Name: EPZ004777
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7353
Rating: 5 (32 reviews)

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.09%

99.09

Gerelateerde doelwitten	HDAC JAK BET PKC PARP HIF PRMT EZH2 AMPK Histone Acetyltransferase
Overige Histone Methyltransferase Inhibitoren	Pinometostat (EPZ5676) 3-Deazaneplanocin A (DZNep) Hydrochloride BIX-01294 trihydrochloride UNC1999 EPZ015666 (GSK3235025) MM-102 (HMTase Inhibitor IX) Chaetocin SGC 0946 EPZ005687 UNC0638

Celkweek, behandeling & werkconcentratie

Cellijnen	Assaytype	Incubatietijd	Activiteitsbeschrijving	PMID
MOLM13	Antiproliferative assay		Antiproliferative activity against human MOLM13 cells containing MLL-AF9, EC50=0.004μM.	23879463
MV4-11	Antiproliferative assay		Antiproliferative activity against human MV4-11 cells containing MLL-AF4, EC50=0.004μM.	23879463
THP1	Antiproliferative assay		Antiproliferative activity against human THP1 cells containing MLL-AF9, EC50=0.004μM.	23879463
MCF10A	Function assay		Inhibition of DOT1L in human MCF10A cells assessed as reduction of H3K79 level, IC50=0.084μM.	25406853
MLL	Function assay		Inhibition of Meis1 gene expression in human MLL cells, EC50=0.7μM.	23879463
MLL	Function assay		Inhibition of Hoxa9 gene expression in human MLL cells, EC50=0.7μM.	23879463
Sf9	Function assay		Inhibition of human full length PRMT7 expressed in Sf9 cells, IC50=7.5μM.	25893041
BHK	Antiviral assay	8 days	Antiviral activity against Zika virus SMGC infected in BHK cells assessed as inhibition of virus induced cytopathic effect after 8 days by CellTiter-Glo luminescent cell viability assay, IC50=35.19μM.	30170321
MV4-11	Function assay	6 days	Inhibition of DOT1L in human MV4-11 cells assessed as downregulation of HOXA9/MEIS1 mRNA expression after 6 days by real-time PCR analysis, IC50=0.7μM.	ChEMBL
MOLM13	Function assay	6 days	Inhibition of DOT1L in human MOLM13 cells assessed as downregulation of HOXA9/MEIS1 mRNA expression after 6 days by real-time PCR analysis, IC50=0.7μM.	ChEMBL
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht	539.67	Formule	C₂₈H₄₁N₇O₄	Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	1338466-77-5	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	N/A			Smiles	CC(C)N(CCCNC(=O)NC1=CC=C(C=C1)C(C)(C)C)CC2C(C(C(O2)N3C=CC4=C(N=CN=C43)N)O)O

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 100 mg/mL (185.29 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 100 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Moleculair gewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 Corn oil Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	5.000mg/ml (9.26mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	5.000mg/ml (9.26mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to make it clear; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH₂O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC₅₀/Ki	DOT1L (Cell-free assay) 0.4 nM
In vitro	EPZ004777 remt selectief cellulaire H3K79-methylering en remt de expressie van belangrijke MLL-fusie-doelgenen. Na DOT1L-remming remt deze verbinding selectief de proliferatie van MLL-herschikte cellijnen en MLL-AF9-getransformeerde murine hematopoëtische cellen. Bovendien induceert het ook differentiatie en apoptose in MLL-herschikte cellen. Deze chemische stof remt selectief de proliferatie van MLL–AF10 en CALM–AF10-getransformeerde murine beenmergcellen. DOT1L-remming door dit middel resulteert in een significant verminderde proliferatie, verminderde expressie van MLL-AF6-doelgenen en celcyclusarrestatie van MLL-AF6-getransformeerde cellen.
Kinase Assay	Bepaling van de IC50-waarden van de remmer
Kinase Assay	EPZ004777 wordt 3-voudig verdund in DMSO voor een totaal van tien concentraties, beginnend bij 1 mM. Een aliquot van 1 μL van elke remmerverdunning wordt geplaatst in een 384-wells microtiterplaat. De 100% remmingscontrole bestond uit 2,5 mM eindconcentratie van de productremmer S-adenosyl-L-homocysteïne (SAH). Deze verbinding wordt 30 min geïncubeerd met 40 ml per putje van 0,25 nM DOT1L(1-416) in assaybuffer (20 mM TRIS [pH 8.0] 10 mM NaCl, 0,002% Tween 20, 0,005% runderhuidgelatine, 100 mM KCl en 0,5 mM DTT). 10 ml per putje substraatmengsel bestaande uit assaybuffer met 200 nM ³H-SAM (American Radiolabeled Chemicals: 80 Ci/mmol), 600 nM ongelabeld SAM en 20 nM nucleosomen worden toegevoegd om de reactie te initiëren (beide substraten zijn aanwezig in het uiteindelijke reactiemengsel bij hun respectieve KM-waarden). Reacties worden 120 min geïncubeerd en geblust met 10 ml per putje van 800 mM SAM. De incorporatie van radioactiviteit in nucleosoomsubstraat wordt gemeten in een flashplate. IC50-waarden voor enzymen in het Histone Methyltransferase-paneel worden bepaald onder vergelijkbare gebalanceerde assaycondities met zowel SAM als eiwit/peptide substraat aanwezig in concentraties gelijk aan hun respectieve KM-waarden.
In vivo	EPZ004777 produceert een krachtige antitumorale werkzaamheid en verhoogt significant de mediane overleving in een muisxenograftmodel van MLL-leukemie.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21741596/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23138183/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23361907/

Toepassingen

Methoden	Biomarkers	Afbeeldingen	PMID
Western blot	H3K79me2 H3K79me1 / H3K4me3 / H3K9me3 / H3R17me2a / H3K27me2 / H3K27me3 / H3K36me2 / H4R3me2s / H4K20me2		23138183
Growth inhibition assay	Cell viability		25596271