticorpo fosfo-specifico e un anticorpo secondario marcato con europio utilizzando la fluorescenza risolta nel tempo (eccitazione, 337 nm; emissione, 620 nm). I valori di IC50 per i composti di controllo sono 92 nM (saggio Aurora A) e 17 nM (saggio Aurora B).
In vivo

In topi portatori di xenotrapianto di carcinoma del colon umano HCT116, il trattamento con AT9283 (15 mg/kg e 20 mg/kg) per 16 giorni si traduce in una significativa inibizione della crescita tumorale del 67% e 76%, rispettivamente. Inoltre, questo composto mostra anche una emivita significativamente più lunga nei tumori (2,5 ore) rispetto al plasma (0,5 ore) e una modesta biodisponibilità orale nei topi (Fp.o. = 24%).

Riferimenti

Applicazioni

Metodi Biomarcatori Immagini PMID
Growth inhibition assay Cell viability
S1134-viability1
21430070

Informazioni sullo studio clinico

(dati da https://clinicaltrials.gov, aggiornato il 2024-05-22)

Numero NCT Reclutamento Condizioni Sponsor/Collaboratori Data di inizio Fasi
NCT01145989 Completed
Multiple Myeloma
NCIC Clinical Trials Group|Astex Pharmaceuticals Inc.|Canadian Cancer Trials Group
 February 15 2011 Phase 2
NCT00443976 Completed
Non-Hodgkins Lymphoma|Unspecified Adult Solid Tumor Protocol Specific
NCIC Clinical Trials Group|Astex Pharmaceuticals Inc.|Canadian Cancer Trials Group
 January 30 2007 Phase 1

Supporto tecnico

Istruzioni per la manipolazione

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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