Y-27632 Dihydrochloride

N. catalogoS1049 Lotto:S104929

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Dati tecnici

Formula

C14H21N3O.2HCl
Peso molecolare 320.26 Numero CAS 129830-38-2
Solubilità (25°C)* In vitro DMSO 64 mg/mL (199.83 mM)
Water 64 mg/mL (199.83 mM)
Ethanol 11 mg/mL (34.34 mM)
In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione Y-27632 2HCl è un inibitore selettivo di ROCK1 e ROCK2 con un Ki di 140 nM e 300nM in un saggio senza cellule, che mostra una selettività >200 volte superiore rispetto ad altre chinasi, tra cui PKC, protein chinasi dipendente da cAMP, MLCK e PAK.
Target
ROCK1 (p160ROCK)
(Cell-free assay)		 ROCK2
(Cell-free assay)
140 nM(Ki) 300 nM(Ki)
In vitro

Y-27632 2HCl inibisce ROCK-II mostrando poca attività contro PKC, la proteina chinasi cAMP-dipendente e la miosina chinasi a catena leggera (MLCK) con Ki rispettivamente di 26 μM, 25 μM e > 250 μM, così come la PKA attivata da un altro membro della GTPasi della famiglia Rho, Cdc42. Questo composto inibisce la contrazione del muscolo liscio indotta da vari agonisti tra cui fenilefrina, istamina, acetilcolina, serotonina, endotelina e trombossano con una IC50 di 0,3-1 μM, inibendo selettivamente la sensibilizzazione al Ca2+. Sopprime la formazione di fibre di stress mediata da Rho e p160ROCK nelle cellule coltivate.

Questo trattamento chimico blocca sia l'attivazione dell'actomiosina mediata da Rho sia l'attività invasiva stimolata da LPA delle cellule MM1 in modo dose-dipendente.

Questo trattamento con il composto non è solo sufficiente per avviare la formazione di processi assonali esuberanti, ma facilita anche la maturazione assonale durante le primissime fasi dell'assonogenesi, pur risparmiando in gran parte l'allungamento assonale.

Nelle cellule staminali embrionali umane (hES), questo trattamento chimico a 10 μM diminuisce marcatamente l'apoptosi indotta dalla dissociazione anche in coltura in sospensione priva di siero (SFEB), aumenta l'efficienza di clonazione (da ~1% a ~27%), facilita il subcloning dopo il trasferimento genico e consente alle cellule hES coltivate in SFEB di sopravvivere e differenziarsi in progenitori corticali e telencefalici basali Bf1+.

In vivo

La somministrazione orale di Y-27632 2HCl a 30 mg/kg diminuisce significativamente la pressione sanguigna in modo dose-dipendente in ratti ipertesi spontanei, ratti ipertesi renali, così come ratti ipertesi con acetato di desossicorticosterone (DOCA)-sale.

Quando questo composto viene somministrato continuamente ad una velocità di 0,55 μL all'ora tramite pompe impiantate per 11 giorni, l'invasione delle cellule tumorali (cellule MM1 che esprimono Val14-RhoA nei ratti) viene significativamente ritardata.

Inibendo ROCK, questo trattamento chimico attenua l'angiogenesi indotta dall'ipossia e il rimodellamento vascolare nella circolazione polmonare. Il pretrattamento con questo composto ha un effetto protettivo contro la formazione di tumori in topi albini con carcinoma ascitico di Ehrlich.

Protocollo (da riferimento)

Saggio della chinasi:

[1]
  • Reazioni di fosforilazione

    La p160ROCK è espressa nelle cellule COS come proteine a lunghezza intera marcate e immunoprecipitate mediante l'uso di anticorpi anti-tag. La p160ROCK (30 ng) viene incubata con 40 μM [γ-32P]ATP (3,3 Ci/mmol) e con 3 μg di istone (HF2A), caseina defosforilata o MBP in presenza di varie concentrazioni di questo composto a 30 °C in un volume totale di 31 μL. Un'aliquota di 7 μL viene prelevata a 0, 5, 10 e 20 minuti, miscelata con un volume uguale di tampone di campionamento 2 × Laemmli e applicata a SDS-PAGE. Il gel viene colorato con blu di Coomassie, essiccato e sottoposto ad analisi tramite un Bioimage Analyzer BAS2000. Si ottiene la concentrazione di questa sostanza chimica necessaria per inibire l'attività della p160ROCK del 50% (valore IC50). Il valore Ki viene calcolato secondo l'equazione, Ki = IC50/(1 + S/Km), dove S e Km rappresentano le concentrazioni e il valore Km per l'ATP.
Saggio cellulare:

[4]
  • Linee cellulari

    hES Cells

  • Concentrazioni

    10 uM

  • Tempo di incubazione

    1 h

  • Metodo

    Y-27632 2HCl was added to culture medium at 10 uM 1 h before detaching the cells from the feeder layer and also upon seeding the cells onto a new MEF layer.
Studio sugli animali:

[1] [7]
  • Modelli animali

    Male Wistar rats with spontaneous or induced hypertension; Swiss albino mice with Ehrlich ascites carcinoma

  • Dosaggi

    30 mg/kg/day (Rat); 0-10 mg/kg (mice)

  • Somministrazione

    Orally (Rat); i.p. (Mice)

Riferimenti

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9353125/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9930872/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10839361/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17529971/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15961717/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10779382/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24905316/

Convalida del prodotto da parte del cliente

The Rho GTPase-JNK pathway is required for the inhibitory effects of vandetanib on Calu-6 cells invasion. Calu-6 cells were incubated for 24 h in the presence or absence of vandetanib (1 or 2 uM), SP600125 (50 or 100 uM), and Y27632 (5 or 10 uM). The morphology of the Calu-6 cells was examined under a light microscope. Scale bar: 50 um.

Dati da [ Mol Neurobiol , 2015 , 10.1007/s12035-014-9084-z ]

Effect of mechanical strain on cell morphology. (A) SEM analyses indicate that strain-induced cell elongation is prevented by treatment with HA1100 and Y27632. (B) Quantification of cellular area in the indicated conditions (n = 20). (C) F-actin staining of control, strained and HA1100 or Y27632-treated cells attests that inhibition of RhoA/ROCK prevents mechanical strain-induced cell elongation. *p < 0.05 compared to control without strain (CTL).

Dati da [ J Mol Cell Cardiol , 2014 , 67, 49-59 ]

Dati da [ Dev Biol , 2012 , 370, 33-41 ]

The ROCK inhibitors fasudil and Y27632 prevented SCP2 cell bone metastasis in nude mice (n = 10 per group). Shown are BLI images of bone metastases, IHC analyses of SMAD3 C-tail phosphorylation and PTHLH, osteoclast TRAP staining, and BLI quantitation.

Dati da [ , , J Clin Invest, 2014, 124(4): 1646-59 ]

Sellecks Y-27632 Dihydrochloride È stato citato da 1467 Pubblicazioni

Human assembloid model of the ascending neural sensory pathway [ Nature, 2025, 642(8066):143-153] PubMed: 40205039
SLC7A11 is an unconventional H+ transporter in lysosomes [ Cell, 2025, S0092-8674(25)00406-4] PubMed: 40280132
A complete model of mouse embryogenesis through organogenesis enabled by chemically induced embryo founder cells [ Cell, 2025, S0092-8674(25)00807-4] PubMed: 40780195
Subclonal immune evasion in non-small cell lung cancer [ Cancer Cell, 2025, S1535-6108(25)00262-4] PubMed: 40614739
CellNEST reveals cell-cell relay networks using attention mechanisms on spatial transcriptomics [ Nat Methods, 2025, 22(7):1505-1519] PubMed: 40481363
LKB1 inactivation promotes epigenetic remodeling-induced lineage plasticity and antiandrogen resistance in prostate cancer [ Cell Res, 2025, 35(1):59-71] PubMed: 39743630
Loss of Kmt2c or Kmt2d primes urothelium for tumorigenesis and redistributes KMT2A-menin to bivalent promoters [ Nat Genet, 2025, 57(1):165-179] PubMed: 39806204
HNF1A and A1CF coordinate a beta cell transcription-splicing axis that is disrupted in type 2 diabetes [ Cell Metab, 2025, S1550-4131(25)00334-1] PubMed: 40774250
A gut-on-a-chip incorporating human faecal samples and peristalsis predicts responses to immune checkpoint inhibitors for melanoma [ Nat Biomed Eng, 2025, 10.1038/s41551-024-01318-z] PubMed: 39939548
Engineered thoracic spinal cord organoids for transplantation after spinal cord injury [ Nat Biomed Eng, 2025, 10.1038/s41551-025-01549-8] PubMed: 41136603

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