SB-525334

SB 525334 non mostra alcuna inibizione sugli enzimi ALK2, 3 e 6, con valori di IC50 > 10 µM. SB 525334 blocca la fosforilazione indotta da TGF-β1 e la traslocazione nucleare di Smad2/3 nelle cellule tubulari renali prossimali. SB 525334 inibisce anche l'aumento dei livelli di espressione dell'mRNA dell'inibitore dell'attivatore del plasminogeno-1 (PAI-1) e del procollagene α1(I) indotti da TGF-β1 nelle cellule di carcinoma epiteliale renale A498 a 1 µM). [1] SB 525334 (1 µM) attenua la maggiore sensibilità al TGF-β1 esibita dalle cellule muscolari lisce dell'arteria polmonare (PASMC) di pazienti con forme familiari di ipertensione arteriosa polmonare idiopatica (PAH). [2]

SB 525334 (10 mg/kg/giorno) diminuisce i livelli di mRNA renali di PAI-1, procollagene α1(I) e procollagene α1(III) in un modello di ratto di fibrosi renale indotta da nefrite. Inoltre, la proteinuria indotta da PAN è significativamente inibita da SB 525334 (10 mg/kg/giorno). [1] SB 525334 può anche essere efficace nei tumori mesenchimali. SB 525334 (10 mg/kg/giorno) diminuisce significativamente l'incidenza, la molteplicità e le dimensioni dei tumori mesenchimali uterini nei ratti Eker. [3] SB 525334 inverte significativamente la pressione arteriosa polmonare e inibisce l'ipertrofia ventricolare destra in un modello di ratto di PAH. Ciò è rivelato da una significativa riduzione della muscolarizzazione delle arteriole polmonari indotta da monocrotalina (usata per indurre PAH) dopo il trattamento con SB 525334 (3 o 30 mg/kg). [2] In un modello di topi con fibrosi polmonare indotta, SB 525334 (10 mg/kg o 30 mg/kg) attenua le alterazioni istopatologiche nel polmone e diminuisce significativamente l'espressione di mRNA del procollagene di tipo I e III e della fibronectina. SB 525334 attenua anche la traslocazione nucleare di Smad2/3, la proliferazione dei miofibroblasti, il deposito di collagene di tipo I e diminuisce le cellule che esprimono CTGF. [4]

• Saggio di chinasi per determinare la potenza e la selettività di SB 525334

  Al fine di determinare la potenza di SB 525334, il dominio chinasico purificato di ALK5 con tag GST viene incubato con Smad3 a lunghezza intera purificato con tag GST in presenza di ³³P-γATP e diverse concentrazioni di SB 525334. La lettura è Smad3 radiomarcato. Per determinare la selettività di SB 525334, il dominio chinasico purificato di ALK2 e ALK4 con tag GST viene incubato con Smad1 e Smad3 a lunghezza intera con tag GST, rispettivamente, in presenza di diverse concentrazioni di SB 525334. Vengono calcolati i valori di IC50.

• Linee cellulari

  Human renal proximal tubule epithelial (RPTE) cells

• Concentrazioni

  1 μM

• Tempo di incubazione

  1 hour

• Metodo

  RPTE cells are seeded on microscope slides. The following day, the cells are starved for 24 hours to dosing by removal of the serum and epidermal growth factor. Cells are treated with either 10 ng/mL TGF-β1, 1 μM SB 525334, or a combination of both. Slides are pretreated with SB 525334 or starve media for 3 hours prior to a 1-hour incubation at 37 °C with TGF-β1 or starve media. The cells are then fixed and permeabilized. The slides are blocked with BSA, incubated with a mouse anti-Smad2/3 primary antibody followed by an anti-mouse IgG secondary antibody. The slides are then viewed in a confocal microscope and nuclear signal intensity is analyzed.

• Modelli animali

  induced pulmonary fibrosis in female Eker rats

• Dosaggi

  Estimated dose of 10 mg/kg/day

• Somministrazione

  Oral (in drinking water)