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AT7867 Akt inhibitor

N. Cat.: S1558

AT7867 is a potent ATP-competitive inhibitor of Akt1/2/3 and p70S6K/PKA with IC50 of 32 nM/17 nM/47 nM and 85 nM/20 nM in cell-free assays, respectively; this compound shows little activity outside the AGC kinase family.
AT7867 Akt inhibitor Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 337.85

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Controllo Qualità (Quality Control)

Lotto: Purezza: 99.97%
99.97

Informazioni chimiche, conservazione e stabilità (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecolare 337.85 Formula

C20H20ClN3

 Conservazione (Dalla data di ricezione)
N. CAS 857531-00-1 Scarica SDF Conservazione delle soluzioni stock

Sinonimi N/A Smiles C1CNCCC1(C2=CC=C(C=C2)C3=CNN=C3)C4=CC=C(C=C4)Cl

Solubilità (Solubility)

In vitro
Lotto:

DMSO : 68 mg/mL (201.27 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Ethanol : 5 mg/mL

Water : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa Concentrazione Volume Peso molecolare
Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo
Lotto:

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante l'esperimento)

mg/kg g μL

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non c'è una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH2O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nell'aggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere all'aggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno d'acqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo d'azione (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
Akt2
(Cell-free assay)
17 nM
PKA
(Cell-free assay)
20 nM
Akt1
(Cell-free assay)
32 nM
Akt3
(Cell-free assay)
47 nM
p70 S6K
(Cell-free assay)
85 nM
RSK1
(Cell-free assay)
>100 nM
In vitro
AT7867 inibisce anche le chinasi AGC strutturalmente correlate p70S6K e PKA con IC50 di 20 nM e 85 nM, rispettivamente. Questo composto mostra attività ATP-competitiva verso Akt2 con Ki di 18 nM. Esibisce antiproliferazione in linee cellulari con mutazioni PTEN o PIK3CA e mostra una grande potenza contro MES-SA, MDA-MB-468, MCF-7, HCT116 e HT29 con IC50 di 0,94 μM, 2,26 μM, 1,86 μM, 1,76 μM e 3,04 μM, rispettivamente. Questa sostanza chimica sopprime anche la crescita cellulare delle cellule U87MG, PC-3 e DU145 con IC50 di 8,22 μM, 10,37 μM e 11,86 μM, rispettivamente. Sopprime l'attività di Akt inibendo la fosforilazione di GSK-3β nelle cellule tumorali umane con IC50 di 2-4 μM. Questo composto induce anche la fosforilazione dei seguenti substrati diretti di Akt inclusi i fattori di trascrizione proapoptotici FKHR (FoxO1a), FKHRL1 (FoxO3a) e il bersaglio a valle S6RP nelle cellule U87MG.
Saggio chinasico
Saggi chinasici in vitro
I saggi chinasici per Akt2, PKA, p70S6K e CDK2/ciclina A sono tutti eseguiti in un formato di legame su filtro radiometrico. Le reazioni del saggio sono allestite in presenza di AT7867. Per Akt2, l'enzima Akt2 e il peptide Aktide-2T da 25 μM (HARKRERTYSFGHHA) vengono incubati in 20 mM MOPS (pH 7.2), 25 mM β-glicerofosfato, 5 mM EDTA, 15 mM MgCl2, 1 mM ortovanadato di sodio, 1 mM DTT, 10 μg/mL di albumina di siero bovino e 30 μM ATP (1.16 Ci/mmol) per 4 ore. Per PKA, l'enzima PKA e il peptide da 50 μM (GRTGRRNSI) vengono incubati in 2 mM MOPS (pH 7.2), 25 mM β-glicerofosfato, 5 mM EDTA, 15 mM MgCl2, 1 mM ortovanadato, 1 mM DTT e 40 μM ATP (0.88 Ci/mmol) per 20 minuti. Per p70S6K, l'enzima p70S6K e il substrato peptidico da 25 μM (AKRRRLSSLRA) vengono incubati in 10 mM MOPS (pH 7), 0.2 mM EDTA, 1 mM MgCl2, 0.01% β-mercaptoetanolo, 0.1 mg/mL di albumina di siero bovino, 0.001% Brij-35, 0.5% glicerolo e 15 μM ATP (2.3 Ci/mmol) per 60 min. Per CDK2, l'enzima CDK2/ciclina A e 0.12 μg/mL di istone H1 vengono incubati in 20 mM MOPS (pH 7.2), 25 mM β-glicerofosfato, 5 mM EDTA, 15 mM MgCl2, 1 mM ortovanadato di sodio, 1 mM DTT, 0.1 mg/mL di albumina di siero bovino e 45 μM ATP (0.78 Ci/mmol) per 4 ore. Le reazioni del saggio vengono interrotte aggiungendo un eccesso di acido ortofosforico, e la miscela di reazione interrotta viene quindi trasferita su piastre filtranti Millipore MAPH e filtrata. Le piastre vengono quindi lavate, viene aggiunto uno scintillante e la radioattività viene misurata tramite conteggio per scintillazione su un Packard TopCount. I valori di IC50 vengono calcolati da curve replicate utilizzando il software GraphPad Prism. Vengono eseguiti saggi enzimatici per Akt1 e Akt3.
In vivo
AT7867 mostra una biodisponibilità del 44% nei topi per via p.o.. Questo composto potrebbe aumentare il PARP clivato in xenotrapianti MES-SA a 20 mg/kg i.p. o 90 mg/kg p.o.. Inibisce significativamente la crescita tumorale in xenotrapianti MES-SA o xenotrapianti U87MG con T/C di 0.37 e 0.51, rispettivamente.
Riferimenti