TMZ(Temozolomide)

Il temozolomide (TMZ) causa la formazione di siti del DNA labili agli alcali che sono presenti in quantità simili e riparati ad una velocità simile nelle linee cellulari L-1210 e L-1210/BCNU. Nelle L-1210, ma non nelle L-1210/BCNU, questo composto induce un arresto delle cellule nelle fasi SL-G2-M.[1] La sua sensibilità di entrambe le cellule chemio-sensibili e resistenti (D54-R e U87-R) è significativamente aumentata in condizioni di iperossia. Sia esso che l'iperossia sono associati a un aumento della fosforilazione di ERK p44/42 MAPK (Erk1/2), ma in misura minore nelle cellule D54-R, suggerendo che l'attività di Erk1/2 potrebbe essere coinvolta nella regolazione dell'iperossia e della morte cellulare mediata da TMZ. L'iperossia aumenta la sua tossicità nelle cellule GBM inducendo l'apoptosi, possibilmente tramite vie MAPK-correlate. [2] Induce nei monociti le vie di risposta al danno del DNA ATM-Chk2 e ATR-Chk1 con conseguente attivazione di p53. [3] L'esposizione cronica a questo composto si traduce in resistenza acquisita al TMZ ed eleva l'espressione di miR-21. [4] Il trattamento con esso innesca lo stress del reticolo endoplasmatico (RE) con aumento dell'espressione delle proteine GADD153 e GRP78, e diminuisce la proteina pro-caspase 12. Induce l'Autophagy attraverso meccanismi dipendenti dal danno mitocondriale e dallo stress del RE per proteggere le cellule di glioma. [5]

Dopo una dose giornaliera i.p. di 40 mg/kg per 5 giorni consecutivi (giorni 1-5 dopo il trapianto tumorale), il TMZ (Temozolomide) aumenta la durata della vita dell'86% nelle L-1210 e del 22% nelle L-1210/BCNU. Nelle L-1210/BCNU non si osserva alcun effetto dopo un trattamento di 100 μM o 200 μM; solo 400 μM di questo composto hanno prodotto un accumulo di cellule in fase premitotica ma molto meno che nelle L-1210. Nelle L-1210/BCNU l'accumulo massimo di cellule in SL-G2-M è, dopo 48-72 ore, circa il 30% rispetto al 23% nelle cellule non trattate. L'accumulo di cellule in SL-G2-M si è verificato anche quando topi portatori di leucemia L-1210 sono stati trattati i.v. con esso (40 mg/kg). Nessun effetto simile si osserva sulle cellule L-1210/BCNU da topi a cui è stata somministrata la stessa dose di farmaco. [1]

• Linee cellulari

  L-1210 and L-1210/BCNU cells

• Concentrazioni

  0 μM -100 μM

• Tempo di incubazione

  l hours

• Metodo

  L-1210 and L-1210/BCNU cells are seeded at 0.2 × 10₄ cells/mL and incubated for 24 hours. The cultures are treated with TMZ (Temozolomide) for l hours at 37oC, then washed twice in PBS by centrifugation and resuspended in fresh medium. Controls and treated samples are diluted in fresh medium 1:4 at 48 hours and 1:2 at 96 hours. Using these dilutions cell concentrations throughout the experiments are between 3 × 10₅ and 8 × 10₅/mL. Control growth is logarithmic in this range.

• Modelli animali

  DBA/2 mice with L-1210 and L-1210/BCNU cells

• Dosaggi

  40 mg/kg

• Somministrazione

  Administered via i.v.