SB202190

SB 202190 inibisce significativamente l'attività della MAPKAPK 2 sia basale che indotta da anticorpi anti-Fas in modo dose-dipendente. Questo composto da solo è sufficiente per indurre la morte cellulare nelle cellule Jurkat e HeLa attraverso l'attivazione di caspasi simili a CPP32, che può essere bloccata dall'espressione di bcl-2. La sua apoptosi è attenuata da p38β ma aumentata da p38α. [2] La sostanza chimica inibisce fortemente l'espressione della proteina COX-2 indotta dai raggi UVB nelle cellule HaCaT e inibisce marcatamente l'mRNA di cox-2 indotto dai raggi UVB. [3] Il trattamento con questo inibitore inibisce l'espressione dei geni proinfiammatori (monocyte chemoattractant protein-1) indotti dall'albumina e dei geni profibrotici (procollagen-Ialpha1) indotti dal fattore di crescita trasformante (TGF)-beta1 di oltre il 50% nelle cellule tubulari renali (rene di ratto normale-52E). [4] Induce la fosforilazione di JNK in modo dose- e tempo-dipendente nelle cellule A549, induce la fosforilazione del fattore di trascrizione ATF-2 e aumenta il legame al DNA di AP-1. [6] Questo agente migliora la crescita delle cellule THP-1 e MV4-11. Aumenta la fosforilazione di c-Raf e ERK, suggerendo che l'attivazione della via Ras-Raf-MEK-mitogen-activated protein kinase (MAPK) è coinvolta nella crescita delle cellule leucemiche indotta da questo composto. [7]

L'inibizione di p38 mediante la somministrazione di SB202190 inibisce la formazione di bolle indotta dalle IgG di PV nel modello murino a trasferimento passivo. [5] Nel modello di endotossina di sepsi, il trattamento con questo composto produce un beneficio di sopravvivenza statisticamente significativo rispetto al controllo. [8]

• Saggi chinasici in vitro

  Le p38α e p38β sono saggiate in 25 mM Tris-HCl, pH 7.5, contenente 0.1 mM EGTA, con proteina basica della mielina (0.33 mg/mL) come substrato. I saggi vengono eseguiti manualmente per 10 minuti a 30 °C in incubazioni da 50 μL utilizzando [γ-³³P]ATP, oppure con una stazione di lavoro di automazione di laboratorio Biomek 2000 in un formato a 96 pozzetti per 40 minuti a temperatura ambiente in incubazioni da 25 μL utilizzando [γ-³³P]ATP. Le concentrazioni di ATP e acetato di magnesio sono rispettivamente 0.1 mM e 10 mM. Tutti i saggi vengono avviati con MgATP. I saggi manuali vengono terminati spruzzando aliquote di incubazione su carta fosfocellulosa, seguite da immersione in 50 mM di acido fosforico. I saggi robotici vengono terminati con l'aggiunta di 5 μL di acido fosforico 0.5 M prima di spruzzare aliquote su tappetini filtranti P30. Tutti i fogli vengono quindi lavati quattro volte in 50 mM di acido fosforico per rimuovere l'ATP, una volta in acetone (incubazioni manuali) o metanolo (incubazioni robotiche), e quindi essiccati e contati per la radioattività.

• Linee cellulari

  Jurkat, and HeLa

• Concentrazioni

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~50 μM

• Tempo di incubazione

  24 hours

• Metodo

  Cells are serum-starved and then treated with different concentration of SB 202190 for 24 hours. Cell viability is assayed by either trypan blue exclusion or propidium iodide exclusion followed by flow cytometry analysis. The apoptotic nuclei are visualized by H33258 staining.

• Modelli animali

  C57BL/6J mice injected i.d. with a sterile solution of either control IgG or PV IgG

• Dosaggi

  12.5 μg

• Somministrazione

  Administered via i.d.