Name: MLN4924 (Pevonedistat)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7109
Rating: 5 (148 reviews)

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Controllo Qualità

Lotto: Purezza: 99.99%

99.99

Target correlati	Proteasome E3 Ligase DUB p97 SUMO E2 conjugating
Altro E1 Activating Inibitori	TAK-243 (MLN7243) PYR-41 ML792 TAS4464 DKM 2-93 COH000 NEDD8 inhibitor M22 Pevonedistat hydrochloride PYZD-4409

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro

Linee cellulari	Tipo di saggio	Tempo di incubazione	Descrizione dellattività	PMID
K562	Antiproliferative assay	72 hrs	Antiproliferative activity against human K562 cells after 72 hrs by CellTiter-Glo assay, EC50 = 0.108 μM.	24900352
U2OS	Antitumor assay	72 hrs	Antitumor activity against human U2OS cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 0.16 μM.	28388520
HCT116	Antitumor assay	72 hrs	Antitumor activity against human HCT116 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 0.19 μM.	28388520
Caco2	Function assay	16 hrs	Inhibition of NAE-mediated Ubcl2-NEDD8 conjugation in human Caco2 cells after 16 hrs by Western blot analysis, EC50 = 3.4 μM.	29232579
Caco2	Function assay	16 hrs	Inhibition of NAE-mediated Ubcl2-NEDD8 conjugation in human Caco2 cells after 16 hrs by Western blot analysis, EC50 = 3.4 μM.	29232579
Caco2	Cytotoxicity assay	72 hrs	Cytotoxicity against human Caco2 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 4.4 μM.	29232579
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità

Peso molecolare	443.52	Formula	C₂₁H₂₅N₅O₄S	Conservazione (Dalla data di ricezione)	3 anni-20°Cpolvere
N. CAS	905579-51-3	Scarica SDF		Conservazione delle soluzioni stock	1 anno-80°Cin solvente 1 mese-20°Cin solvente

Solubilità

In vitro
Lotto:

DMSO : 89 mg/mL (200.66 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Ethanol : 22 mg/mL

Water : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa	Concentrazione	Volume	Peso molecolare
=	×	×

Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo Lotto:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5% DMSO 1 30% PEG 300 2 5% Tween 80 3 ddH2O Validato dai laboratori Selleck. Se necessiti di modifiche a questa formulazione, contatta il nostro team di vendita per test personalizzati.	4.000mg/ml (9.02mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 80 mg/ml clarified DMSO stock solution to 300 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL Tween-80 to the above system, mix evenly to clarify it; Then continue to add 600 μL ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante lesperimento)

Dosaggio: mg/kg Peso medio degli animali: g Volume di dosaggio per animale:μL Numero di animali:

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non cè una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH₂O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nellaggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere allaggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno dacqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo dazione

Caratteristiche	A mechanism-based inhibitor of NAE, and creates a covalent NEDD8-MLN4924 adduct catalyzed by the enzyme.
Targets/IC₅₀/Ki	NAE (Cell-free assay) 4 nM
In vitro	Pevonedistat (MLN4924) è strutturalmente correlato all'adenosina 59-monofosfato (AMP) – un prodotto di legame stretto della reazione NAE. Esso (3 μM) inibisce selettivamente la NAE nei lisati cellulari HCT-116 e inibisce il ricambio proteico complessivo di <9% nelle cellule HCT-116. Questo composto provoca una diminuzione dose-dipendente del tioestere Ubc12–NEDD8 e dei coniugati NEDD8–cullin con una IC50 < 0,1 μM nelle cellule HCT-116, con conseguente aumento reciproco dell'abbondanza dei noti substrati CRL CDT1, p27 e NRF2, ma non dei substrati non-CRL. Esso (3 μM) porta le cellule ad accumularsi in fase S già dopo 8 ore e provoca una frazione significativa di cellule contenente DNA 4N entro 24 ore nelle cellule HCT-116. Alla stessa concentrazione, provoca un rapido accumulo di pIkappaBalpha, una diminuzione del contenuto nucleare di p65, una riduzione dell'attività trascrizionale del fattore nucleare-kappaB (NF-kappaB) e un arresto in G(1), portando infine all'induzione dell'apoptosi, eventi coerenti con la potente inibizione del pathway NF-kappaB nelle cellule ABC DLBCL. A 1 μM, innesca la replicazione del DNA e inibisce la proliferazione cellulare stabilizzando il fattore di replicazione del DNA Cdt1, un substrato delle culline 1 e 4. Questa concentrazione, sufficiente a elevare Cdt1 per 4-5 ore, è ritenuta sufficiente per indurre la replicazione del DNA e per attivare i pathway di apoptosi e senescenza. Il trattamento con questo composto induce le caratteristiche dei fenotipi di senescenza come evidenziato dalla morfologia cellulare ingrandita e appiattita e dalla colorazione positiva della β-Gal associata alla senescenza. La senescenza indotta da MLN4924 è associata alla risposta cellulare al danno al DNA, innescata dall'accumulo delle proteine di licenza del DNA CDT1 e ORC1, come risultato dell'inattivazione delle CRL/SCF E3s. È irreversibile e accoppiata con l'accumulo persistente di p21 e l'attivazione sostenuta della risposta al danno al DNA.
Saggio chinasico	Saggi enzimatici in vitro di E1 Activating
Saggio chinasico	Un formato di saggio di trasferimento di energia di fluorescenza risolto nel tempo viene utilizzato per misurare l'attività in vitro di NAE. La reazione enzimatica, contenente 50 μL di 50 mM HEPES, pH 7,5, 0,05% BSA, 5 mM MgCl₂, 20 μM ATP, 250 μM glutatione, 10 nM Ubc12–GST, 75 nM NEDD8–Flag e 0,3 nM di enzima NAE umano ricombinante, viene incubata a 24 ℃ per 90 min in una piastra a 384 pozzetti, prima della terminazione con 25 μL di tampone di arresto/rilevamento (0,1 M HEPES, pH 7,5, 0,05% Tween20, 20 mM EDTA, 410 mM KF, 0,53 nM di anticorpo monoclonale specifico anti-Flag-M2 marcato con Europium-Cryptate e 8,125 μg/mL di anticorpo specifico anti-GST marcato con alloficocianina PHYCOLINK (XL-APC)). Dopo incubazione per 2 ore a 24 ℃, la piastra viene letta sullo strumento LJL Analyst HT Multi-Mode utilizzando un metodo di fluorescenza risolta nel tempo. Un protocollo di saggio simile viene utilizzato per misurare altri enzimi E1.
In vivo	Pevonedistat (MLN4924) (60 mg/kg) provoca una diminuzione dose- e tempo-dipendente dei livelli di NEDD8–cullin già 30 minuti dopo la somministrazione in topi portatori di tumore HCT-116, con un effetto massimo 1–2 ore post-dose. Porta anche a un aumento dose- e tempo-dipendente dei livelli di stato stazionario di NRF2 e CDT1 in topi portatori di tumore HCT-116. Questo composto porta a danni al DNA nel tumore indicati dai maggiori livelli di CHK1 fosforilato in topi portatori di tumore HCT-116. Quando somministrato con un programma BID a 30 mg/kg e 60 mg/kg, inibisce la crescita tumorale con valori T/C di 0,36 e 0,15, rispettivamente, in topi portatori di xenotrapianti HCT-116. Esso (60 mg/kg) blocca i biomarcatori del pathway NAE e provoca una completa inibizione della crescita tumorale in topi portatori di tumori xenotrapiantati umani di ABC- e GCB-DLBCL. Questo composto (60 mg/kg) provoca l'inibizione del pathway NF-kappaB accompagnata da regressioni tumorali in modelli murini di tumori umani primari di ABC-DLBCL.
Riferimenti	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19360080/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20525923/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21159650/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21677879/

Applicazioni

Metodi	Biomarcatori	PMID
Western blot	Culin 3 / CDT2 / CDT1 / SET8 / p21 / p-p53 / p-CHK1 / p-CHK2 / CHK2 / γH2AX / H2AX / PARP / c-PARP Culin 1 / WEE1 / p27 / p-H3 / cyclin B1 Cleaved caspase-3 / Cleaved PARP pro-apoptotic and anti-apoptotic proteins p-c-Jun / c-Jun p-H2A / p-CHK2 p-AKT / p-mTOR / p-70S6K	28838998
Immunofluorescence	RhoB / VE-cadherin / F-actin	29358211
Growth inhibition assay	Cell viability	27333051

Informazioni sullo studio clinico

(dati da https://clinicaltrials.gov, aggiornato il 2024-05-22)

Numero NCT	Reclutamento	Condizioni	Sponsor/Collaboratori	Data di inizio	Fasi
NCT04985656	Withdrawn	Myelodysplastic Syndromes (MDS)	Takeda	October 1 2021	Phase 2
NCT04800627	Terminated	Locally Advanced Malignant Solid Neoplasm\|Metastatic Malignant Solid Neoplasm\|Unresectable Malignant Solid Neoplasm	M.D. Anderson Cancer Center	March 29 2021	Phase 1\|Phase 2
NCT04266795	Active not recruiting	Acute Myeloid Leukemia (AML)	Takeda	October 13 2020	Phase 2
NCT03770260	Completed	Recurrent Multiple Myeloma\|Refractory Multiple Myeloma	National Cancer Institute (NCI)	February 10 2020	Phase 1
NCT04172844	Active not recruiting	Acute Myelogenous Leukemia	Medical College of Wisconsin	January 13 2020	Phase 1

Supporto tecnico

Istruzioni per la manipolazione

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Per qualsiasi altra domanda, si prega di lasciare un messaggio.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

MLN4924 (Pevonedistat) inibitore di NAE

Struttura chimica

Peso molecolare: 443.52