Name: PD0166285
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S8148
Rating: 5 (8 reviews)

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Controllo Qualità

Lotto: S814801 DMSO]100 mg/mL]false]Ethanol]100 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Purezza: 99.59%

Citato in Nature Medicine per la sua qualità superiore
COA
NMR
SDS
Scheda tecnica

99.59

Target correlati	CDK HSP PD-1/PD-L1 ROCK DNA/RNA Synthesis Microtubule Associated Ras KRas Aurora Kinase Casein Kinase
Altro Wee1 Inibitori	Adavosertib (AZD1775, MK-1775) Zedoresertib (Debio-0123, WEE1-IN-5) Azenosertib (Zn-C3) Potrasertib

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro

Linee cellulari	Tipo di saggio	Concentrazione	Tempo di incubazione	Descrizione dellattività	PMID
NIH3T3	Function assay			Inhibition of PDGF-induced autophosphorylation of PDGF-R in NIH3T3 cells, IC50=0.0018μM	9703473
C6	Function assay			Inhibition of PDGF-induced autophosphorylation of PDGF-R in C6 cells, IC50=0.005μM	9703473
MCF-7	Function assay	12 mg/kg		Weight change of MCF-7 tumor cells in mice at 12 mg/kg peroral dose, days 1-15 administration	9703473
C6	Function assay		2 hr	Inhibition of PDGF-stimulated Platelet-derived growth factor receptor autophosphorylation in C6 rat glioma cells after 2 hr, IC50=0.005μM	9784112
RAVSMCs	Function assay		2 hr	Inhibition of PDGF-stimulated Platelet-derived growth factor receptor autophosphorylation in rat aortic vascular smooth muscle cells (RAVSMCs) after 2 hr, IC50=0.0065μM	9784112
SW-620	Function assay			Inhibitory activity against SW-620 human colon adenocarcinoma cells was determined, IC50=0.27μM	10956222
HT-29	Function assay			Inhibitory activity against HT-29 human colon adenocarcinoma cells was determined, IC50=0.28μM	10956222
HCT-8	Function assay			Inhibitory activity against HCT-8 human colon adenocarcinoma cells was determined, IC50=0.42μM	10956222
HEK293	Function assay			Binding affinity to human full-length His-tagged Myt1 kinase expressed in HEK293 cells by TR-FRET based binding assay, IC50=0.0072μM	22770610
MDA-MB-231	Antiproliferative assay		72 hrs	Antiproliferative activity against human MDA-MB-231 cells measured after 72 hrs by CellTiter-Blue assay, IC50=0.16μM	28792760
HEK293T	Antiproliferative assay		72 hrs	Antiproliferative activity against HEK293T cells measured after 72 hrs by CellTiter-Blue assay, IC50=0.29μM	28792760
MM1S	Antiproliferative assay		72 hrs	Antiproliferative activity against human MM1S cells measured after 72 hrs by CellTiter-Blue assay, IC50=0.52μM	28792760
TC32	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for TC32 cells	29435139
DAOY	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells	29435139
SJ-GBM2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells	29435139
A673	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells	29435139
SK-N-MC	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells	29435139
BT-37	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells	29435139
NB-EBc1	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells	29435139
U-2 OS	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for U-2 OS cells	29435139
Saos-2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells	29435139
SK-N-SH	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells	29435139
NB1643	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells	29435139
LAN-5	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells	29435139
BT-12	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells	29435139
Rh18	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh18 cells	29435139
OHS-50	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells	29435139
RD	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells	29435139
MG 63 (6-TG R)	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells	29435139
Rh41	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh41 cells	29435139
NB1643	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for NB1643 cells	29435139
A673	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for A673 cells)	29435139
SK-N-MC	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for SK-N-MC cells	29435139
BT-12	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for BT-12 cells	29435139
DAOY	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for DAOY cells	29435139
NB-EBc1	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for NB-EBc1 cells	29435139
SJ-GBM2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for SJ-GBM2 cells	29435139
BT-37	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for BT-37 cells	29435139
TC32	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for TC32 cells	29435139
MG 63 (6-TG R)	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for MG 63 (6-TG R) cells	29435139
U-2 OS	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for U-2 OS cells	29435139
Rh41	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for Rh41 cells	29435139
RD	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for RD cells	29435139
Rh18	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for Rh18 cells	29435139
Rh30	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for Rh30 cells	29435139
Saos-2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for Saos-2 cells	29435139
OHS-50	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for OHS-50 cells	29435139
SK-N-SH	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for SK-N-SH cells	29435139
HEK293	qHTS assay			Inhibition of human full length PKMYT1 expressed in HEK293 cells using EFS (247 to 259 residues) as substrate after 1 hr by fluorescence polarization immunoasay, Ki=0.0008μM	29941193
HEK293	qHTS assay			Inhibition of human full length PKMYT1 expressed in HEK293 cells using EFS (247 to 259 residues) as substrate after 1 hr by fluorescence polarization immunoasay, IC50=0.008μM	29941193
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità

Peso molecolare	512.43	Formula	C₂₆H₂₇Cl₂N₅O₂	Conservazione (Dalla data di ricezione)	3 anni-20°Cpolvere
N. CAS	185039-89-8	Scarica SDF		Conservazione delle soluzioni stock	1 anno-80°Cin solvente 1 mese-20°Cin solvente
Sinonimi	N/A			Smiles	CCN(CC)CCOC1=CC=C(C=C1)NC2=NC=C3C=C(C(=O)N(C3=N2)C)C4=C(C=CC=C4Cl)Cl

Solubilità

In vitro
Lotto:

DMSO : 100 mg/mL (195.14 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Ethanol : 100 mg/mL

Water : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa	Concentrazione	Volume	Peso molecolare
=	×	×

Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo Lotto:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validato dai laboratori Selleck. Se necessiti di modifiche a questa formulazione, contatta il nostro team di vendita per test personalizzati.	2.500mg/ml (4.88mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 50 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Validato dai laboratori Selleck. Se necessiti di modifiche a questa formulazione, contatta il nostro team di vendita per test personalizzati.	0.500mg/ml (0.98mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 10 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante lesperimento)

Dosaggio: mg/kg Peso medio degli animali: g Volume di dosaggio per animale:μL Numero di animali:

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non cè una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH₂O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nellaggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere allaggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno dacqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo dazione

Targets/IC₅₀/Ki	Wee1 (Cell-free assay) 24 nM Myt1 (Cell-free assay) 72 nM Chk1 (Cell-free assay) 3.4 μM
In vitro	PD0166285 è stato identificato per inibire l'attività di Wee1 a concentrazioni nanomolari. L'inibitore abroga il checkpoint G2/M inducendo una divisione cellulare precoce. A livello cellulare, 0,5 μM di questo composto inibisce drasticamente la fosforilazione di Cdc2 indotta da irradiazione a livello di Tyr-15 e Thr-14 in sette delle sette linee cellulari tumorali testate. Questa abrogazione del checkpoint G2 da parte di questa sostanza chimica è dimostrata per uccidere le cellule tumorali. Non inibisce Cdc2/ciclina B ma inibisce la chinasi Chk1 a una concentrazione molto più alta (3433 nM). Il trattamento delle cellule con l'inibitore è correlato alla stabilizzazione dei microtubuli e alla diminuzione della trascrizione della ciclina D. Pertanto, questo composto potrebbe essere una terapia anti-cancro potenzialmente utile.
Saggio chinasico	Screening di massa Wee1
Saggio chinasico	Lo screening di massa di Wee1 viene eseguito utilizzando il kit SPA della chinasi p34cdc2 di Amersham con alcune modifiche. Brevemente, 45–60 nM di chinasi Wee1 a lunghezza intera viene incubata con 25 μM di questo composto, 20 μM di ATP e 122–441 nM di Cdc2/ciclina B in un volume finale di 50 μl di tampone di diluizione enzimatica [50 mM Tris (pH 8,0), 10 mM NaCl, 10 mM MgCl2, 1 mM DTT e 0,1 mM Na3VO4]. Dopo 30 minuti di incubazione a 30°C, 30 μl di tampone chinasico contenente [33P]ATP [67 mM Tris (pH 8,0), 40 mM NaCl, 13 mM MgCl2, 1 mM DTT e 0,13 mM Na3VO4] contenente 1 μM di peptide biotinilato e 0,25 μCi di [γ-33P]ATP vengono aggiunti alla reazione e incubati per altri 30 minuti a 30°C. La reazione viene interrotta aggiungendo 200 μl di tampone di arresto [50 μM ATP, 5 mM EDTA, 0,1% Triton X-100 e 1,25 mg/ml di perline SPA in PBS]. Dopo centrifugazione a 2400 rpm per 15 minuti, la piastra viene contata con il contatore Microbeta di Wallac.
In vivo	PD0166285 a una concentrazione di 0,5 μM può inibire la fosforilazione di Cdc2Y15/T14 in tutte le linee cellulari testate, indipendentemente dal loro stato p53 e il targeting farmacologico di WEE1 da parte di questo composto sensibilizza i tumori U251-FM GBM all'IR in vivo.
Riferimenti	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11719452/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17177986/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20832752/

Applicazioni

Metodi	Biomarcatori	Immagini	PMID
Western blot	p-Cdc2 / Cdc2 / Wee1 / Cyclin B		17177986
Immunofluorescence	Wee1 / α-tubulin		17177986

Supporto tecnico

Istruzioni per la manipolazione

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Per qualsiasi altra domanda, si prega di lasciare un messaggio.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
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C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

PD0166285 Wee1 inibitore

Struttura chimica

Peso molecolare: 512.43