SM-164

SM-164 si lega a XIAP contenente entrambi i domini BIR con una IC50 di 1,39 nM, essendo 300 e 7000 volte più potente dei suoi omologhi monovalenti e del peptide naturale Smac AVPI, rispettivamente. Questo composto bersaglia XIAP cellulare e induce efficacemente l'apoptosi a concentrazioni di soli 1 nM nella linea cellulare di leucemia HL-60. [1]

Questa sostanza chimica induce l'apoptosi dipendente da caspasi-8 e caspasi-3 nelle cellule tumorali. Induce anche l'apoptosi dipendente da TNFα e la degradazione di cIAP-1. [2]

È altamente sinergico con TRAIL in vitro sia in linee cellulari tumorali sensibili che resistenti al TRAIL di cancro al seno, alla prostata e al colon. Questo composto migliora l'apoptosi indotta da TRAIL nelle cellule tumorali attraverso l'amplificazione della via intrinseca dell'apoptosi mediata da caspasi-8 [3]

SM-164 induce una rapida degradazione di cIAP-1 e una forte apoptosi nei tessuti tumorali di xenotrapianto MDA-MB-231 e raggiunge la regressione tumorale, ma non ha tossicità nei tessuti murini normali. [2]

Questo composto induce la degradazione di cIAP1 nei tessuti tumorali e migliora drasticamente l'attività antitumorale in vivo di TRAIL, e la combinazione di questa sostanza chimica e TRAIL raggiunge la regressione tumorale senza tossicità per gli animali. [3]

• Saggi di legame.

  Viene descritto il saggio basato su FP per la proteina XIAP BIR3. In breve, la 5-carbossifluoresceina è accoppiata alla catena laterale della lisina di un peptide Smac mutato con la sequenza e questo peptide marcato fluorescentemente (chiamato SM5F) è utilizzato come tracciante fluorescente nel saggio di legame basato su FP a XIAP BIR3. Il valore di Kd di questo tracciante fluorescente è determinato essere 17,9 nM per XIAP BIR3. Negli esperimenti di legame competitivo, un composto testato viene incubato con 30 nM di proteina XIAP BIR3 e 5 nM di SM5F nel tampone di saggio (100 mM fosfato di potassio, pH 7,5; 100 μg/ml gammaglobulina bovina; 0,02 % azida di sodio). Il valore di Kd di SM5F per la proteina cIAP-1 BIR3 è determinato essere 4,1 nM. Negli esperimenti di legame competitivo, vengono utilizzati 10 nM di proteina cIAP-1 BIR3 e 2 nM di tracciante SM5F. Il valore di Kd di SM5F per la proteina cIAP-2 BIR3 è determinato essere 6,6 nM. Negli esperimenti di legame competitivo, vengono utilizzati 25 nM di proteina cIAP-2 BIR3 e 2 nM di tracciante SM5F. Per determinare le affinità di legame dei mimetici Smac a XIAP contenente entrambi i domini BIR2 e BIR3, viene stabilito un saggio di legame competitivo basato su FP utilizzando un tracciante bivalente marcato fluorescentemente, chiamato Smac-1F. Il valore di Kd del tracciante bivalente marcato per XIAP contenente i domini BIR2 e BIR3 è determinato essere 2,3 nM. Negli esperimenti di legame competitivo, un composto testato viene incubato con 3 nM di proteina XIAP contenente entrambi i domini BIR2 e BIR3 (residui 120-356) e 1 nM nello stesso tampone di saggio.

• Linee cellulari

  HT-29 cells

• Concentrazioni

  1 μM

• Tempo di incubazione

  6 or 12 h

• Metodo

  Cells pre-treated with HG (5 μM) for 30 min were treatment with SM-164 (1 μM) for 6 or 12 h.

• Modelli animali

  MDA-MB-231 xenografted SCID mice

• Dosaggi

  1 and 5 mg/kg

• Somministrazione

  i.v.