In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO
Corn oil
Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.
3.000mg/ml
(12.03mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 60 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution
5%DMSO
40%PEG300
5%Tween80
50%ddH2O
Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.
3.000mg/ml
(12.03mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 60 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile. * Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto. * Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)
Preparazione delle soluzioni stock
Attività biologica
Descrizione
(E/Z)-TG003 è un potente inibitore ATP-competitivo della Cdc2-like kinase (Clk) con IC50 di 20 nM, 200 nM e 15 nM rispettivamente per Clk1, Clk2 e Clk4. Nessun effetto inibitorio su Clk3, SRPK1, SRPK2 o PKC.
Target
mCLK4 (Cell-free assay)
mCLK1 (Cell-free assay)
mCLK2 (Cell-free assay)
15 nM
20 nM
200 nM
In vitro
TG003 inibisce lo splicing SF2/ASF-dipendente della β-globina umana in vitro tramite la soppressione della fosforilazione mediata da Clk1/Sty. TG003 inibisce l'attività chinasica di Clk1/Sty nelle cellule di mammifero, pur non avendo alcun effetto tossico sulla crescita delle cellule HeLa e COS-7 a una concentrazione di 10 μM. TG003 blocca la produzione di RNA di IL-1β da parte delle piastrine inibendo lo splicing dell'RNA eteronucleare di IL-1β. Durante la differenziazione degli adipociti 3T3-L1, TG003 blocca anche lo splicing alternativo di PKCβII e l'espressione di PPARγ1 e PPARγ2.
In vivo
Il TG003 (10 μM) ripristina i difetti embrionali indotti da un'eccessiva attività di Clk in Xenopus.
L'attività chinasica di Clks e SRPKs viene analizzata in una miscela di reazione contenente 200 mM Tris-HCl (pH 7.5), 12.5 mM MgCl2, 8 mM ditiotreitolo, 4 mM EGTA, 1–20 μM ATP, 1 μCi di [γ-32P]ATP, 1 μg di peptide sintetico del dominio SF2/ASF RS (NH2-RSPSYGRSRSRSRSRSRSRSRSNSRSRSY-OH) e 0.1–1 μg di chinasi purificate in un volume finale di 40 μL. L'attività della proteina chinasi dipendente da cAMP viene analizzata in una miscela di reazione contenente 80 mM Tris-HCl (pH 7.5), 12.5 mM MgCl2, 8 mM ditiotreitolo, 4 mM EGTA, 10 μM ATP, 1 μCi di [γ-32P]ATP, 5 μg di istone H1 e 1 μg di subunità catalitica purificata della proteina chinasi dipendente da cAMP di ratto. L'attività della proteina chinasi C viene analizzata in una miscela di reazione contenente 200 mM Tris-HCl (pH 7.5), 12.5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 80 μg/mL di fosfatidilserina, 8 μg/mL di dioleina, 10 μM ATP, 1 μCi di [γ-32P]ATP, 5 μg di istone H1 e 2 μL di proteina chinasi C di ratto parzialmente purificata. La concentrazione finale di Me2SO viene regolata all'1% indipendentemente dalla concentrazione dell'inibitore. La miscela di reazione viene incubata a 30 o 25 °C per proteine ricombinanti di mammifero o Xenopus, rispettivamente, per 10 min, e una metà viene applicata su membrana di fosfocellulosa P81. Le condizioni dell'analisi chinasica, incluso il periodo di incubazione e la concentrazione di chinasi e substrati, sono ottimizzate per mantenere la linearità durante l'incubazione. La membrana viene lavata con soluzione di acido fosforico al 5% (dominio SF2/ASF RS) o soluzione di acido tricloroacetico al 5% (istone H1) per almeno 15 min. La radioattività viene misurata utilizzando un contatore a scintillazione liquida. La radioattività netta viene dedotta sottraendo il conteggio di fondo dalla miscela di reazione senza chinasi, e i dati sono espressi come percentuale rispetto al campione di controllo contenente il solvente.
2 × 105 HeLa cells or 1.5 × 105 COS-7 cells resuspended in 2 mL of medium are plated on 6-well dishes, and 2 μL of 10 mM TG003 dissolved in Me2SO (final concentration at 10 μM), or 2 μL of Me2SO, is added to some wells. Cells are trypsinized, and the density is counted every 24 h for 3 days. Cells are then fixed with 1 mL of ice-cold 70% ethanol, washed with PBS, incubated in 1 ml of PBS containing 1 μg/mL DNase-free RNase A and 50 μg/mL propidium iodide for 20 min at 37 °C, and proceeded to cell cycle analysis by FACSCalibur.
Sellecks (E/Z)-TG003 È stato citato da 9 Pubblicazioni
Combined therapy with DR5-targeting antibody-drug conjugate and CDK inhibitors as a strategy for advanced colorectal cancer
[ Cell Rep Med, 2025, S2666-3791(25)00231-9]
A common cellular response to broad splicing perturbations is characterized by metabolic transcript downregulation driven by the Mdm2-p53 axis
[ Dis Model Mech, 2024, 17(2)dmm050356]
Proteasome Inhibitor-Induced Modulation Reveals the Spliceosome as a Specific Therapeutic Vulnerability in Multiple Myeloma
[ Nat Commun, 2020, 22;11(1):1931]
Chemically defined and growth-factor-free culture system for the expansion and derivation of human pluripotent stem cells.
[ Nat Biomed Eng, 2018, 2(3):173-182]
POLITICA DI RESO
La politica di reso incondizionato di Selleck Chemical garantisce ai nostri clienti unesperienza di acquisto online senza problemi. Se non sei in alcun modo soddisfatto del tuo acquisto, puoi restituire qualsiasi articolo entro 7 giorni dalla ricezione. In caso di problemi di qualità del prodotto, sia relativi al protocollo che al prodotto, puoi restituire qualsiasi articolo entro 365 giorni dalla data di acquisto originale. Si prega di seguire le istruzioni seguenti per la restituzione dei prodotti.
SPEDIZIONE E CONSERVAZIONE
I prodotti Selleck vengono trasportati a temperatura ambiente. Se ricevi il prodotto a temperatura ambiente, ti assicuriamo che il Dipartimento di Ispezione Qualità di Selleck ha condotto esperimenti per verificare che la conservazione a temperatura normale per un mese non influirà sullattività biologica dei prodotti in polvere. Dopo la raccolta, conservare il prodotto secondo le indicazioni descritte nella scheda tecnica. La maggior parte dei prodotti Selleck è stabile nelle condizioni raccomandate.
NON PER USO UMANO, DIAGNOSTICO VETERINARIO O TERAPEUTICO.
