Home Cytoskeletal Signaling Kinesin Inibitore SB743921 HCl

solo per uso di ricerca

SB743921 HCl Kinesin Inibitore

N. Cat.: S2182

SB743921 è un inibitore della proteina del fuso di chinesina (KSP) con un Ki di 0,1 nM, quasi nessuna affinità per MKLP1, Kin2, Kif1A, Kif15, KHC, Kif4 e CENP-E. Fase 1/2.
SB743921 HCl Kinesin Inibitore Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 553.52

Vai a

Controllo Qualità (Quality Control)

Lotto: Purezza: 99.34%
99.34

Informazioni chimiche, conservazione e stabilità (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecolare 553.52 Formula

C31H33N2O3.HCl

 Conservazione (Dalla data di ricezione)
N. CAS 940929-33-9 Scarica SDF Conservazione delle soluzioni stock

Sinonimi N/A Smiles CC1=CC=C(C=C1)C(=O)N(CCCN)C(C2=C(C(=O)C3=C(O2)C=C(C=C3)Cl)CC4=CC=CC=C4)C(C)C.Cl

Solubilità (Solubility)

In vitro
Lotto:

DMSO : 100 mg/mL (180.66 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Ethanol : 100 mg/mL

Water : 46 mg/mL

Calcolatore di Molarità

Massa Concentrazione Volume Peso molecolare
Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo
Lotto:

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante l'esperimento)

mg/kg g μL

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non c'è una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH2O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nell'aggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere all'aggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno d'acqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo d'azione (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
KSP (MX1 cells)
0.06 nM
KSP (Colo205 cells)
0.07 nM
KSP
0.1 nM(Ki)
KSP (SKOV3 cells)
0.2 nM
KSP (MV522 cells)
1.7 nM
KSP (P388 cells)
14.4 nM
In vitro
The Ki of SB 743921 for human and mouse KSP is 0.1 nM and 0.12 nM, respectively, while the Ki of SB 743921 for other kinesins including MKLP1, Kin2 is more than 70 μM. SB 743921 blocks assembly of a functional mitotic spindle, thereby causing cell cycle arrest in mitosis and subsequent cell death. SB-743921 has improved potency over ispinesib in both biochemical and cellular assays.
Saggio chinasico
Saggio biochimico
I domini motori della KSP (aminoacidi 1–360) sono espressi in Escherichia coli BL21(DE3) come proteine di fusione 6-His COOH-terminali. I pellet batterici vengono lisati in un microfluidizzatore con un tampone di lisi [50 mM Tris-HCl; 50 mM KCl, 10 mM imidazolo, 2 mM MgCl2, 8 mM β-mercaptoetanolo, 0,1 mM ATP (pH 7,4)], e le proteine vengono purificate usando cromatografia di affinità su agarosio Ni-NTA, con un tampone di eluizione costituito da 50 mM PIPES, 10% saccarosio, 300 mM imidazolo, 50 mM KCl, 2 mM MgCl2, mM β-mercaptoetanolo e 0,1 mM ATP (pH 6,8). Le misurazioni dello stato stazionario dell'attività ATPasica vengono eseguite con un sistema di rilevamento piruvato chinasi-lattato deidrogenasi che accoppia la comparsa di ADP con l'ossidazione di NADH. I cambiamenti di assorbanza vengono monitorati a 340 nm. Tutti gli esperimenti biochimici vengono eseguiti in tampone PEM25 [25 mM Pipes/KOH (pH 6,8), 2 mM MgCl2, 1 mM EGTA] supplementato con 10 μM SB 743921 per esperimenti che coinvolgono i microtubuli. Le velocità di rilascio di ADP vengono misurate in un apparato a flusso interrotto; viene monitorata la diminuzione della fluorescenza di MANT-ATP. Le velocità di rilascio di Pi vengono misurate in un apparato a flusso interrotto, utilizzando una proteina batterica legante il fosfato modificata con il colorante 7-dietilammino-3-((((2 maleimmidil)etil)ammino)carbonil)cumarina (MDCC). Le stime di Ki degli inibitori di KSP vengono estratte dalle curve dose-risposta, con correzione esplicita per la concentrazione enzimatica. La polimerizzazione della tubulina misurando i cambiamenti di assorbanza a 340 nm viene monitorata. Il saggio viene eseguito in volumi di 100 μL in piastre per microtitolazione a 96 pozzetti a mezza area, utilizzando un lettore di micropiastre con la temperatura di incubazione impostata a 37 °C.
In vivo
SB-743921 is greater efficacy in vivo against P388 leukemia. SB-743921 has significant efficacy in a broad spectrum of tumor models differing from that of taxanes. SB-743921 is shown to have activity against advanced human tumor xenografts Colo205 (complete regressions), MCF-7, SK-MES, H69, OVCAR-3 (complete and partial regressions), and HT-29, MX-1, MDA-MB-231, A2780 (tumor growth delay). SB-743921 doesn't cause the neuropathy often associated with the tubulin agents.
Riferimenti

Informazioni sullo studio clinico (Clinical Trial Information)

(dati da https://clinicaltrials.gov, aggiornato il 2024-05-22)

Numero NCT Reclutamento Condizioni Sponsor/Collaboratori Data di inizio Fasi
NCT00343564 Completed
Non-Hodgkin''s Lymphoma|Hodgkin''s Disease
Cytokinetics
 April 2006 Phase 1|Phase 2