QNZ (EVP4593)

QNZ (EVP4593) inibisce la produzione di TNF-a da splenociti murini stimolati con LPS con un IC50 di 7 nM. [1]

Questo composto (300 nM) comporta una significativa diminuzione dell'ampiezza delle correnti operate dal deposito (circa del 60%), indotte dall'applicazione di 1 μM di tapsigargina nelle cellule Htt138Q, prevenendo così un'anormale entrata di calcio operata dal deposito. È in grado di inibire l'attività dei canali contenenti TRPC1 come una delle subunità, ma non ha alcun effetto sui canali omooligomerici composti esclusivamente da TRPC1. [2]

A 40 nM, abolisce completamente l'aumento del numero e della lunghezza dei neuriti evocato dal trattamento con laminina delle cellule di Schwann. QNZ riduce la lunghezza dei neuriti del 61,36% nelle cellule di Schwann. Inibisce significativamente la crescita dei neuriti indotta da laminina. Diminuisce anche notevolmente l'allungamento dei neuriti dopo 72 ore di coltura, il che implica che sia la germinazione iniziale che la crescita e l'estensione a lungo termine osservate in risposta alle cellule di Schwann seminate su laminina sono mediate da NF-κB. [3]

A 10 nM, abolisce la sovraregolazione dell'espressione di CSE indotta da LPS nei neutrofili di ratto. [4]

A 100 nM, blocca gli effetti di induzione di GRO/KC sulle correnti K nei neuroni IB4-negativi. [5]

QNZ (EVP4593) (1 mg/kg, i.p.) inibisce in modo dose-dipendente l'edema della zampa indotto da carragenina nei ratti. [1]

• Saggio NF-κB

  Le cellule T Jurkat umane vengono coltivate a 37 ℃ in un'atmosfera al 5% di CO₂ in RPMI1640 contenente il 10% di FCS. Le cellule vengono piastrate in piastre a 6 pozzetti (2×10⁶/pozzetto) e trasfettate transitoriamente utilizzando il reagente di trasfezione SuperFect con 1 μg di pNFκB-Luc. Dopo la trasfezione, le cellule vengono coltivate a 37 ℃ per una notte. Vengono quindi raccolte, risospese in terreno fresco e piastrate in piastre a 96 pozzetti (2×10⁵/pozzetto). QNZ (EVP4593) viene disciolto in DMSO e aggiunto alle concentrazioni appropriate alle piastre a 96 pozzetti contenenti le cellule, e le piastre vengono quindi incubate a 37 ℃ per 1 ora. Per l'induzione della trascrizione, vengono aggiunti 10 ng/mL di PMA e 100 μg/mL di PHA a ciascun pozzetto, e le cellule vengono incubate per ulteriori 6 ore a 37 ℃. I terreni di coltura vengono rimossi e il tampone di lisi cellulare contenente il substrato della luciferasi viene aggiunto a ciascun pozzetto. Ogni porzione viene trasferita in una piastra nera a 96 pozzetti, e quindi la luminescenza viene immediatamente misurata con un Packard Topcount. I valori della concentrazione inibitoria al 50% (IC₅₀) vengono calcolati con un metodo di regressione non lineare.

• Linee cellulari

  Jurkat cells

• Concentrazioni

  IC50 of 11 nM (NF-κB) and 7 nM (TNF-α)

• Tempo di incubazione

  1 h

• Metodo

  QNZ (EVP4593) was dissolved in DMSO and added at the appropriate concentrations to the 96-well plates containing the cells, and the plates were then incubated at 37 C for 1 h

• Modelli animali

  male SD rats with carrageenin induced paw edema

• Dosaggi

  1 mg/kg

• Somministrazione

  intraperitoneal injection