SB743921 HCl

N. catalogoS2182 Lotto:S218201

Stampa

Dati tecnici

Formula

C31H33N2O3.HCl
Peso molecolare 553.52 Numero CAS 940929-33-9
Solubilità (25°C)* In vitro DMSO 111 mg/mL (200.53 mM)
Ethanol 111 mg/mL (200.53 mM)
Water 22 mg/mL (39.74 mM)
In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione SB743921 è un inibitore della proteina del fuso di chinesina (KSP) con un Ki di 0,1 nM, quasi nessuna affinità per MKLP1, Kin2, Kif1A, Kif15, KHC, Kif4 e CENP-E. Fase 1/2.
Target
KSP (MX1 cells) KSP (Colo205 cells) KSP KSP (SKOV3 cells) KSP (MV522 cells) Visualizza altro
0.06 nM 0.07 nM 0.1 nM(Ki) 0.2 nM 1.7 nM
In vitro Il Ki di SB 743921 per KSP umana e murina è rispettivamente di 0,1 nM e 0,12 nM, mentre il Ki di SB 743921 per altre chinesine, inclusi MKLP1, Kin2, è superiore a 70 μM. SB 743921 blocca l'assemblaggio di un fuso mitotico funzionale, causando così l'arresto del ciclo cellulare in mitosi e la successiva morte cellulare. SB-743921 ha una potenza migliorata rispetto a ispinesib sia in saggi biochimici che cellulari.
In vivo SB-743921 ha una maggiore efficacia in vivo contro la leucemia P388. SB-743921 ha un'efficacia significativa in un ampio spettro di modelli tumorali che differiscono da quelli dei taxani. È stato dimostrato che SB-743921 ha attività contro xenotrapianti tumorali umani avanzati Colo205 (regressioni complete), MCF-7, SK-MES, H69, OVCAR-3 (regressioni complete e parziali) e HT-29, MX-1, MDA-MB-231, A2780 (ritardo della crescita tumorale). SB-743921 non causa la neuropatia spesso associata agli agenti della tubulina.

Protocollo (da riferimento)

Saggio della chinasi:[2]
  • Saggio biochimico

    I domini motori della KSP (aminoacidi 1–360) sono espressi in Escherichia coli BL21(DE3) come proteine di fusione 6-His COOH-terminali. I pellet batterici vengono lisati in un microfluidizzatore con un tampone di lisi [50 mM Tris-HCl; 50 mM KCl, 10 mM imidazolo, 2 mM MgCl2, 8 mM β-mercaptoetanolo, 0,1 mM ATP (pH 7,4)], e le proteine vengono purificate usando cromatografia di affinità su agarosio Ni-NTA, con un tampone di eluizione costituito da 50 mM PIPES, 10% saccarosio, 300 mM imidazolo, 50 mM KCl, 2 mM MgCl2, mM β-mercaptoetanolo e 0,1 mM ATP (pH 6,8). Le misurazioni dello stato stazionario dell'attività ATPasica vengono eseguite con un sistema di rilevamento piruvato chinasi-lattato deidrogenasi che accoppia la comparsa di ADP con l'ossidazione di NADH. I cambiamenti di assorbanza vengono monitorati a 340 nm. Tutti gli esperimenti biochimici vengono eseguiti in tampone PEM25 [25 mM Pipes/KOH (pH 6,8), 2 mM MgCl2, 1 mM EGTA] supplementato con 10 μM SB 743921 per esperimenti che coinvolgono i microtubuli. Le velocità di rilascio di ADP vengono misurate in un apparato a flusso interrotto; viene monitorata la diminuzione della fluorescenza di MANT-ATP. Le velocità di rilascio di Pi vengono misurate in un apparato a flusso interrotto, utilizzando una proteina batterica legante il fosfato modificata con il colorante 7-dietilammino-3-((((2 maleimmidil)etil)ammino)carbonil)cumarina (MDCC). Le stime di Ki degli inibitori di KSP vengono estratte dalle curve dose-risposta, con correzione esplicita per la concentrazione enzimatica. La polimerizzazione della tubulina misurando i cambiamenti di assorbanza a 340 nm viene monitorata. Il saggio viene eseguito in volumi di 100 μL in piastre per microtitolazione a 96 pozzetti a mezza area, utilizzando un lettore di micropiastre con la temperatura di incubazione impostata a 37 °C.
Saggio cellulare:[2]
  • Linee cellulari

    HeLa cells

  • Concentrazioni

    ~1 μM

  • Tempo di incubazione

    24 hours

  • Metodo

    All cells including HeLa cells are cultured in 10% FCS in RPMI 1640 in 5% CO2. We assessed 48-hour growth inhibition by serial dilution of SB 743921 relative to DMSO-treated cells in 96-well microtiter plates, using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium. Cell growth is represented as the ratio of absorbance of treated cells to DMSO control, plotted by concentration and fitted to a four-parameter curve. Concentrations at which cellular growth is inhibited by 50% are extrapolated from the curve fit. The DNA content of HeLa cells cultured in the presence or absence of 1 μM SB 743921 for 24 hours is assessed by propidium iodide staining and flow cytometry. Immunofluorescence images are collected of HeLa cells treated for 24 hours with 1 μM SB 743921, fixed with 2% formaldehyde, permeabilized, and stained with DM1-α, anti-γ-tubulin, and 1 μg/mL 4′,6-diamidino-2-phenylindole, and with Alexa 488 secondary goat antirabbit IgG and Rhodamine-X goat antimouse IgG. Images are collected with a DeltaVision Restoration Microscopy System at a magnification of ×600. Z stacks (0.2 μm) are collected, and out of focus information is removed by constrained iterative deconvolution. Z stacks are then compressed into to a single image plane.

Studio sugli animali:[1]
  • Modelli animali

    Female BDF1 mice with P388 lymphocytic leukemia cells

  • Dosaggi

    7.5 mg/kg- 30 mg/kg

  • Somministrazione

    Administered via i.p.

Riferimenti

  • http://www.cytokinetics.com/pdf/AACR0906.pdf
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15126370/

Convalida del prodotto da parte del cliente

<p>HeLa cells expressing iRFP were seeded onto 96-well plates and incubated with buffer or different concentrations of SB743921.During the next five days, the plate was scanned with an infrared imaging system (upper panel) to quantify the infrared signals (lower panel).</p>

Dati da [ Mol Oncol , 2014 , 8(8):1404-18 ]

SB743921 inhibits MEK/ERK and AKT signaling in CML cells. Western blot analysis was performed on lysates from KCL22 cells treated with SB743921 (0.5 nM, 1 nM, 3 nM) to examine levels of ERK phosphorylation in comparison to levels of total ERK, and AKT phosphorylation in comparison to levels of total AKT. GAPDH was used as a control to ensure equivalent protein loading.

Dati da [ Leuk Lymphoma , 2014 , 1-8 ]

Sellecks SB743921 HCl È stato citato da 22 Pubblicazioni

Small Cell Lung Carcinoma Cells Depend on KIF11 for Survival [ Int J Mol Sci, 2024, 25(13)7230] PubMed: 39000337
Kinesins regulate the heterogeneity in centrosome clustering after whole-genome duplication [ Life Sci Alliance, 2024, 7(10)e202402670] PubMed: 39074902
Dual inhibition of KIF11 and BCL2L1 induces apoptosis in lung adenocarcinoma cells [ Biochem Biophys Res Commun, 2023, 678:84-89] PubMed: 37619315
Poziotinib for EGFR exon 20-mutant NSCLC: Clinical efficacy, resistance mechanisms, and impact of insertion location on drug sensitivity [ Cancer Cell, 2022, 40(7):754-767.e6] PubMed: 35820397
The therapeutic effect of KSP inhibitors in preclinical models of cholangiocarcinoma [ Cell Death Dis, 2022, 13-9:799] PubMed: 36123339
Kinesin spindle protein inhibitor exacerbates cisplatin-induced hair cell damage [ Arch Biochem Biophys, 2022, 731:109432] PubMed: 36273620
The Global Phosphorylation Landscape of SARS-CoV-2 Infection [ Cell, 2020, 182(3):685-712.e19] PubMed: 32645325
Therapeutic targeting of KSP in preclinical models of high-risk neuroblastoma [ Sci Transl Med, 2020, 12(562)eaba4434] PubMed: 32967973
Mitochondria Redistribution in Enterovirus A71 Infected Cells and Its Effect on Virus Replication [ Virol Sin, 2019, 34(4):397-411] PubMed: 31069716
High kinesin family member 11 expression predicts poor prognosis in patients with clear cell renal cell carcinoma [ J Clin Pathol, 2019, 72(5):354-362] PubMed: 30819726

POLITICA DI RESO
La politica di reso incondizionato di Selleck Chemical garantisce ai nostri clienti unesperienza di acquisto online senza problemi. Se non sei in alcun modo soddisfatto del tuo acquisto, puoi restituire qualsiasi articolo entro 7 giorni dalla ricezione. In caso di problemi di qualità del prodotto, sia relativi al protocollo che al prodotto, puoi restituire qualsiasi articolo entro 365 giorni dalla data di acquisto originale. Si prega di seguire le istruzioni seguenti per la restituzione dei prodotti.

SPEDIZIONE E CONSERVAZIONE
I prodotti Selleck vengono trasportati a temperatura ambiente. Se ricevi il prodotto a temperatura ambiente, ti assicuriamo che il Dipartimento di Ispezione Qualità di Selleck ha condotto esperimenti per verificare che la conservazione a temperatura normale per un mese non influirà sullattività biologica dei prodotti in polvere. Dopo la raccolta, conservare il prodotto secondo le indicazioni descritte nella scheda tecnica. La maggior parte dei prodotti Selleck è stabile nelle condizioni raccomandate.

NON PER USO UMANO, DIAGNOSTICO VETERINARIO O TERAPEUTICO.