Name: GSK343
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7164
Rating: 5 (60 reviews)

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.95%

99.95

Gerelateerde doelwitten	HDAC JAK BET Histone Methyltransferase PKC PARP HIF PRMT AMPK Histone Acetyltransferase
Overige EZH2 Inhibitoren	PF-06821497 GSK126 Tulmimetostat (CPI-0209) Valemetostat (DS-3201) Lirametostat (CPI-1205) EBI-2511 EZH2/HSP90-IN-29 SHR2554

Celkweek, behandeling & werkconcentratie

Cellijnen	Assaytype	Concentratie	Incubatietijd	Formulering	Activiteitsbeschrijving	PMID
2D10	Function Assay	0.25-2.0 μM	96 h		reduces total cellular trimethylated H3K27 in a time- and dose-dependent manner	26041287
MDA-MB-231	Growth Inhibition Assay	0-20 μM	72 h		shows cytotoxicity in a dose-dependent manner	25203626
MDA-MB-231	Function Assay	10 μM	72 h		reduces the level of H3K27-me3	25203626
MDA-MB-231	Function Assay	10 μM	72 h		induces LC3-II accumulation	25203626
MDA-MB-231	Function Assay	10 μM	24 h		induces autophagy	25203626
HepG2	Growth Inhibition Assay	0-20 μM	72 h		shows cytotoxicity in a dose-dependent manner	25203626
A549	Growth Inhibition Assay	0-20 μM	72 h		shows cytotoxicity in a dose-dependent manner	25203626
HepG2	Function Assay	10 μM	24 h		induces autophagy	25203626
A549	Function Assay	10 μM	24 h		induces autophagy	25203626
OVCAR10	Growth Inhibition Assay	1 μM	0-12 d	DMSO	inhibits cell growth time dependently	23759589
UPN289	Growth Inhibition Assay	1 μM	0-12 d	DMSO	inhibits cell growth time dependently	23759589
SKOV3	Growth Inhibition Assay	1 μM	0-12 d	DMSO	inhibits cell growth time dependently	23759589
SKOV3	Apoptosis Assay	1 μM	4 d	DMSO	induces apoptosis cultured in 3D conditions	23759589
HCC1806	Function assay		72 hrs		Inhibition of EZH2-mediated nuclear H3K27 methylation in human HCC1806 cells after 72 hrs by immunofluorescence analysis, IC50 = 0.174 μM.	24900432
LNCaP	Function assay		6 days		Inhibition of EZH2-mediated proliferation of human LNCaP cells after 6 days by chemiluminescence analysis, IC50 = 2.9 μM.	24900432
DU145	Function assay		6 days		Inhibition of EZH2-mediated proliferation of human DU145 cells after 6 days by chemiluminescence analysis	24900432
SKBR3	Function assay		6 days		Inhibition of EZH2-mediated proliferation of human SKBR3 cells after 6 days by chemiluminescence analysis	24900432
PC3	Function assay		6 days		Inhibition of EZH2-mediated proliferation of human PC3 cells after 6 days by chemiluminescence analysis	24900432
ZR-75-1	Function assay		6 days		Inhibition of EZH2-mediated proliferation of human ZR-75-1 cells after 6 days by chemiluminescence analysis	24900432
HCC180	Function assay		6 days		Inhibition of EZH2-mediated proliferation of human HCC180 cells after 6 days by chemiluminescence analysis	24900432
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht	541.69	Formule	C₃₁H₃₉N₇O₂	Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	1346704-33-3	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	N/A			Smiles	CCCC1=C(C(=O)NC(=C1)C)CNC(=O)C2=C3C=NN(C3=CC(=C2)C4=CC(=NC=C4)N5CCN(CC5)C)C(C)C

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

Ethanol : 4 mg/mL

DMSO : 1 mg/mL (1.84 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Moleculair gewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	5.000mg/ml (9.23mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL Tween80 to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 500 μL ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% corn oil Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	0.500mg/ml (0.92mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 10 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH₂O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Kenmerken	A chemical probe for the SGC epigenetics initiative. Potential use in a variety of solid tumors.
Targets/IC₅₀/Ki	EZH2 (Cell-free assay) 4 nM EZH1 (Cell-free assay) 240 nM
In vitro	GSK343 remt trimethylering van H3K27 (H3K27me3) met een IC50 van 174 nM in HCC1806 borstkankercellen. Deze verbinding remt krachtig celproliferatie in borstkankercellen en prostaatkankercellen, waarbij de prostaatkankercellijn LNCaP het meest gevoelig is, met een IC50 van 2,9 μM. Deze chemische stof onderdrukt significant de groei van EOC-cellen gekweekt in 3D matrigel extracellulaire matrix (ECM), die het tumormicroklimaat in vivo nabootst. Bovendien induceert het ook apoptose van EOC-cellen in 3D en remt het significant de invasie van EOC-cellen.
Kinase Assay	In vitro biochemische assays tegen Histone Methyltransferases
Kinase Assay	Activiteit tegen EZH2 wordt beoordeeld met behulp van het 5-ledige PRC2-complex (Flag-EZH2, EED, SUZ12, AEBP2, RbAp48). Het assayprotocol kan als volgt worden samengevat: 10 mM stamoplossingen van verbindingen worden bereid uit vaste stof in 100% DMSO. Een 11-punts seriële verdunningsmasterplaat wordt bereid in een 384-wells formaat (1:3 verdunning, kolommen 6 en 18 waren gelijke volumes DMSO-controles) en gedispenseerd naar assay-ready platen met behulp van akoestische dispensing-technologie om een 100 nL stempel van verbinding en DMSO-controles te creëren. De assaytoevoegingen bestonden uit gelijke volumetoevoegingen van 10 nM EZH2 en de substraatoplossing (5 µg/mL HeLa nucleosomen en 0,25 µM [³H]-SAM) gedispenseerd in assayplaten met behulp van een multi-drop combi dispenser. Reactieplaten worden gedurende 1 uur geïncubeerd en geblust met een gelijke volumetoevoeging van 0,5 mg/mL PS-PEI Imaging Beads (RPNQ0098) die 0,1 mM ongelabelde SAM bevatten. De platen worden verzegeld, 30 minuten in het donker geadapteerd en een 5 minuten durende eindpuntluminescentiebeeld wordt verkregen met behulp van een Viewlux imager. Plaatstatistieken zoals Z’ en signaal-ruisverhouding, evenals dosis-responscurves, worden geanalyseerd met behulp van Activity BaseXE. De in vitro biochemische activiteit van EZH1 wordt beoordeeld als onderdeel van een 5-ledig PRC2-complex met behulp van een 384-wells SPA-assay die identiek is aan EZH2. Buffercomponenten, reagensdispensing, compoundplaatbereiding, quench-condities en data-analyse zijn identiek voor EZH1 en EZH2 met uiteindelijke assayconcentraties van 20 nM EZH1, 5 µM/mL HeLa nucleosomen en 0,25 µM [³H]-SAM. Verdere data-analyse, pIC50-pivots en visualisaties worden mogelijk gemaakt door TIBCO Spotfire. Deze verbinding wordt geprofileerd bij Reaction Biology Corp. (Malvern, PA) om de remming in hun panel van Histone Methyltransferase-assays te beoordelen. Methyltransferase-activiteit wordt beoordeeld met behulp van HotSpot-technologie, een geminiaturiseerde radio-isotoop-gebaseerde filterbindingstest. Remmers worden opgelost in dimethylsulfoxide (DMSO) en getest bij concentraties tot 100 uM met een uiteindelijke DMSO-concentratie van 2%. Buffer met de methyltransferase in de vermelde concentratie en het voorkeurssubstraat, zoals weergegeven in de begeleidende tabel, wordt 10 minuten met deze chemische stof voorgeïncubeerd. Reacties worden geïnitieerd door de toevoeging van 1 uM S-adenosyl-L-[methyl-³H]methionine (SAM), gedurende 60 minuten geïncubeerd bij 30C, gevolgd door overdracht naar P81-filterpapier en PBS-wassing vóór detectie.
In vivo	GSK343, een selectieve EZH2-remmer, remt fagocytose.
Referenties	[1] http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/ml3003346 [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23759589/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35265199/

Toepassingen

Methoden	Biomarkers	PMID
Western blot	H3K27me3 EZH2 / EED / SUZ12 N-cadherin / Vimentin / Snail / Slug / MMP2 / MMP9	29228694
Immunofluorescence	N-cadherin / H3K27me3 / Vimentin	29228694
Growth inhibition assay	Cell viability	26973856