Home Cytoskeletal Signaling HSP remmer Zelavespib (PU-H71)

uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

Zelavespib (PU-H71) HSP remmer

Cat.Nr.S8039

Zelavespib (PU-H71, NSC 750424) is een potente en selectieve remmer van HSP90 met een IC50 van 51 nM. Deze verbinding bevindt zich in fase 1.
Zelavespib (PU-H71) HSP remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 512.37

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.03%
99.03

Celkweek, behandeling & werkconcentratie

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
MDA-MB-468 cells Function assay Inhibitory activity against Hsp90 in human breast cancer MDA-MB-468 cell line, EC50=0.0102 μM
SKBr3 cells Growth inhibition assay Growth inhibition in human breast cancer SKBr3 cell line using SRB, IC50=0.05 μM
MCF7 cells Function assay 24 h Inhibition of Hsp90 in human MCF7 cells assessed as Her2 level after 24 hrs by Western blot, IC50=0.06 μM
MRC5 cells Cytotoxicity assay Cytotoxicity against normal lung fibroblast MRC5 cell line, IC50=1 μM
NCI-H1299 cells Function assay 12 h Reduction in oxygen consumption rate in human NCI-H1299 cells incubated for 12 hrs
NCI-H69 cells Function assay 24 h Binding affinity to HSP90 in human NCI-H69 cells after 24 hrs by fluorescence polarization assay
NCI-N417 cells Function assay 24 h Binding affinity to HSP90 in human NCI-N417 cells after 24 hrs by fluorescence polarization assay
NCI-H187 cells Function assay 24 h Binding affinity to HSP90 in human NCI-H187 cells after 24 hrs by fluorescence polarization assay
NCI-H510 cells Function assay 24 h Binding affinity to HSP90 in human NCI-H510 cells after 24 hrs by fluorescence polarization assay
SKBR3 cells Function assay 24 h Binding affinity to HSP90 in human SKBR3 cells after 24 hrs by fluorescence polarization assay
NCI-H526 cells Function assay 1 μM 24 h Binding affinity to HSP90 in human NCI-H526 cells at 1 uM after 24 hrs by fluorescence polarization assay
H69AR cells Function assay 96 h Inhibition of HSP90-mediated antiapoptotic activity in human H69AR cells assessed as induction of cell growth arrest at 10 after 96 hrs by propidium iodide staining-based flow cytometry
NCI-H526 cells Function assay 24 h Binding affinity to HSP90 in human NCI-H526 cells after 24 hrs by fluorescence polarization assay
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht 512.37 Formule

C18 H21 I N6 O2 S

 Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)
CAS-nr. 873436-91-0 -- Opslag van stamoplossingen

Synoniemen NSC 750424 Smiles CC(C)NCCCN1C2=NC=NC(=C2N=C1SC3=C(C=C4C(=C3)OCO4)I)N

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 100 mg/mL (195.17 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 100 mg/mL

Water : 34 mg/mL

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Kenmerken
Purine-based, HSP90-selective inhibitor.
Targets/IC50/Ki
HSP90
51 nM
In vitro
Zelavespib (PU-H71) (1 µM) onderdrukt potent de groei van triple-negatieve borstkankercellijnen (TNBC) MDA-MB-468, MDA-MB-231 en HCC-1806 met respectievelijk IC50 van 65, 140 en 87 nM. Het doodt respectievelijk 80%, 65% en 80% van de initiële populatie van MDA-MB-468, MDA-MB-231 en HCC-1806 cellen. Deze verbinding (0,25-1 µM) induceert een dosisafhankelijke afbraak of inactivatie van tumorsturende moleculen, waaronder EGFR, IGF1R, HER3, c-Kit, Raf-1 en Akt. Behandeling gedurende 24 uur met 1 µM PU-H71 vergroot het percentage cellen in de G2-M-fase van MDA-MB-468 tot 69%, gemedieerd door een reductie in CDK1- en Chk1-expressie. Het induceert apoptose in TNBC, deels door inactivatie en downregulatie van Akt en Bcl-xL. Het leidt tot een proteasoom-gemedieerde reductie in IRAK-1 en TBK1-niveaus, wat resulteert in een reductie van respectievelijk ongeveer 84% en 90% in NF-κB-activiteit in MDA-MB-231-cellen behandeld met respectievelijk 0,5 en 1 µM PU-H71. Het remt de invasie van MDA-MB-231-cellen aanzienlijk, met een onderdrukking van 90% bij 1 µM. Bij 2,5 µM genereert het endoplasmatisch reticulum (ER) stress en activeert het de Unfolded Protein Response (UPR), zoals blijkt uit XBP1 mRNA-splitsing (2,3-voudig) en upregulatie van Grp94 (3,7-voudig), Grp78 (4,9-voudig) en CHOP (48-voudig) eiwitexpressie en ATF4 (1,8-voudig) mRNA-expressie. Bij 1 µM induceert het de mitochondriale apoptoseroute in HeLa-cellen, gemedieerd door caspase, maar niet door calpaïne-activering. Als reactie op PU-H71-geïnduceerde ER-stress wordt apoptose geactiveerd in melanoom-, cervix-, colon-, lever- en longkankercellen, maar niet in normale menselijke fibroblasten. Het is in staat apoptose te induceren door de resistentie van Bcl-2 te overwinnen. Bij 30 nM vermindert het de NOS2-activiteit (60% reductie) en -expressie in LI (1 µg/mL LPS en 5 ng/mL IFN γ)-gestimuleerde astrocyten significant door NF-κB-elementactivering te remmen. Het vertoont vergelijkbare effecten op microglia-cellen als op astrocyten, waarbij 50 nM PU-H71 nodig is om de LPS-afhankelijke nitrietafgifte significant te verminderen.
Kinase Assay
HSP90 bindingsassay
Metingen worden uitgevoerd in zwarte 96-well microtiterplaten. Cellysaten worden bereid door celmembranen te scheuren door bevriezing bij -70°C en het cellulaire extract op te lossen in HFB [20 mM Hepes (K), pH 7.3, 50 mM KCl, 5 mM MgCl2, 20 mM Na2MoO4, 0,01% Nonidet P-40] met toegevoegde protease- en fosfataseremmers. Verzadigingscurven worden geregistreerd waarbij fluorescent gelabelde geldanamycine (Cy3B-GM) (3 nM) wordt behandeld met toenemende hoeveelheden cellulaire lysaten. De hoeveelheid lysaat die resulteert in polarisatie (mP) waarden die overeenkomen met 90%-99% gebonden ligand, wordt gekozen voor de competitie studie. Hierin bevat elke 96-well plaat 3 nM Cy3B-GM, cellulair lysaat (hoeveelheden zoals bepaald en genormaliseerd naar totaal Hsp90 zoals bepaald door Western blot analyse met Hsp90 gezuiverd uit HeLa cellen als standaard) en geteste Hsp90-remmer in een eindvolume van 100 µL. De plaat wordt 24 uur op een schudder bij 4 ℃ gelaten en de fluorescentiepolarisatie (FP) waarden in mP worden geregistreerd. EC50 waarden voor Zelavespib (PU-H71) worden bepaald als de concentraties van de competitor waarbij 50% van de Cy3B-GM is verdrongen. FP metingen worden uitgevoerd op een Analyst GT microplaatlezer.
In vivo
S8039, toegediend met 75 mg/kg a.d. in het MDA-MB-231-model, induceert een 100% complete respons, en tumoren worden na 37 dagen behandeling gereduceerd tot littekenweefsel, gepaard gaande met een reductie in vele proliferatieve en anti-apoptotische moleculen, namelijk een afname van respectievelijk 80%, 95%, 99%, 80% en 65% in EGFR, HER3, Raf-1, Akt en p-Akt. S8039 (75 mg/kg, 3 keer per week) induceert een 96% remming van tumorgroei, gepaard gaande met een 60% reductie in tumorcelproliferatie, een 85% daling in geactiveerde Akt geassocieerd met overleving en hoog invasief potentieel, en een 6-voudige toename in apoptose.
Referenties

Toepassingen

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot AKT / c-Myc / pERK / RAF1 / EWS-FLI1 / IGF-1R / PDGFRA / c-KIT / SRC EGFR / HER3 / IGF-1R / c-Kit / Raf-1 / Akt / p90RSK / CSK / Hsp70 / Hsp90 Bcl-xl / p-PDK1 / p-AKT / cPARP LYN / SYK / BTK / AKT / MEK / ERK
S8039-WB1
24388362
Growth inhibition assay Cell viability
S8039-viability1
19416831

Informatie klinische proef

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Rekrutering Aandoeningen Sponsor/Medewerkers Startdatum Fasen
NCT05612633 Withdrawn
Accelerated Phase MPN|Blast Phase MPN
Samus Therapeutics Inc.
 June 15 2022 Phase 2
NCT03935555 Terminated
Primary Myelofibrosis (PMF)|Post-Polycythemia Vera Myelofibrosis (Post-PV MF)|Post-Essential Thrombocythemia Myelofibrosis (Post-ET MF)
Samus Therapeutics Inc.
 August 12 2019 Phase 1
NCT03373877 Terminated
Myelofibrosis|Primary Myelofibrosis|Post-polycythemia Vera Myelofibrosis|Post-essential Thrombocythemia Myelofibrosis
Samus Therapeutics Inc.
 May 24 2018 Phase 1
NCT01393509 Completed
Metastatic Solid Tumor|Lymphoma|Myeloproliferative Neoplasms (MPN)
Memorial Sloan Kettering Cancer Center
 July 6 2011 Phase 1
NCT01581541 Terminated
Solid Tumors|Lymphoma
National Cancer Institute (NCI)|National Institutes of Health Clinical Center (CC)
 April 26 2011 Phase 1

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, kunt u een bericht achterlaten.

Gelieve uw naam in te voeren.
Gelieve uw e-mailadres in te voeren. Voer een geldig e-mailadres in.
Schrijf alstublieft iets voor ons.