Tariquidar (XR9576)

Tariquidar mostra un legame ad alta affinità con P-gp con un B_max di 275 pmol/mg. Questo composto mostra un'interazione non competitiva con i substrati di P-gp. Aumenta l'accumulo allo stato stazionario di questi citotossici nelle cellule CH^rB30 a livelli osservati nelle cellule AuxB1 non esprimenti P-gp con una EC50 di 487 nM. Questa sostanza chimica è in grado di inibire l'attività ATPasica vanadato-sensibile di P-gp del 60-70%, con potenti valori di IC50 di 43 nM. [1] Può inibire altri meccanismi di resistenza a concentrazioni più elevate. 1 µM di questo composto abroga la resistenza mediata da ABCG2 (BCRP) alle camptotecine in vitro. [2] Potenzia la citotossicità di diversi farmaci, inclusa la doxorubicina; il completo rovesciamento della resistenza è ottenuto in presenza di 25-80 nM di questa sostanza chimica. In MC26, una linea cellulare di carcinoma del colon murino con chemioresistenza intrinseca, l'IC50 della doxorubicina è cinque volte inferiore in presenza di 0,1 µM di questo composto (36 vs 7 nM). In linee cellulari di carcinoma mammario murino, carcinoma polmonare a piccole cellule umano e carcinoma ovarico umano con resistenza chemioterapica acquisita (EMT6/AR1.0, H69/LX4 e 2780 AD), l'IC50 della doxorubicina in vitro è 22-150 volte inferiore in presenza di 0,1 µM di questa sostanza chimica. L'inibizione di P-gp persiste per 23 ore dopo la sua rimozione dal sistema di coltura. [3] Ha ripristinato la citotossicità della doxorubicina nel modello di sferoide tumorale multicellulare NCI/ADR^RES (National Cancer Institute) derivato dalla linea cellulare di cancro al seno MCF7^WT. [4]

Tariquidar (2-8 mg/kg p.o.) si è dimostrato in grado di potenziare significativamente l'attività antitumorale della doxorubicina (5 mg/kg, i.v.) contro il carcinoma del colon murino MC26 in vivo. Negli xenotrapianti di carcinoma umano, la co-somministrazione di questo composto (6-12 mg/kg p.o.) ha completamente ripristinato l'attività antitumorale contro due xenotrapianti tumorali umani MDR altamente resistenti (2780AD, H69/LX4) in topi nudi. [3]

• Saggio di accumulo del farmaco allo stato stazionario

  Le cellule vengono incubate in un volume di reazione di 1 mL per 60 min a 37 ℃ sotto 5% CO₂ al fine di raggiungere lo stato stazionario. L'effetto dei modulatori XR9576 sull'accumulo del ligando [³H] viene investigato nell'intervallo di concentrazione 10^-9 - 10^-6 M. Questo composto viene aggiunto da una soluzione madre di DMSO, fornendo una concentrazione finale di solvente dello 0,2 % (v/v). Dopo la raccolta delle cellule, il farmaco accumulato viene misurato mediante conteggio a scintillazione liquida e normalizzato per il contenuto proteico cellulare. I grafici della quantità accumulata in funzione della concentrazione del modulatore vengono adattati con l'equazione generale dose-risposta: Y={(a-b)/(1+(X/c)^d)}+bDove: Y=risposta; a=risposta iniziale; b=risposta finale; c=concentrazione EC50; d=valore di pendenza; X=concentrazione del farmaco.

• Linee cellulari

  Murine mammary carcinoma cell line MDR EMT6/AR1.0

• Concentrazioni

  ~100 nM Tariquidar

• Tempo di incubazione

  4 days

• Metodo

  Cells are seeded into 96-well plates at 800/well, in 100 μL of medium and incubated for 4 h at 37 ℃. Varying concentrations of this compound or solvent control (50 μL/well) are subsequently added and incubated for an additional 1 h before the addition of the cytotoxic drug. The cytotoxic drug (50 μL) is added to give a range of final concentrations in quadruplicate wells. After incubation for an additional 4 days, cell proliferation of adherent cells is assessed using the sulforhodamine B assay.

• Modelli animali

  Murine colon carcinoma xenografts MC26

• Dosaggi

  8 mg/kg

• Somministrazione

  Coadministration of Tariquidar (p.o.) with doxorubicin (5 mg/kg, i.v.)