Calcola la diluizione necessaria per preparare una soluzione stock.
Il calcolatore di diluizione di Selleck si basa sulla seguente equazione:
Concentrazione (iniziale) x Volume (iniziale) = Concentrazione (finale) x Volume (finale)
Questa equazione è comunemente abbreviata come: C1V1 = C2V2 ( )
Quando si preparano soluzioni stock, utilizzare sempre il peso molecolare specifico del lotto del prodotto riportato sull'etichetta del flacone e sulla MSDS / COA (disponibile online).
L'equazione del calcolatore di diluizione seriale
L'equazione di diluizione (C1V1 = C2V2)
Il calcolatore di diluizione di Selleckchem si basa sulla legge di conservazione della massa, che afferma che la quantità di soluto rimane costante durante la diluizione.
La formula:
C1V1 = C2V2
Dove:
C1 (Concentrazione iniziale): La concentrazione della soluzione stock (es. l'inibitore ad alta concentrazione nel congelatore).
V1 (Volume iniziale): Il volume di soluzione stock che è necessario prelevare.
(Questo è solitamente il valore che si intende calcolare).
C2 (Concentrazione finale): La concentrazione desiderata della soluzione di lavoro.
V2 (Volume finale): Il volume totale della soluzione di lavoro che si desidera preparare.
Esempio di scenario:
Si dispone di uno stock da 10 mM di un inibitore di chinasi (Stock C1) ed è necessario preparare 10 mL di una soluzione di lavoro da 50 μM per un esperimento di coltura cellulare.
Guida alle diluizioni seriali
Cos'è la diluizione seriale?
La diluizione seriale è la diluizione graduale di una sostanza in una soluzione.
È comunemente usata nei saggi biochimici per creare curve dose-risposta per determinare i valori di IC50 (concentrazione inibitoria massima media) o EC50.
Come utilizzare il calcolatore di diluizione seriale di Selleckchem:
Questo strumento genera automaticamente una tabella di concentrazione e calcola i valori logaritmici necessari per i software di grafica (come GraphPad Prism).
Concentrazione (iniziale) [C0]: Inserire la concentrazione più alta che verrà testata (es. 10 μM).
Fattori di diluizione [X]: Inserire il fattore di diluizione per ogni passaggio.
Inserire "10" per una diluizione di 10 volte (1:10).
Inserire "3" per una diluizione di 3 volte (1:3).
Capire il risultato:
Il calcolatore utilizza la formula ricorsiva:
Cn = Cn-1/X
Cn: La concentrazione del passaggio corrente.
Log(Cn): Il logaritmo in base 10 della concentrazione.
Perché forniamo questo valore? La maggior parte dei software statistici richiede che l'asse X (concentrazione) sia trasformato in logaritmo per tracciare una curva dose-risposta sigmoidale.
Esempio pratico:
Se si inizia con 100 μM (C0) e si esegue una diluizione seriale di 10 volte (X=10):
Passaggio 1 (C1): 100 / 10 = 10 μM
Passaggio 2
(C2): 10 / 10 = 1 μM
Passaggio 3 (C3): 1 / 10 = 0.1 μM ...e così via.
Suggerimenti per risultati sperimentali ottimali
Controllare la solubilità: Prima di diluire, assicurarsi che il composto sia completamente solubile nel solvente vettore (solitamente DMSO, etanolo o acqua).
Controllare i dati di solubilità sulla pagina del prodotto Selleckchem.
Evitare la precipitazione ("Crashing Out"): Quando si diluisce uno stock di DMSO ad alta concentrazione in un tampone acquoso (come PBS o terreno di coltura), aggiungere lo stock lentamente sotto agitazione vortex.
Un'aggiunta rapida può causare la precipitazione dei composti idrofobici fuori dalla soluzione.
Diluizioni intermedie: Per fattori di diluizione molto grandi (es. 1:10.000), non diluire in un unico passaggio.
Eseguire diluizioni seriali (es. due passaggi 1:100) per garantire la precisione.
Vedi anche:
Calcolatore di molarità : Determinare la massa necessaria per creare la soluzione stock iniziale.
