SU9516

N. catalogoS7636 Lotto:S763601

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Dati tecnici

Formula

C₁₃H₁₁N₃O₂

Peso molecolare

241.25

Numero CAS

377090-84-1

Solubilità (25°C)*

In vitro

DMSO

48 mg/mL (198.96 mM)

Ethanol

12 mg/mL (49.74 mM)

Water

Insoluble

In vivo (Aggiungere i solventi al prodotto singolarmente e in ordine.)

Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.	2.400mg/ml (9.95mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 48 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Convalidato dai laboratori Selleck. Se sono necessarie modifiche a questa formulazione, contattare il nostro team di vendita per test personalizzati.	0.340mg/ml (1.41mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 6.8 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

* <1 mg/ml significa leggermente solubile o insolubile.
* Si prega di notare che Selleck testa la solubilità di tutti i composti internamente e la solubilità effettiva può differire leggermente dai valori pubblicati. Ciò è normale ed è dovuto a leggere variazioni da lotto a lotto.
* Spedizione a temperatura ambiente (I test di stabilità mostrano che questo prodotto può essere spedito senza alcuna misura di raffreddamento.)

Preparazione delle soluzioni stock

Attività biologica

Descrizione

SU 9516 è un inibitore di CDK indolinone 3-sostituito con IC50 di 22 nM, 40 nM e 200 nM rispettivamente per CDK2, CDK1 e CDK4.

Target

CDK2	CDK1	CDK4
22 nM	40 nM	200 nM

In vitro

SU9516 diminuisce la fosforilazione cdk2-specifica della proteina pRB del retinoblastoma, aumenta l'attivazione della caspasi-3 e altera il Cell Cycle nelle cellule RKO e SW480. Questo composto inibisce anche la proliferazione cellulare e induce l'apoptosi cellulare in entrambe le linee cellulari. Uccide le cellule leucemiche attraverso l'inibizione della fosforilazione della RNA Pol II CTD, il danno ossidativo e la down-regulation trascrizionale di Mcl-1. Nelle cellule Jurkat di leucemia a cellule T umane, questa sostanza chimica aumenta significativamente la sensibilità al metotrexato. Inoltre, sopprime anche la localizzazione centrosomale di Aurora-A e la conseguente amplificazione del centrosoma.

Protocollo (da riferimento)

Saggio della chinasi:^{^[1]}	Saggio di chinasi CDK I saggi chinasici vengono eseguiti in piastre di polipropilene a 96 pozzetti. Ogni reazione conteneva 2 μg di istone H1 a una concentrazione finale di 10 μM [γ-³³P]ATP (0,2 μCi/pozzetto; circa il doppio del Km determinato sperimentalmente), 10 mM MgCl₂, 1 mM DTT, 0,01% Triton X-100 e 10% glicerolo in un volume di 40 μL. La reazione viene avviata con l'aggiunta di 20 μL di enzima (6 ng cdk2/pozzetto, risultando in una concentrazione finale di 1,6 nM), che viene precedentemente diluito 1:50–1:200 nello stesso tampone, e lasciato procedere per 1 ora a temperatura ambiente. La reazione viene interrotta con l'aggiunta di 0,01 mL di acido fosforico al 10%, e 25 μL della miscela di reazione vengono trasferiti su carta da filtro in fosfocellulosa P30. Il tappetino filtrante viene lavato tre volte con acido fosforico all'1,0%, asciugato all'aria e quindi contato per la radioattività in un contatore a scintillazione liquida. Il saggio chinasico cdk4 per ciclina D1-cdk4 viene eseguito in un formato di micropiastra a 96 pozzetti di polipropilene misurando l'incorporazione di fosfato radioattivo in GST-Rb. La ciclina D1-cdk4 purificata viene incubata con 1 μg di GST-Rb in 20 mM HEPES (pH 7,5) in presenza di 10 mM MgCl₂, 1 mM DTT, 0,01% Triton X-100 e 10% glicerolo. La concentrazione finale di cdk4 è di 10 ng/pozzetto, ovvero 1,6 nM. La reazione chinasica viene avviata con l'aggiunta di ATP a una concentrazione finale di 10 μM ATP (il doppio del Km determinato sperimentalmente) e [γ-³³P]ATP (1,0 μCi per pozzetto) in un volume di 60 μL e lasciata procedere a temperatura ambiente per 1 ora. La reazione viene interrotta con l'aggiunta di 0,01 ml di acido fosforico al 10%, e 25 μL della miscela di reazione vengono trasferiti su carta da filtro in fosfocellulosa P30. Il tappetino filtrante viene trattato come per i saggi Cdk1/Cdk2.
Saggio cellulare:^{^[1]}	Linee cellulari RKO cells and SW480 cells Concentrazioni 24 hours Tempo di incubazione ~50 μM Metodo RKO cells and SW480 cells are seeded in replicates in 96-well plates at 1 × 10⁴ cells/well and allowed to attach overnight. SU9516 is added in concentrations from 0.05 μM to 50.00 μM for 24 h, the cells are then washed twice with PBS, and cells are replenished with complete media. The cells are fixed at 0, 4, and 7 days post-drug removal and assayed for protein levels using a modified SRB cytotoxicity assay. The cells are fixed in 10% trichloroacetic acid for 1 h, washed in distilled H2O, and stained in 0.4% SRB/acetic acid for 30 min. The cells are then washed in 0.1% acetic acid, solubilized in 10 mM Tris (pH 9), and analyzed on a Bio-Rad 360 microplate reader at 595 nm. All experiments are repeated at least three times.

Saggio della chinasi:^{^[1]}

Saggio di chinasi CDK
I saggi chinasici vengono eseguiti in piastre di polipropilene a 96 pozzetti. Ogni reazione conteneva 2 μg di istone H1 a una concentrazione finale di 10 μM [γ-³³P]ATP (0,2 μCi/pozzetto; circa il doppio del Km determinato sperimentalmente), 10 mM MgCl₂, 1 mM DTT, 0,01% Triton X-100 e 10% glicerolo in un volume di 40 μL. La reazione viene avviata con l'aggiunta di 20 μL di enzima (6 ng cdk2/pozzetto, risultando in una concentrazione finale di 1,6 nM), che viene precedentemente diluito 1:50–1:200 nello stesso tampone, e lasciato procedere per 1 ora a temperatura ambiente. La reazione viene interrotta con l'aggiunta di 0,01 mL di acido fosforico al 10%, e 25 μL della miscela di reazione vengono trasferiti su carta da filtro in fosfocellulosa P30. Il tappetino filtrante viene lavato tre volte con acido fosforico all'1,0%, asciugato all'aria e quindi contato per la radioattività in un contatore a scintillazione liquida. Il saggio chinasico cdk4 per ciclina D1-cdk4 viene eseguito in un formato di micropiastra a 96 pozzetti di polipropilene misurando l'incorporazione di fosfato radioattivo in GST-Rb. La ciclina D1-cdk4 purificata viene incubata con 1 μg di GST-Rb in 20 mM HEPES (pH 7,5) in presenza di 10 mM MgCl₂, 1 mM DTT, 0,01% Triton X-100 e 10% glicerolo. La concentrazione finale di cdk4 è di 10 ng/pozzetto, ovvero 1,6 nM. La reazione chinasica viene avviata con l'aggiunta di ATP a una concentrazione finale di 10 μM ATP (il doppio del Km determinato sperimentalmente) e [γ-³³P]ATP (1,0 μCi per pozzetto) in un volume di 60 μL e lasciata procedere a temperatura ambiente per 1 ora. La reazione viene interrotta con l'aggiunta di 0,01 ml di acido fosforico al 10%, e 25 μL della miscela di reazione vengono trasferiti su carta da filtro in fosfocellulosa P30. Il tappetino filtrante viene trattato come per i saggi Cdk1/Cdk2.

Saggio cellulare:^{^[1]}

Linee cellulari
RKO cells and SW480 cells
Concentrazioni
24 hours
Tempo di incubazione
~50 μM
Metodo
RKO cells and SW480 cells are seeded in replicates in 96-well plates at 1 × 10⁴ cells/well and allowed to attach overnight. SU9516 is added in concentrations from 0.05 μM to 50.00 μM for 24 h, the cells are then washed twice with PBS, and cells are replenished with complete media. The cells are fixed at 0, 4, and 7 days post-drug removal and assayed for protein levels using a modified SRB cytotoxicity assay. The cells are fixed in 10% trichloroacetic acid for 1 h, washed in distilled H2O, and stained in 0.4% SRB/acetic acid for 30 min. The cells are then washed in 0.1% acetic acid, solubilized in 10 mM Tris (pH 9), and analyzed on a Bio-Rad 360 microplate reader at 595 nm. All experiments are repeated at least three times.

Riferimenti

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11507069/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16672643/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20059476/

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23446853/

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Convalida del prodotto da parte del cliente

: Dati da [ , , Biotechnol Lett, 2017, 39(7):951-957 ]

Sellecks SU9516 È stato citato da 5 Pubblicazioni

Combined therapy with DR5-targeting antibody-drug conjugate and CDK inhibitors as a strategy for advanced colorectal cancer [ Cell Rep Med, 2025, S2666-3791(25)00231-9]	PubMed: 40449480
Inactivation of TACC2 epigenetically represses CDKN1A and confers sensitivity to CDK inhibitors [ Med, 2025, S2666-6340(24)00482-3]	PubMed: 39793578
Tip60-mediated H2A.Z acetylation promotes neuronal fate specification and bivalent gene activation [ Mol Cell, 2022, S1097-2765(22)01064-4]	PubMed: 36417913
Differences in the Conformational Energy Landscape of CDK1 and CDK2 Suggest a Mechanism for Achieving Selective CDK Inhibition [ Cell Chem Biol, 2019, 26(1):121-130]	PubMed: 30472117
CDK inhibitor SU9516 induces tetraploid blastocyst formation from parthenogenetically activated porcine embryos. [Guo Q, et al. Biotechnol Lett, 2017, 39(7):951-957]	PubMed: 28315059

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