Name: MLN4924 (Pevonedistat)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7109
Rating: 5 (148 reviews)

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.99%

99.99

Gerelateerde doelwitten	Proteasome E3 Ligase DUB p97 SUMO E2 conjugating
Overige E1 Activating Inhibitoren	TAK-243 (MLN7243) PYR-41 ML792 TAS4464 DKM 2-93 COH000 NEDD8 inhibitor M22 Pevonedistat hydrochloride PYZD-4409

Celkweek, behandeling & werkconcentratie

Cellijnen	Assaytype	Incubatietijd	Activiteitsbeschrijving	PMID
K562	Antiproliferative assay	72 hrs	Antiproliferative activity against human K562 cells after 72 hrs by CellTiter-Glo assay, EC50 = 0.108 μM.	24900352
U2OS	Antitumor assay	72 hrs	Antitumor activity against human U2OS cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 0.16 μM.	28388520
HCT116	Antitumor assay	72 hrs	Antitumor activity against human HCT116 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 0.19 μM.	28388520
Caco2	Function assay	16 hrs	Inhibition of NAE-mediated Ubcl2-NEDD8 conjugation in human Caco2 cells after 16 hrs by Western blot analysis, EC50 = 3.4 μM.	29232579
Caco2	Function assay	16 hrs	Inhibition of NAE-mediated Ubcl2-NEDD8 conjugation in human Caco2 cells after 16 hrs by Western blot analysis, EC50 = 3.4 μM.	29232579
Caco2	Cytotoxicity assay	72 hrs	Cytotoxicity against human Caco2 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 4.4 μM.	29232579
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht	443.52	Formule	C₂₁H₂₅N₅O₄S	Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	905579-51-3	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 89 mg/mL (200.66 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 22 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Moleculair gewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5% DMSO 1 30% PEG 300 2 5% Tween 80 3 ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	4.000mg/ml (9.02mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 80 mg/ml clarified DMSO stock solution to 300 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL Tween-80 to the above system, mix evenly to clarify it; Then continue to add 600 μL ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH₂O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Kenmerken	A mechanism-based inhibitor of NAE, and creates a covalent NEDD8-MLN4924 adduct catalyzed by the enzyme.
Targets/IC₅₀/Ki	NAE (Cell-free assay) 4 nM
In vitro	Pevonedistat (MLN4924) is structureel gerelateerd aan adenosine 59-monofosfaat (AMP) - een strak bindend product van de NAE-reactie. Het (3 μM) remt selectief NAE in HCT-116 cellysaten en remt de algehele eiwitomzetting met <9% in HCT-116 cellen. Deze verbinding resulteert in een dosisafhankelijke afname van Ubc12-NEDD8-thioester en NEDD8-cullineconjugaten met een IC50 < 0,1 μM in HCT-116 cellen, wat resulteert in een wederzijdse toename van de abundantie van de bekende CRL-substraten CDT1, p27 en NRF2, maar niet van niet-CRL-substraten. Het (3 μM) leidt ertoe dat cellen zich in de S-fase ophopen al na 8 uur en resulteert in een significant deel van de cellen met 4N DNA-inhoud na 24 uur in HCT-116 cellen. Bij dezelfde concentratie resulteert het in snelle accumulatie van pIkappaBalpha, afname van nucleair p65-gehalte, vermindering van nucleaire factor-kappaB (NF-kappaB) transcriptieactiviteit en G(1)-arrest, wat uiteindelijk leidt tot apoptose-inductie, gebeurtenissen die consistent zijn met krachtige NF-kappaB-route-inhibitie in ABC DLBCL-cellen. Bij 1 μM triggert het DNA-replicatie en remt het celproliferatie door stabilisatie van de DNA-replicatiefactor Cdt1, een substraat van cullines 1 en 4. Deze concentratie, die voldoende is om Cdt1 gedurende 4-5 uur te verhogen, blijkt voldoende te zijn om DNA-replicatie te induceren en apoptose- en senescentiepaden te activeren. Behandeling met deze verbinding induceert de kenmerken van senescentiefenotypen, zoals blijkt uit een vergrote en afgeplatte cellulaire morfologie en positieve kleuring van senescentie-geassocieerde eta-Gal. MLN4924-geïnduceerde senescentie is geassocieerd met cellulaire respons op DNA-schade, getriggerd door accumulatie van DNA-licensing-eiwitten CDT1 en ORC1, als gevolg van inactivatie van CRL/SCF E3's. Het is irreversibel en gekoppeld aan aanhoudende accumulatie van p21 en aanhoudende activering van de DNA-schaderespons.
Kinase Assay	In vitro E1-activerende enzymassays
Kinase Assay	Een time-resolved fluorescentie-energieoverdrachtsassayformaat wordt gebruikt om de in vitro activiteit van NAE te meten. De enzymatische reactie, die 50 L 50 mM HEPES, pH 7,5, 0,05% BSA, 5 mM MgCl₂, 20 M ATP, 250 M glutathion, 10 nM Ubc12-GST, 75 nM NEDD8-Flag en 0,3 nM recombinant humaan NAE-enzym bevat, wordt gedurende 90 min bij 24 C geïncubeerd in een 384-wells plaat, voordat deze wordt beëindigd met 25 L stop/detectiebuffer (0,1 M HEPES, pH 7,5, 0,05% Tween20, 20 mM EDTA, 410 mM KF, 0,53 nM met Europium-Cryptaat gelabelde monoclonale Flag-M2-specifieke antilichaam en 8,125 g/mL PHYCOLINK allofycocyanine (XL-APC)-gelabelde GST-specifieke antilichaam. Na incubatie gedurende 2 uur bij 24 C wordt de plaat afgelezen op het LJL Analyst HT Multi-Mode instrument met behulp van een time-resolved fluorescentiemethode. Een vergelijkbaar assayprotocol wordt gebruikt om andere E1-enzymen te meten.
In vivo	Pevonedistat (MLN4924) (60 mg/kg) resulteert in een dosis- en tijdsafhankelijke afname van NEDD8-cullineniveaus al 30 minuten na toediening bij HCT-116 tumor-dragende muizen, met een maximaal effect 1-2 uur na de dosis. Het leidt ook tot een dosis- en tijdsafhankelijke toename van de steady-state niveaus van NRF2 en CDT1 bij HCT-116 tumor-dragende muizen. Deze verbinding leidt tot DNA-schade in de tumor, aangegeven door de verhoogde niveaus van gefosforyleerd CHK1 bij HCT-116 tumor-dragende muizen. Bij toediening volgens een BID-schema van 30 mg/kg en 60 mg/kg remt het de tumorgroei met T/C-waarden van respectievelijk 0,36 en 0,15 bij muizen met HCT-116-xenografts. Het (60 mg/kg) blokkeert NAE-routebiomarkers en resulteert in volledige tumorgroei-inhibitie bij muizen met humane xenografttumoren van ABC- en GCB-DLBCL. Deze verbinding (60 mg/kg) resulteert in NF-kappaB-route-inhibitie, gepaard gaand met tumorregressies in primaire humane tumormuismodellen van ABC-DLBCL.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19360080/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20525923/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21159650/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21677879/

Toepassingen

Methoden	Biomarkers	PMID
Western blot	Culin 3 / CDT2 / CDT1 / SET8 / p21 / p-p53 / p-CHK1 / p-CHK2 / CHK2 / γH2AX / H2AX / PARP / c-PARP Culin 1 / WEE1 / p27 / p-H3 / cyclin B1 Cleaved caspase-3 / Cleaved PARP pro-apoptotic and anti-apoptotic proteins p-c-Jun / c-Jun p-H2A / p-CHK2 p-AKT / p-mTOR / p-70S6K	28838998
Immunofluorescence	RhoB / VE-cadherin / F-actin	29358211
Growth inhibition assay	Cell viability	27333051

Informatie klinische proef

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer	Rekrutering	Aandoeningen	Sponsor/Medewerkers	Startdatum	Fasen
NCT04985656	Withdrawn	Myelodysplastic Syndromes (MDS)	Takeda	October 1 2021	Phase 2
NCT04800627	Terminated	Locally Advanced Malignant Solid Neoplasm\|Metastatic Malignant Solid Neoplasm\|Unresectable Malignant Solid Neoplasm	M.D. Anderson Cancer Center	March 29 2021	Phase 1\|Phase 2
NCT04266795	Active not recruiting	Acute Myeloid Leukemia (AML)	Takeda	October 13 2020	Phase 2
NCT03770260	Completed	Recurrent Multiple Myeloma\|Refractory Multiple Myeloma	National Cancer Institute (NCI)	February 10 2020	Phase 1
NCT04172844	Active not recruiting	Acute Myelogenous Leukemia	Medical College of Wisconsin	January 13 2020	Phase 1

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, kunt u een bericht achterlaten.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

MLN4924 (Pevonedistat) NAE-remmer

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 443.52