Name: GSK2334470
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7087
Rating: 5 (29 reviews)

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Controllo Qualità

Lotto: Purezza: 99.96%

99.96

Target correlati	PI3K Akt mTOR GSK-3 ATM/ATR DNA-PK AMPK PTEN PP2A PDK
Altro PDPK1 Inibitori	OSU-03012 (AR-12) PS-48 BX517 Indoprofen PS210 PS47

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro

Linee cellulari	Tipo di saggio	Descrizione dellattività	PMID
PC3 cells	Function assay	Inhibition of PDK1-mediated AKT phosphorylation at Thr308 residue in human PC3 cells by ELISA, IC50=0.113 μM	21341675
PC3 cells	Function assay	Inhibition of PDK1-mediated RSK phosphorylation at Ser221 residue in human PC3 cells by ELISA, IC50=0.293 μM	21341675
K562 cells	Proliferation assay	Antiproliferative activity against human K562 cells, IC50=18 μM	21341675
OCI-AML2 cells	Proliferation assay	Antiproliferative activity against human OCI-AML2 cells, IC50=0.35 μM	21341675
OCI-AML3 cells	Proliferation assay	Antiproliferative activity against human OCI-AML3 cells, IC50=0.52 μM	21341675
F-36P cells	Proliferation assay	Antiproliferative activity against human F-36P cells, IC50=0.28 μM	21341675
insect cells	Function assay	Inhibition of recombinant full length PDK1 (unknown origin) expressed in insect cells assessed as inhibition of Akt activation measured for 30 mins in presence of [gamma32P-ATP], IC50=0.01 μM	23448267
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità

Peso molecolare	462.59	Formula	C₂₅H₃₄N₈O	Conservazione (Dalla data di ricezione)	3 anni-20°Cpolvere
N. CAS	1227911-45-6	Scarica SDF		Conservazione delle soluzioni stock	1 anno-80°Cin solvente 1 mese-20°Cin solvente
Sinonimi	N/A			Smiles	CC1CCC(CN1C2=NC(=NC(=C2)C3=CC4=C(C=C3)C(=NN4)N)NC)C(=O)NC5CCCCC5

Solubilità

In vitro
Lotto:

DMSO : 93 mg/mL (201.04 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Ethanol : 93 mg/mL

Water : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa	Concentrazione	Volume	Peso molecolare
=	×	×

Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo Lotto:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validato dai laboratori Selleck. Se necessiti di modifiche a questa formulazione, contatta il nostro team di vendita per test personalizzati.	4.650mg/ml (10.05mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 93 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante lesperimento)

Dosaggio: mg/kg Peso medio degli animali: g Volume di dosaggio per animale:μL Numero di animali:

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non cè una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH₂O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nellaggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere allaggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno dacqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo dazione

Targets/IC₅₀/Ki	PDPK1 (Cell-free assay) 10 nM
In vitro	GSK2334470 inibisce PDK1 dall'attivare Akt1 a lunghezza intera in presenza di vescicole lipidiche contenenti PtdIns(3,4,5)P₃ o un mutante di Akt1 privo del dominio PH (ΔPH-Akt1) con IC50 di ~10 nM. Questo composto inibisce anche in modo simile PDK1 dal fosforilare il substrato peptidico PDKtide con IC50 di ~10 nM. Esso (0,1 μM–0,3 μM) induce una significativa inibizione dose-dipendente di NDRG1 endogeno con oltre il 50% di riduzione della fosforilazione nelle cellule HEK-293. Questa sostanza chimica (30 nM) induce una significativa inibizione dose-dipendente della fosforilazione del T-loop di ciascuna isoforma di SGK nelle cellule HEK-293. Esso (1 μM) inibisce la fosforilazione del motivo idrofobico di S6K1 in misura simile alla fosforilazione del T-loop nelle cellule HEK-293. Questo composto (3 μM) sopprime anche l'attività e la fosforilazione di S6K1 indotte dalla stimolazione con IGF1 di cellule HEK-293 private di siero. Esso (3 μM) inibisce marcatamente la fosforilazione di diversi substrati di Akt [FoxO (forkhead box O), GSK3 e PRAS40]. Questa sostanza chimica (3 μM) induce anche un'inibizione quasi massima dell'attività e della fosforilazione di Akt1 entro 5 minuti, e la fosforilazione del substrato di Akt (FoxO, GSK3 e PRAS40) viene inibita in un momento leggermente successivo (10 minuti). Esso (0,3 μM) inibisce significativamente la fosforilazione di Akt o PRAS40/GSK3 nelle cellule ES knock-in PDK1K^465E/K465E ma non nelle cellule ES wild-type. Questo composto (1 μM) sopprime efficacemente l'attività di SGK1, come giudicato dall'inibizione della fosforilazione di NDRG1 nelle cellule di glioblastoma U87. Esso (1 μM) sopprime anche potentemente l'attivazione di S6K1 (Figura 7B) così come di SGK1 nelle cellule MEF (fibroblasti embrionali di topo). Questa sostanza chimica (0,1 μM) induce ~50% di inibizione dell'attività di RSK2 nelle cellule HEK-293. Esso (30 μM) sopprime la forza Ca²⁺-sensibilizzata indotta da U46619 nel muscolo liscio dell'arteria polmonare di coniglio permeabilizzato con α-tossina. Questo composto (30 μM) determina una significativa diminuzione della forza contrattile in risposta a [Ca²⁺]. Esso (1 μM) porta alla totale abrogazione dell'aumento intracellulare di calcio indotto da EGF e all'accumulo di fosfati di inositolo nelle cellule MDA-MB-231. Questa sostanza chimica (1 μM) inibisce la fosforilazione di PLCγ1 Tyr783 nelle cellule MDA-MB-231.
Saggio chinasico	Saggi di attività chinasica
Saggio chinasico	Akt, S6K e RSK endogeni vengono immunoprecipitati da 0,1 mg a 1 mg di lisato cellulare per 2 ore a 4 °C su una piattaforma vibrante utilizzando 3 μg–5 μg degli anticorpi indicati. Per i saggi di attività SGK, 150 μg di lisato trasfettato vengono incubati con 5 μg di glutatione–Sepharose per 3 ore a 4 °C. Gli immunoprecipitati vengono lavati due volte con tampone di lisi contenente 0,5 mM NaCl, seguiti da due lavaggi con tampone di chinasi. Le reazioni di chinasi vengono avviate con una miscela di reazione per portare le concentrazioni finali dei componenti della reazione a 0,1 mM [γ-³²P]ATP (~200 c.p.m./pmol), 5 mM di acetato di magnesio, 0,1% di 2-mercaptoetanolo e 30 mM di peptide Crosstide (GRPRTSSFAEGKK). Le reazioni vengono condotte per 20 minuti a 30 °C su una piattaforma vibrante e interrotte applicando le reazioni su carta fosfocellulosa P81. La conta Cerenkov viene eseguita dopo aver lavato le carte in acido fosforico, risciacquato in acetone e asciugato all'aria. Un'unità di attività è definita come quella che ha catalizzato l'incorporazione di 1 nmol di [³²P]fosfato nel substrato in 1 ora.
In vivo	Questo composto è un inibitore altamente specifico e potente di PDK1.
Riferimenti	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21087210/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23516539/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22454520/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24037523/

Applicazioni

Metodi	Biomarcatori	Immagini	PMID
Western blot	p-Myc / Myc / p-p70 / p70 pRb / pPDK1 / pAKT / pRSK2 / p70S6K / pPRAS40 / pS6		25762617
Immunofluorescence	KDM4A / Pol-I		26729372

Supporto tecnico

Istruzioni per la manipolazione

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Per qualsiasi altra domanda, si prega di lasciare un messaggio.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

GSK2334470 PDPK1 inibitore

Struttura chimica

Peso molecolare: 462.59