Zelavespib (PU-H71)

Catalogusnr.S8039 Batch:S803905

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C18 H21 I N6 O2 S
Molecuulgewicht 512.37 CAS-nr. 873436-91-0
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (195.17 mM)
Water 100 mg/mL (195.17 mM)
Ethanol 100 mg/mL (195.17 mM)
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Zelavespib (PU-H71, NSC 750424) is een potente en selectieve remmer van HSP90 met een IC50 van 51 nM. Deze verbinding bevindt zich in fase 1.
Doelen
HSP90
51 nM
In vitro Zelavespib (PU-H71) (1 µM) onderdrukt potent de groei van triple-negatieve borstkankercellijnen (TNBC) MDA-MB-468, MDA-MB-231 en HCC-1806 met respectievelijk IC50 van 65, 140 en 87 nM. Het doodt respectievelijk 80%, 65% en 80% van de initiële populatie van MDA-MB-468, MDA-MB-231 en HCC-1806 cellen. Deze verbinding (0,25-1 µM) induceert een dosisafhankelijke afbraak of inactivatie van tumorsturende moleculen, waaronder EGFR, IGF1R, HER3, c-Kit, Raf-1 en Akt. Behandeling gedurende 24 uur met 1 µM PU-H71 vergroot het percentage cellen in de G2-M-fase van MDA-MB-468 tot 69%, gemedieerd door een reductie in CDK1- en Chk1-expressie. Het induceert apoptose in TNBC, deels door inactivatie en downregulatie van Akt en Bcl-xL. Het leidt tot een proteasoom-gemedieerde reductie in IRAK-1 en TBK1-niveaus, wat resulteert in een reductie van respectievelijk ongeveer 84% en 90% in NF-κB-activiteit in MDA-MB-231-cellen behandeld met respectievelijk 0,5 en 1 µM PU-H71. Het remt de invasie van MDA-MB-231-cellen aanzienlijk, met een onderdrukking van 90% bij 1 µM. Bij 2,5 µM genereert het endoplasmatisch reticulum (ER) stress en activeert het de Unfolded Protein Response (UPR), zoals blijkt uit XBP1 mRNA-splitsing (2,3-voudig) en upregulatie van Grp94 (3,7-voudig), Grp78 (4,9-voudig) en CHOP (48-voudig) eiwitexpressie en ATF4 (1,8-voudig) mRNA-expressie. Bij 1 µM induceert het de mitochondriale apoptoseroute in HeLa-cellen, gemedieerd door caspase, maar niet door calpaïne-activering. Als reactie op PU-H71-geïnduceerde ER-stress wordt apoptose geactiveerd in melanoom-, cervix-, colon-, lever- en longkankercellen, maar niet in normale menselijke fibroblasten. Het is in staat apoptose te induceren door de resistentie van Bcl-2 te overwinnen. Bij 30 nM vermindert het de NOS2-activiteit (60% reductie) en -expressie in LI (1 µg/mL LPS en 5 ng/mL IFN γ)-gestimuleerde astrocyten significant door NF-κB-elementactivering te remmen. Het vertoont vergelijkbare effecten op microglia-cellen als op astrocyten, waarbij 50 nM PU-H71 nodig is om de LPS-afhankelijke nitrietafgifte significant te verminderen.
In Vivo S8039, toegediend met 75 mg/kg a.d. in het MDA-MB-231-model, induceert een 100% complete respons, en tumoren worden na 37 dagen behandeling gereduceerd tot littekenweefsel, gepaard gaande met een reductie in vele proliferatieve en anti-apoptotische moleculen, namelijk een afname van respectievelijk 80%, 95%, 99%, 80% en 65% in EGFR, HER3, Raf-1, Akt en p-Akt. S8039 (75 mg/kg, 3 keer per week) induceert een 96% remming van tumorgroei, gepaard gaande met een 60% reductie in tumorcelproliferatie, een 85% daling in geactiveerde Akt geassocieerd met overleving en hoog invasief potentieel, en een 6-voudige toename in apoptose.
Functies Op purine gebaseerde, HSP90-selectieve remmer.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • HSP90 bindingsassay

    Metingen worden uitgevoerd in zwarte 96-well microtiterplaten. Cellysaten worden bereid door celmembranen te scheuren door bevriezing bij -70°C en het cellulaire extract op te lossen in HFB [20 mM Hepes (K), pH 7.3, 50 mM KCl, 5 mM MgCl2, 20 mM Na2MoO4, 0,01% Nonidet P-40] met toegevoegde protease- en fosfataseremmers. Verzadigingscurven worden geregistreerd waarbij fluorescent gelabelde geldanamycine (Cy3B-GM) (3 nM) wordt behandeld met toenemende hoeveelheden cellulaire lysaten. De hoeveelheid lysaat die resulteert in polarisatie (mP) waarden die overeenkomen met 90%-99% gebonden ligand, wordt gekozen voor de competitie studie. Hierin bevat elke 96-well plaat 3 nM Cy3B-GM, cellulair lysaat (hoeveelheden zoals bepaald en genormaliseerd naar totaal Hsp90 zoals bepaald door Western blot analyse met Hsp90 gezuiverd uit HeLa cellen als standaard) en geteste Hsp90-remmer in een eindvolume van 100 µL. De plaat wordt 24 uur op een schudder bij 4 ℃ gelaten en de fluorescentiepolarisatie (FP) waarden in mP worden geregistreerd. EC50 waarden voor Zelavespib (PU-H71) worden bepaald als de concentraties van de competitor waarbij 50% van de Cy3B-GM is verdrongen. FP metingen worden uitgevoerd op een Analyst GT microplaatlezer.
Celassay:

[1]
  • Cellijnen

    Human triple-negative breast cancers cell line MDA-MB-231

  • Concentraties

    ~5μM

  • Incubatietijd

    3 days

  • Methode

    Exponentially growing MDA-MB-231 cells are seeded into black 96-well microtiter plates and incubated in medium containing either vehicle control (DMSO) or Zelavespib (PU-H71) for the indicated time at 37 ℃. Plates containing 3 replicate wells per assay condition are seeded at a density of 8×103 cells for each cell line in 100 μL medium. After exposure of cells to this compound, plates are equilibrated to room temperature (20-25 ℃) for approximately 30 min, and 100 μL CellTiter-Glo reagent are added to each well. Plates are mixed for 2 min on an orbital shaker and then incubated for 15 min to 2 h at room temperature. The luminescence signal in each well is measured in an Analyst GT microplate reader.
Dierstudie:

[1]
  • Dierlijke modellen

    Human triple-negative breast cancers xenografts MDA-MB-231

  • Doseringen

    75 mg/kg

  • Toediening

    i.p. on an alternate day schedule

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19416831/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23485394/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23123171/

Klantproductvalidatie

Effects of low-level HSP90 inhibition (by ganetespib, 2-5 nM; PU-H71, 40-70 nM) or febrile-range temperature (39 ℃) on HSP70 and HSP90 protein levels in FANCA wild-type cells. High-level HSP90 inhibition (ganetespib, 25 nM; PU-H71, 300 nM) as well as proteotoxic proteasomal inhibition (MG132, 2.5 mM) induced the expression of HSP70. Constitutive (upper band: C) and inducible forms (lower band: I) of HSP70 are indicated. HSP90 levels are shown for comparison.

Gegevens van [ , , Cell, 2017, 168(5):856-866 ]

Sellecks Zelavespib (PU-H71) Is geciteerd door 18 Publicaties

A patient-derived T cell lymphoma biorepository uncovers pathogenetic mechanisms and host-related therapeutic vulnerabilities [ Cell Rep Med, 2025, S2666-3791(25)00102-8] PubMed: 40147445
In Vivo Visualization and Quantification of Brain Heat Shock Protein 90 with [11C]HSP990 in Healthy Aging and Neurodegeneration [ J Nucl Med, 2025, jnumed.124.268961] PubMed: 40306968
BCL2 drives castration resistance in castration-sensitive prostate cancer by orchestrating reciprocal crosstalk between oncogenic pathways [ Cell Rep, 2025, 44(6):115779] PubMed: 40448998
Radiosynthesis and Evaluation of [18F]FEHSP990 as Novel PET Tracer for Hsp90 PET Imaging [ J Labelled Comp Radiopharm, 2025, 68(4):e4144] PubMed: 40219580
Small molecule inhibitor targeting the Hsp70-Bim protein-protein interaction in estrogen receptor-positive breast cancer overcomes tamoxifen resistance [ Breast Cancer Res, 2024, 26(1):33] PubMed: 38409088
Epichaperome Inhibition by PU-H71-Mediated Targeting of HSP90 Sensitizes Glioblastoma Cells to Alkylator-Induced DNA Damage [ Cancers (Basel), 2024, 16(23)3934] PubMed: 39682123
High CD142 Level Marks Tumor-Promoting Fibroblasts with Targeting Potential in Colorectal Cancer [ Int J Mol Sci, 2023, 24(14)11585] PubMed: 37511344
Radiosynthesis and preclinical evaluation of [11C]SNX-ab as an Hsp90α,β isoform-selective PET probe for in vivo brain and tumour imaging [ EJNMMI Radiopharm Chem, 2023, 8(1):2] PubMed: 36715827
Development of a First-in-Class Small-Molecule Inhibitor of the C-Terminal Hsp90 Dimerization [ ACS Cent Sci, 2022, 8(5):636-655] PubMed: 35647282
BCL-xL inhibition potentiates cancer therapies by redirecting the outcome of p53 activation from senescence to apoptosis [ Cell Rep, 2022, 41(12):111826] PubMed: 36543138

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.