Simvastatin (MK-733)

Prima dell'uso nei saggi cellulari, la Simvastatin deve essere attivata tramite trattamento con NaOH in EtOH. Questo composto inibisce la sintesi del colesterolo nelle cellule L-M di topo (fibroblasti), nelle cellule H4II E di ratto (fegato) e nelle cellule Hep G2 umane (fegato) con IC50 di 19,3 nM, 13,3 nM e 15,6 nM, rispettivamente. [1]

Il trattamento con questo composto porta a un aumento dose-dipendente della fosforilazione della serina 473 di Akt entro 30 minuti, con la fosforilazione massima che si verifica a 1,0 µM. Esso (1,0 μM) potenzia la fosforilazione del substrato endogeno di Akt, l'ossido nitrico sintasi endoteliale (eNOS), inibisce l'apoptosi dei mezzi privi di siero e accelera la formazione della struttura vascolare. [2]

Questa sostanza chimica mostra effetti anti-infiammatori in vitro. Essa (10 μM) riduce la proliferazione delle cellule mononucleate derivate dal sangue periferico e delle cellule del liquido sinoviale da sangue di artrite reumatoide stimolata dagli anticorpi anti-CD3/anti-CD28, così come il rilascio di IFN-γ. Questo composto (10 μM) sopprime il rilascio di TNF-γ mediato dai macrofagi indotto tramite interazioni cognate di circa il 30%. [3]

L'amministrazione orale di Simvastatin inibisce la conversione dell'acetato radiomarcato in colesterolo con un IC50 di 0,2 mg/kg. [1]

Questo composto (4 mg/giorno) somministrato per via orale per 13 settimane a conigli nutriti con una dieta aterogena ricca di colesterolo, riporta i livelli aumentati di colesterolo totale, colesterolo LDL e colesterolo HDL indotti dal colesterolo a un livello normale. [4]

Questo composto (6 mg/kg) produce un aumento del legame dipendente dal recettore LDL e aumenta il numero di recettori LDL epatici nei conigli nutriti con una dieta contenente 0,25% di colesterolo. [5]

Questo composto influenza l'infiammazione indipendentemente dal suo effetto sul livello di colesterolo plasmatico. Nelle scimmie cynomolgus che hanno consumato una dieta aterogena, questo composto (20 mg/kg/giorno) induce un contenuto di macrofagi 1,3 volte inferiore nelle lesioni e un'espressione 2 volte inferiore della molecola di adesione cellulare vascolare-1, dell'interleuchina-1 beta e del fattore tissutale, accompagnato da un aumento di 2,1 volte delle cellule muscolari lisce lesionali e del contenuto di collagene. [6]

• Saggio di attività della HMG-CoA reduttasi

  Il volume totale di ogni saggio è di 95 μL e la miscela di reazione conteneva 10 μL del composto inibitore da testare e 85 μL del tampone di incubazione contenente 2 mg/mL di microsomi epatici, 0,1 M di KH₂PO₄, pH 7,2, 5,7 mM di ditiotreitolo, 10 mM di glucosio-6-fosfato, 2 U/mL di glucosio-6-fosfato deidrogenasi, 1 mM di NADP, 10 μM di miconazolo. Gli esperimenti di controllo sono stati eseguiti senza sistema di generazione di NADPH. Tutti i campioni sono stati incubati 10 min a 37 ℃ prima dell'aggiunta di 5 μL di substrato (HMG-3-idrossi-3-metil glutaril CoA non marcato e 14C, concentrazione finale 50 μM, 2,5 nCi/nmole). Dopo 30 min a 37 ℃, la reazione è stata interrotta aggiungendo 27 μL di HCl 1N e 20 μL di mevalonolattone non marcato (200 μg/saggio). La conversione dell'acido mevalonico in lattone è stata eseguita a temperatura ambiente per 60 min.

• Linee cellulari

  HUVECs

• Concentrazioni

  1 μM

• Tempo di incubazione

  30 minutes

• Metodo

  HUVECs were treated with simvastatin for 30 minutes.

• Modelli animali

  Male Japanese white rabbits

• Dosaggi

  2.5, 5, & 10 mg/kg

• Somministrazione

  Oral