Vedolizumab (anti-α4β7-integrin)

N. catalogoA2045 Batch: A204502

Dati tecnici

Numero CAS	943609-66-3
Formula	PBS Buffer, PH 7.4
Isotipo	Human IgG1
Applicazione	Vedolizumab (anti-α4β7-integrin)
Conservazione (Dalla data di ricevimento)	Store the undiluted solution at 4°C in the dark to avoid freeze-thaw cycles.
Purezza	98%
Concentrazione proteica:	5.72mg/ml
Livello di endotossine	＜1EU/mg

Attività biologica

Descrizione	Vedolizumab (anti-α4β7-integrin) è un anticorpo monoclonale IgG1 umanizzato che ha come bersaglio l'α4β7 integrin per il trattamento della colite ulcerosa e della malattia di Crohn.
In vitro	Vedolizumab (anti-α4β7-integrin) si lega a un sottogruppo di linfociti T CD4⁺ della memoria del sangue periferico umano, inclusi i linfociti T helper 17 con homing intestinale al livello più alto, si lega anche agli eosinofili a livelli elevati e ai linfociti T helper naive, ai linfociti T citotossici naive e della memoria, ai linfociti B, alle cellule natural killer e ai basofili a livelli inferiori; Vedolizumab si lega ai linfociti T CD4⁺ della memoria e ai linfociti B con potenza subnanomolare con EC50 di 0,3-0,4 nM.

Descrizione

Vedolizumab (anti-α4β7-integrin) è un anticorpo monoclonale IgG1 umanizzato che ha come bersaglio l'α4β7 integrin per il trattamento della colite ulcerosa e della malattia di Crohn.

In vitro

Vedolizumab (anti-α4β7-integrin) si lega a un sottogruppo di linfociti T CD4⁺ della memoria del sangue periferico umano, inclusi i linfociti T helper 17 con homing intestinale al livello più alto, si lega anche agli eosinofili a livelli elevati e ai linfociti T helper naive, ai linfociti T citotossici naive e della memoria, ai linfociti B, alle cellule natural killer e ai basofili a livelli inferiori; Vedolizumab si lega ai linfociti T CD4⁺ della memoria e ai linfociti B con potenza subnanomolare con EC50 di 0,3-0,4 nM.

Protocollo (solo per riferimento)

Saggio cellulare:	Le PBMC sono state risospese in tampone di saggio per la colorazione intracellulare dell'interleuchina (IL) 17A delle cellule della memoria CD4. Le PBMC sono state stimolate (o non stimolate, per i campioni di controllo) con 50 ng/ml di forbolo 12-miristato 13-acetato e 1 µg/ml di ionomicina in presenza di 3 µM di monensina per 5 ore a 37°C. Dopo il lavaggio, le cellule sono state colorate con anticorpi marcati con fluorescenza: Vedolizumab, anti-α4 e anti-β7, anti-CD4 e anti-CD45RO, ove applicabile, a 4°C per 30 min. Le cellule sono state quindi lavate con PBS freddo e risospese in soluzione di lavoro di fissazione e permeabilizzazione tampone di colorazione a 4°C per 30 min. Dopo fissazione e permeabilizzazione, le cellule sono state lavate con tampone di permeabilizzazione e bloccate con siero di ratto normale al 10% a 4°C per 10 min. Dopo la fase di blocco, le cellule sono state colorate con anticorpo anti_x0002_IL17A coniugato con fluorocromo a 4°C per 30 min. Infine, le cellule sono state lavate con tampone di permeabilizzazione e analizzate.

Saggio cellulare:

Le PBMC sono state risospese in tampone di saggio per la colorazione intracellulare dell'interleuchina (IL) 17A delle cellule della memoria CD4. Le PBMC sono state stimolate (o non stimolate, per i campioni di controllo) con 50 ng/ml di forbolo 12-miristato 13-acetato e 1 µg/ml di ionomicina in presenza di 3 µM di monensina per 5 ore a 37°C. Dopo il lavaggio, le cellule sono state colorate con anticorpi marcati con fluorescenza: Vedolizumab, anti-α4 e anti-β7, anti-CD4 e anti-CD45RO, ove applicabile, a 4°C per 30 min. Le cellule sono state quindi lavate con PBS freddo e risospese in soluzione di lavoro di fissazione e permeabilizzazione tampone di colorazione a 4°C per 30 min. Dopo fissazione e permeabilizzazione, le cellule sono state lavate con tampone di permeabilizzazione e bloccate con siero di ratto normale al 10% a 4°C per 10 min. Dopo la fase di blocco, le cellule sono state colorate con anticorpo anti_x0002_IL17A coniugato con fluorocromo a 4°C per 30 min. Infine, le cellule sono state lavate con tampone di permeabilizzazione e analizzate.

Riferimenti	https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19509315/

Riferimenti

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19509315/

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