Cetuximab (anti-EGFR)

Il trattamento con Cetuximab aumenta il priming mitocondriale delle cellule HeLa che esprimono EGFR ma non nelle cellule MDA-MD-231 che esprimono EGFR.[2]

Le cellule sono state lisate a una densità di 1 x 10⁶/50 μL in tampone di lisi (0,25 M Tris-HCl, 2% sodio dodecil solfato, 4% β-mercaptoetanolo, 10% glicerolo, 0,02% blu di bromofenolo) supplementato con 1 X cocktail di inibitori di proteasi/fosfatasi. I lisati cellulari sono stati quindi caricati su gel di poliacrilammide con sodio dodecil solfato. Dopo l'elettroforesi, le proteine sono state trasferite su membrane di polivinilidene difluoruro (PVDF). Le membrane transblottate sono state bloccate per 1 ora e poi sondate con anticorpi primari appropriati durante la notte a 4 ℃. Il giorno successivo, le membrane sono state lavate tre volte per un totale di 30 minuti e poi incubate con IRDye 680RD Donkey anti-Rabbit IgG (H + L) o IRDye 800CW Donkey anti-Mouse IgG (H + L) al buio a temperatura ambiente per 1 ora. Dopo altri tre lavaggi, le membrane di immunoblot sono state scansionate e l'intensità delle bande è stata quantificata.

C225 ha potenziato l'attività antitumorale di diversi farmaci chemioterapici in modelli di xenotrapianto murini[1]. Cetuximab esercita la sua efficacia antitumorale attraverso molteplici meccanismi che includono l'inibizione della progressione del ciclo cellulare per arresto in fase G1 e una diminuzione del numero di cellule in fase S. L'arresto del ciclo cellulare in fase G1 induce anche l'apoptosi attraverso l'induzione e l'attivazione di molecole pro-apoptotiche. Cetuximab da solo e in sinergia con il carboplatino ha portato a una diminuzione delle dimensioni del tumore, della diffusione metastatica e della MVD nei tumori NCI-N87 con espressione di EGFR sulla superficie cellulare e assenza di mutazioni in BRAF e K-ras, mentre Cetuximab ha avuto un effetto in vitro minimo e nessuna efficacia terapeutica in vivo nei tumori derivati da MKN-45, in cui il fenotipo era anche BRAF e K-ras wildtype, ma che avevano solo una debole espressione della proteina EGFR citoplasmatica[3].

Obiettivo: Attività antitumorale di Cetuximab nel modello murino di cancro gastrico
Modelli animali: Modello di topo nudo per il cancro gastrico umano (topi CD-1/nu-nu)
Formulazione: 0,9% NaCl
Dosaggi: 1 mg/kg
Somministrazione: i.p.
Riferimento: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22011788

Obiettivo: Investigare la relazione tra i livelli di EGFR e la responsività al trattamento con Cetuximab nei modelli di xenotrapianto di cancro umano
Modelli animali: Topi nudi atimici femmine sono stati impiantati s.c. con frammenti tumorali di ~1 mm3
Formulazione: PBS
Dosaggi: 0,25, 0,5 o 1 mg/topo
Somministrazione: i.p.
Riferimento: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27186886

Cetuximab può essere applicato a topi nudi, varie linee cellulari tumorali e altri saggi correlati (Solo per riferimento)