Rimonabant (SR141716)

Rimonabant (SR141716) riduce l'attività ACAT in modo dose-dipendente nei macrofagi Raw264.7 con IC50 di 2,9 μM e nei macrofagi peritoneali isolati. Inibisce l'attività ACAT in cellule CHO-ACAT1 e CHO-ACAT2 intatte e in saggi acellulari con efficienza approssimativamente uguale, con IC50 di 1,5 μM e 2,2 μM per CHO-ACAT1 e CHO-ACAT2, rispettivamente. In accordo con l'inibizione dell'ACAT, questo trattamento con il composto blocca i processi ACAT-dipendenti nei macrofagi, l'apoptosi indotta da ossisteroli e la formazione di cellule schiumose indotta da LDL acetilato. [2] Antagonizza gli effetti inibitori degli agonisti del Cannabinoid Receptor sia sulle contrazioni del dotto deferente di topo che sull'attività dell'adenilato ciclasi nelle membrane cerebrali di ratto in modo concentrazione-dipendente. [3] Il composto riduce significativamente la crescita cellulare e induce la morte cellulare di cellule di carcinoma colorettale umano (DLD-1, CaCo-2 e SW620). È in grado di alterare la distribuzione del ciclo cellulare in tutte le linee cellulari testate. In particolare, Rimonabant produce un arresto del ciclo cellulare in G2/M nelle cellule DLD-1 senza indurre apoptosi o necrosi. [4]

Rimonabant (SR141716) viene somministrato per via intraperitoneale o orale e antagonizza potentemente e in modo dose-dipendente i classici effetti farmacologici e comportamentali degli agonisti del Cannabinoid Receptor. [3] Nel modello murino di carcinogenesi del colon indotta da azoximetano, ha significativamente diminuito la formazione di foci criptici aberranti (ACF), che precedono il cancro colorettale. [4] Questo composto (10 mg/kg per gavage) viene somministrato per 2 settimane a ratti Zucker maschi obesi di 3 mesi come modello di intolleranza al glucosio e per 10 settimane a ratti Zucker maschi obesi di 6 mesi come modello della sindrome metabolica. I livelli sierici di RANTES (Regulated upon Activation, Normal T cell Expressed, and Secreted) e MCP-1 (proteina chemiotattica monocitaria-1) sono aumentati nei ratti Zucker obesi rispetto a quelli magri e significativamente ridotti dal trattamento a lungo termine con esso, il che rallenta l'aumento di peso nei ratti con sindrome metabolica. Neutrofili e monociti sono significativamente aumentati nei ratti Zucker obesi giovani e anziani rispetto a quelli magri e ridotti da questo composto. Il fibrinogeno legato alle piastrine è significativamente aumentato nei ratti Zucker obesi rispetto a quelli magri di entrambe le età, ed è ridotto da esso. Le piastrine di ratti obesi sono più sensibili all'aggregazione indotta dalla trombina e all'adesione al fibrinogeno, entrambi attenuati dalla terapia con Rimonabant. [5]

• Saggio di legame del radioligando

  Le cellule HEK 293 stabilmente trasfettate con CB1 e CB2 umani e la membrana cellulare vengono purificate. 0,2-8 μg della membrana purificata vengono incubati con 0,75 nM [³H] CP55,940 e Rimonabant (SR141716) nel tampone di incubazione (50 mM Tris-HCl, 5 mM MgCl₂, 1 mM EDTA, 0,3% BSA, pH 7,4). Il legame non specifico è definito in presenza di 1 μM di CP55,940. Le reazioni vengono incubate per un'ora e mezza a 30 °C in Multiscreen. Le reazioni vengono terminate mediante filtrazione a collettore e lavate quattro volte con tampone di lavaggio ghiacciato (50 mM Tris, pH 7,4, 0,25% BSA). La radioattività legata ai filtri viene misurata con Topcount. L'IC50 è determinata come la concentrazione di questo composto necessaria per inibire il 50% del legame di [³H] CP55,940 e calcolata mediante regressione non lineare.

• Linee cellulari

  Raw 264.7 cells

• Concentrazioni

  0,1,4 μM

• Tempo di incubazione

  17 hours

• Metodo

  Raw 264.7 cells (2 × 10⁶ /well) in 12-well plates are rinsed with PBS and refed culture media supplemented with varying amounts of Rimonabant (SR141716). One hour prior to supplementation with 7-ketocholesterol (7KC), this compound is introduced. All wells are adjusted to receive equal amounts of vehicle. Following 16-hour incubation, caspase-3 and caspase 3-like activity are determined using a fluorogenic substrate (Ac-DEVD-AFC) and a spectrofluorometer equipped with a microplate reader.

• Modelli animali

  Male mice and male rats

• Dosaggi

  20 ml/kg (mice) and 5 ml/kg (rats)

• Somministrazione

  Rimonabant is administered i.p. (30 minutes) or p.o. (1hour) before the i.v. injection of WIN55212-2.